布鲁氏菌菌种保存期

对１２株至少已冷藏２０年的布鲁氏菌冻干培养物按其常规鉴定项目进行了鉴定，Ｓ－Ｒ变异、对豚鼠的致病性、对动物的免疫原性和试管内抗原性等试验，这２０株菌中包括４株马尔他热布鲁氏菌、４株流产布鲁氏菌、３株猪布鲁氏菌和一株羊布鲁氏菌，其中部分为定型菌株。全部培养物皆未显示出与使用标准有和差异，此结果说明布鲁氏菌冻干培养物至少可保存２０年。     

布钱氏菌菌种保存期

对１２株至少已冷藏２０年的布鲁氏菌冻干培养物按其常规鉴定项目进行了鉴定，Ｓ－Ｒ变异，对豚鼠的致病性，对动物的免疫原性和试管抗原性等试验，这２０株菌中包括４株马尔他热布鲁氏菌，４株流产布鲁氏菌，３株猪布鲁氏菌和一株羊布鲁氏菌，其中部分为定型菌株。     

西藏部分地区布鲁氏菌的分离和菌型鉴定

从西藏浪卡子、贡嘎等县11个乡收集牛、羊流产胎儿176头(只),分离出布鲁氏菌17株,连同保存的8株,共25株,经种型鉴定。其中,羊种菌(1、2、3型)21株,占鉴定菌株的84％;猪1型菌和未定型的菌各2株,均占鉴定菌株的8％。进一步证明,布鲁氏菌在西藏是以羊种菌为主,主要宿主有牛、羊和猪。     

对布鲁氏菌血清学试验的异常阳性反应牛的调查研究

对血清学上呈阳性反应但不认为被流产布鲁氏菌感染的50头牛进行了研究。结论是仅有一头牛被感染,因为细菌学检查,只获得一株流产布鲁氏菌分离物(19号菌株),原牛群没有任何一群在以后表现有布鲁氏菌病。在15头牛的膝关节液中检出抗体,这是在有活力的病原体消灭以后,持久存在于胶原组织中的19号菌株抗原刺激牛体而产生的。     

流产布鲁氏菌疫苗候选株RB6生物学特性研究

为了开发布鲁氏菌病新型标记疫苗,本研究对流产布鲁氏菌基因缺失株RB6的培养特性、染色特性、凝集特性、稳定性及小鼠体内毒力和免疫保护力进行了系统鉴定,旨在阐明该菌株具备的生物学特性。通过对亲本菌株和RB6的比较,发现固体培养基上RB6菌株单菌落可被结晶紫染成紫色,RB6菌株液体培养物可与0.1%吖啶黄染料以及抗布鲁氏菌粗糙型抗体发生凝集反应,证明该菌株为粗糙型。将RB6菌株在体外连续传代培养20次和牛体内连续5次继代,检测结果证明其表型未发生变化,说明该菌株遗传稳定性良好。通过小鼠体内试验发现该菌株毒力显著降低,并对流产布鲁氏菌强毒菌株2308攻毒的免疫保护力与现有疫苗A19接近。本研究结果表明,流产布鲁氏菌基因缺失株RB6为粗糙型菌株,毒力较低、安全性高、遗传性状稳定,并具有良好的免疫保护效力,有望开发成为动物布鲁氏菌病粗糙型标记疫苗。     

奶牛布鲁氏菌分离与鉴定

为查明甘肃省永靖县奶牛感染布鲁氏菌病的菌种和类型,为该地区布病科学防控提供技术支撑,2016年9月,对永靖县3份疑似感染布鲁氏菌病奶牛脾脏进行了病原的分离与鉴定。结果表明:PCR从3份样本均检测出布鲁氏菌;细菌分离培养,15 d内,3份样本中只有1份样本生长菌落,其余2份样本培养无细菌菌落出现;分离的1份菌株用AMOS-PCR获得流产布鲁氏菌特征的扩增条带;分离菌株的opm25基因测序结果与流产布鲁氏菌高度吻合。     

胸膜肺炎嗜血杆菌的分离和鉴定

采用自行设计的分离培养基,从胸膜肺炎病死猪及屠宰猪的病变肺中分离到11株胸膜肺炎嗜血杆菌(Haem-ophilus pleuropneumoniae).经生化及培养特性鉴定与国际标准菌株一致.血清7型的3株分离物均人工复制出典型的猪胸膜肺炎嗜血杆菌病的症状和病变.3株分离菌株和国际7型标准菌株培养物,经电镜观察、首次发现本菌具有纤细的直纤毛.     

甘肃省永靖县奶牛布鲁氏菌病监测与病原分离鉴定

为查明甘肃省永靖县奶牛布鲁氏菌病流行情况、感染菌种和类型,2013—2017年对永靖县8月龄以上奶牛进行了布鲁氏菌病监测,对2016年检出的3份疑似感染布鲁氏菌奶牛的脾脏进行了病原分离与鉴定。结果显示:2013—2014年检测奶牛444头,未检出阳性;2015—2016年检测奶牛706头,检出阳性63头,个体阳性率为8.92%;3份脾脏样本均为布鲁氏菌PCR检测阳性,细菌分离培养15 d,只有1份生长菌落;将分离菌株用AMOS-PCR进行检测,获得流产布鲁氏菌特征的扩增条带,且分离菌株的omp25基因测序结果与流产布鲁氏菌高度吻合。本监测和细菌分离鉴定结果为该地布鲁氏菌病防控提供了技术支撑。     

一株犬种布鲁氏菌的分离与鉴定

对从一只流产贵宾犬全血中分离到的一株布鲁氏菌进行了形态结构、培养特性、生化特性研究以及凝集试验鉴定和多种属聚合酶链式反应(AMOS-PCR)鉴定.结果表明,分离菌为革兰氏阴性菌,在胰际琼脂培养基生长并呈典型的粗糙型布鲁氏菌菌落,菌落能被结晶紫溶液染成紫色.分离菌在琉瑾和复红培养基上生长,不产生H2S,与粗糙型布鲁氏菌阳性血清凝集,与光滑型布鲁氏菌阳性血清无凝集.用AMOS-PCR方法对分离菌进行鉴定,该分离菌具有犬种布鲁氏菌特有条带.鉴定结果表明分离菌符合犬种布鲁氏菌特性,将其命名为B.canis GB1.     

奶牛布鲁氏菌病的病原分离与鉴定

本试验对疑似布鲁氏菌病的样本进行了病原分离,采用血清学试验、染色镜检、PCR和基因克隆测序对分离菌株进行了鉴定。结果表明,4株分离菌株均为布鲁氏菌属细菌,与布鲁氏菌参考菌株的核苷酸同源性为99.52%~100%。采用AMOS PCR对4株分离菌株进行种特异性鉴定,结果显示,1株为猪种布鲁氏菌,3株为牛种布鲁氏菌。     

奶牛布鲁氏菌病的病原分离与鉴定

为给奶牛布鲁氏菌病实验室诊断提供技术参考,对疑似布鲁氏菌病病例进行了病原分离培养,并采用平板直接凝集试验、革兰氏染色镜检、柯兹洛夫鉴别染色镜检和PCR方法对分离菌株进行了鉴定.结果表明：分离的4株细菌均为布鲁氏菌属细菌.     

西藏布鲁氏菌分离鉴定和菌型特点的初步探讨

为摸清我区布鲁氏菌病的分布和流行规律,掌握各菌种的菌型特性、菌株变异和菌型分布、宿主及其转移等问题,为制订合理的防治措施提供科学依据。我们分离和收集了全区不同疫区的布鲁氏菌59株,进行了菌种菌型鉴定。现报告如下。     

牛布鲁氏菌病的流行与防控

<正>牛布鲁氏菌病通常是由流产布鲁氏生菌引起的,猪布鲁氏菌对牛呈隐性感染。流产布鲁氏菌感染牛科的所有动物,包括瘤牛、牦牛、家水牛和野牛,同时也感染其他偶蹄类动物。本病主要的传染源是流产奶牛,布鲁氏菌病常引起妊娠母牛流产,同时导致子宫炎和胎衣不下(RFM);可以引起公牛发生睾丸炎、附睾炎及副性腺感染。通过实验室诊断可确诊本病。根据法规,本病不能治疗,以防控为主。1流行性分析绵羊和山羊布鲁氏菌病是由马耳他布鲁氏菌引起的,牛     

羊种布鲁氏菌生物3型的分离和鉴定

本实验对新疆某羊场小尾寒羊5只流产胎儿进行布鲁氏菌病原分离、鉴定,结果从5只流产胎儿胃内容物中均分离到羊种布鲁氏菌生物3型。表明新疆羊群中存在羊种布鲁氏菌生物3型病原。     

一株犬种布鲁氏菌的分离鉴定及其在巨噬细胞内存活能力的研究

为分离鉴定流产犬的致病病原及其生物学特性，本研究从重庆某宠物医院无菌采集流产犬全血2份，将其涂布于布鲁氏菌选择培养基，分别在不含CO2和含7.5%CO2条件下37℃培养72 h，观察菌落形态，并经结晶紫染色，观察细菌类型。按照国家标准鉴定分离菌的生化特性。细菌分离结果显示，在不含CO2和含7.5%CO2的培养箱中2份流产犬全血样品在布鲁氏菌选择培养基上均长出边缘整齐、光滑的圆形菌落，透射光下，菌落呈浅黄色且有光泽；结晶紫染色结果显示分离菌为典型的粗糙型细菌；生化鉴定结果显示，分离株在TSA中的生长不依赖于CO2，且不产生H2S，氧化酶和脲酶试验均为强阳性。上述结果表明分离到一株犬种布鲁氏菌，命名为B. canis CQ3。对分离菌进行全基因组测序，利用MAUVE对分离株与GenBank中38株不同种的布鲁氏菌基因组进行比对，并构建分离菌全基因组的进化树。将不同种布鲁氏菌及分离株分别接种于TSB培养基中，通过测定不同时间的OD450nm值绘制各菌株的生长曲线。将各菌株及B. canis CQ3株分别以MOI 100感染小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7，在感染后的不同时间(1 h、24 h...     

广西猪场猪布鲁氏菌病的防制与净化

布鲁氏菌病（以下简称布病）是由布鲁氏菌属（Brucella）引起的人畜共患的传染、变态反应性疾病，其发现和不断发展已有一百多年历史了，首先是1887年英国军医Bruce从马尔他岛死亡于“马尔他热”的英国士兵的脾脏中分离的羊种布氏菌，根据本病临床特点，将此病试名为“波浪热”，1879年丹麦学者Bang和1914年美国学者Traum又分别从流产母牛的羊水和猪流产胎儿中分离到牛种布氏菌（Brubortus）和猪种布氏菌（Brusuis），此二者在形态、培养特性方面类似，因此归于同一菌属，称为布鲁氏菌病，至1921年和1924年分别在北美洲和意大利病人身上分离到牛种和猪种布氏菌，从而在流行病学上首次证实了病牛和病猪是人布病的另两种传染源。     

奶牛布鲁氏菌的PCR鉴定

采集内蒙古某地区的可疑感染布鲁氏菌病奶牛的乳样及奶牛流产胎儿的肺、肝、脾等相关病料,分离并培养出11株病原菌,经BCSP31-PCR、VirB8-PCR、多重PCR及AMOS-PCR4种PCR方法鉴定,证实11株病原菌均为布鲁氏菌,并将11株菌定型为牛种5,6,9或3b型.     

牦牛流产胎儿中流产布鲁氏菌的分离与鉴定

牦牛流产胎儿中流产布鲁氏菌的分离与鉴定杨建梅（四川省金川县农牧局６２４１００）流产布鲁氏菌病的特征是在怀孕的母牛中引起流产。过去一般依据流产胎儿的消化道及肺组织内可找到布菌，其他组织则无菌，认为流产布鲁氏菌病垂直感染是细菌通过吞咽羊水进入胎儿所致，可...     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及自家灭活苗的研制

从病猪体内分离细菌,对分离菌株从形态、染色、培养特性、生化特性等方面进行鉴定;用纸片扩散法筛选敏感药物,实验室合成氢氧化铝胶佐剂,制备自家苗对其进行防制。试验结果表明,该分离菌为副猪嗜血杆菌,病猪确诊为副猪嗜血杆菌病,分离菌对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢菌素高度敏感,用自家苗防制该病安全有效。结果提示,副猪嗜血杆菌病只有通过实验室分离鉴定才可确诊,临床应筛选敏感药物进行治疗,制备自家苗对预防该病有较好效果。     

猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

为查明贵阳市花溪区麦坪镇某猪场仔猪发生呼吸道疾病的病因,对送检的2头病猪采集病料进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验、PCR扩增及测序、药敏试验。结果:从病料样本中分离得到1株细菌,根据形态学和生化试验初步鉴定为副猪嗜血杆菌;应用细菌16S rRNA序列分析技术从分子水平对分离细菌进行分型鉴定,运用DNAStar软件与不同血清型副猪嗜血杆菌基因序列进行比对,发现分离菌与不同血清型副猪嗜血杆菌菌株16S rRNA序列同源且相似性为97.4%～100%,其中与血清5型相似性最高;系统进化分析显示,分离菌株与血清5型副猪嗜血杆菌进化关系最近;分离菌株对利福平、头孢氨苄、阿米卡星、环丙沙星、万古霉素敏感。结论:综合分离细菌传统鉴定方法和分子生物学鉴定方法的实验结果,确定分离菌株属于血清5型副猪嗜血杆菌。