水貂附红细胞体的体外培养试验

在RPMI-1640、D-MEM、M-199、HL培养液中添加30%的新生牛血清或水貂血清,采用37℃、5%CO2条件下体外培养水貂附红细胞体,每12 h更换1次培养液,补充适量健康水貂红细胞,并作传代培养。试验结果表明,RPMI-1640和HL培养液附红细胞体的感染率和感染强度高于D-MEM和M-199培养液,在RPMI-1640和HL培养液中添加30%水貂血清的感染率和感染强度高于添加30%新生牛血清,且RPMI-1640略好于HL培养液,培养12 h后,获得了高达80%以上的感染率;体外传代连续培养23代。     

水貂附红细胞体的体外培养试验

[目的]对水貂附红细胞体进行体外培养试验。[方法]在 RPMI-1640、DMEM、M-199和 HL培养液中添加30%的新生牛血清或水貂血清,在37℃、5% CO2条件下体外培养水貂附红细胞体,每12 h更换1次培养液,补充适量健康水貂红细胞,并进行传代培养。[结果]RPMI-1640和 HL培养液中附红细胞体的感染率和感染强度高于 DMEM和 M-199培养液,在RPMI-1640和 HL培养液中添加30%水貂血清附红细胞体的感染率和感染强度高于添加30%新生牛血清,且 RPMI-1640略高于HL培养液,培养12 h后获得了80%以上的感染率,且体外传代可连续培养23代。[结论]该研究为筛选有效防治水貂附红细胞体的药物及制备诊断抗原与研制疫苗提供了有效的途径。     

猪附红细胞体的形态学观察

对感染附红细胞体临床症状典型的10头猪的10个样品分别进行新鲜血液压片、瑞氏染色、姬姆萨染色镜检,进而对其电镜扫描进行形态学观察.结果表明,大小不等的链球状、卵圆形、杆状的附红细胞体单一或成团寄生在红细胞表面,使红细胞膜表面出现皱褶、突起、凹陷,红细胞失去球形立体形态,有的呈齿轮状或星芒状,有的呈不规则的多边形,红细胞结构和功能均发生了改变.     

猪附红细胞体PCR诊断方法的建立

据猪附红细胞体重庆株16S rRNA基因的序列特点设计合成种特异性引物,建立了猪附红细胞体PCR诊断方法.该方法能特异性扩增840 bp的猪附红细胞体16S rRNA基因片段,而对牛温氏附红细胞体、羊附红细胞体、猫血巴尔通氏体CA株、绵羊肺炎支原体、猪肺炎支原体、假单孢茵、大肠杆茵、沙门氏茵、肝片吸虫、葡萄球菌等的基因组DNA没有扩增条带出现.对猪附红细胞体基因组DNA的最小检测量为0.16 fg.通过对30份临床样品的检测,21份猪附红细胞体感染为阳性,其余为阴性.结果表明:建立的PCR诊断方法具有很高的敏感性和特异性,可用于猪附红细胞体的临床诊断和流行病学调查.     

猪附红细胞体快速诊断方法的研究

根据GenBank上已报道的猪附红细胞体16S rRNA的序列设计一对特异性引物,进行PCR扩增并将产物克隆到T-vector后测序.结果表明扩增到的目的基因片段为404 bp,与GenBank上Mycoplasma suis序列同源性为97%.试验建立的PCR诊断方法特异性强,与健康猪血液、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、弓形虫、猪圆环病毒DNA无交叉反应,能检测出的最低DNA浓度是8.6 fg·μL-1.该方法具有快速、准确、敏感等特点,为浙江地区猪附红细胞体病的诊断及分子流行病学的调查提供了新的手段.     

猪附红细胞体的诊治

2002年7月,本市市区先后有几家猪场发生了以高热、精食沉郁、食欲废绝、皮肤和粘膜苍白,呼吸困难,尿色深黄或发红为特征的疾病.经临床和实验室经断,确诊为猪附红细胞体病.     

猪附红细胞体的综合防治

阐述了猪附红体细胞病的流行特点及临床症状,描述了该病的诊断特征和防治方法,为广大养殖户提供参考。     

猪附红细胞体PCR检测方法的建立

 根据已发表的部分猪附红细胞体序列设计了一对特异性引物，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增出了一条约936 bp的基因片段，并成功地将该基因克隆于克隆载体PMD18-T，经酶切分析和PCR进一步鉴定后进行序列测定，结果表明，所克隆的目的基因与GenBank中发表的序列一致。并利用特异性引物初步建立了猪附红细胞体病PCR检测技术。     

三种中草药提取物对猪附红细胞体的体外药敏试验

研究了骆驼蓬子、常山、狼毒3种中草药提取物体外抑制猪附红细胞体的效果.结果表明:3种中草药提取物的高剂量组(4000μg·mL-1,2000μg·mL-1)5min后均可完全使附红细胞体从红细胞上脱落,红细胞感染率均为0;中剂量组(1000μg·mL-1)5min后可以使部分附红细胞体脱落,红细胞感染率为15%～30%;低剂量组(500μg·mL-1)无明显药效作用,5min后红细胞感染率仍为70%～85%;而对照组红细胞感染率为90%以上.表明猪附红细胞体对3种中草药提取物的中高剂量组较敏感,低剂量组不敏感.     

猪附红细胞体的症状与防治方法

为了提高养猪技术,预防疫情,结合养殖实践,以福泉市金山街道某猪场2015年11月发生的一种以稽留热、食欲减退、皮肤发红等为主要症状的疾病为例,对猪附红细胞体病的症状和防治方法等进行了总结。     

猪附红细胞体病鉴别诊断研究进展

猪附红细胞体病是由立克次氏体目中的附红细胞体寄生于猪的血浆和红细胞中而引起的一种人畜共患的热性传染病。详细叙述了猪附红细胞体病的传播途径和鉴别诊断方法,旨在为控制该病的发生和流行提供一定参考。     

一起猪附红细胞体病的防治体会

对猪附红细胞体病的流行病学临床症状、病理变化、实验室诊断方法进行分析总结,并提出防治措施:严格执行猪场的消毒制度;做好预防性工作;对病猪进行积极治疗;无害化处理危重病猪及死猪。     

豫南地区猪附红细胞体病的调查与分析

2002年6月份以来,信阳市各县区及周边地区继去年同期发生猪附红细胞体病后,再次爆发了以高热、皮肤发红、黄疸、贫血等为主要特征的疾病,导致大批猪只的淘汰和死亡。经诊断,确诊为猪附红细胞体病。     

猪附红细胞体基因与蛋白研究进展

对猪附红细胞体病的流行分布与危害,猪附红细胞体基因与蛋白概况和主要基因与蛋白等方面进行了系统阐述,以期为猪附红细胞体功能基因与蛋白的深入研究和该病的有效防控提供参考。     

猪放线杆菌、附红细胞体、繁殖与呼吸综合症病毒混合感染的诊断和防治

南宁市某猪场发生了一起以发热、呼吸困难、母猪繁殖障碍为特征的疫病。经流行病学调查、临床症状、病变观察、实验室检查，确定为猪放线杆菌、附红细胞体、繁殖与呼吸综合症混合感染，使用敏感药物治疗和采取综合防制措施，疫情得到控制。     

猪嗜血支原体诊断方法的比较

[目的]建立猪嗜血支原体的PCR诊断方法,并与常规染色镜检诊断方法进行比较。[方法]对采自新疆阿拉尔垦区的疑似样品分别采用吖啶橙、姬姆萨染色镜检,采用温度法将嗜血支原体从红细胞上解离下来,提取其基因。根据GenBank上发表的猪嗜血支原体16S rRNA基因组序列（U88565）设计1对特异性引物,进行PCR扩增,建立猪嗜血支原体的PCR诊断方法。[结果]比较了3种诊断方法,指出了各自的优劣。所建立的PCR方法为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新手段。     

狐狸附红细胞体体外药物杀灭试验

以RPMI-1640为基础培养液，加入30％犊牛血清，选用贝尼尔、土霉素、大蒜素、强力霉素、咪唑苯脲、氟苯尼考、附红绝杀、磷酸伯氨喹等药物原粉，在37．3℃、5％CO2气体条件下对狐狸附红细胞体进行了体外药物筛选试验。结果表明，附红绝杀效果最好；磷酸伯氨喹和贝尼尔药物次之；咪唑苯脲、大蒜索、氟苯尼考有效。     

猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测

构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工感染SPF小鼠,感染后通过血液压片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。同时检测对照组和试验组小鼠的血液常规指标变化,红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化,发现试验组小鼠红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,红细胞免疫黏附功能下降,其他指标没有显著变化。