三苯基锡对雄性SD大鼠性腺发育的影响

为研究三苯基锡(TPT)对雄性哺乳动物生殖的毒性作用,将20只雄性青春期Sparague Dawley(SD)大鼠随机分为3个不同剂量的试验组(0.5、5、50μg/kg)和1个对照组(生理盐水)。每3d灌胃1次,暴露54d,末次灌胃24h后用100g/L水合氯醛麻醉并处死大鼠,取其睾丸和附睾。采用石蜡切片和HE染色方法观察睾丸和附睾组织学;采用分光光度法测定睾丸中碱性磷酸酶(AKP)、总抗氧化能力(TAOC)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平。结果显示,大鼠睾丸内曲精小管直径随药物剂量的增加而减小,曲精小管生精细胞和管腔内精子数量均有不同程度减少;低、中剂量组AKP高于对照组,高剂量组低于对照组,但差异不显著(P0.05);低剂量组γ-GT活力和T-AOC显著高于对照组,中剂量组与对照组相比变化不明显,高剂量组显著低于对照组(P0.05)。试验证实了TPT在一定程度上影响了雄性大鼠性腺生长发育与精子发生,推测TPT对雄性哺乳动物具有生殖毒性。     

砷对雄性大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响

[目的]研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响。[方法]将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组以及低、中、高剂量砷染毒组,每组10只;采用自由饮水方式染毒,低、中、高剂量染毒组饮水中亚砷酸钠浓度分别为2.4、12.0、60.0 mg/L,连续染毒15周,对照组饮用蒸馏水;染毒试验结束后,对各组大鼠进行精子计数,计算精子存活率;制备睾丸组织切片进行病理学观察;利用免疫组化及Western blotting法测定大鼠睾丸组织中AQP-8及survivin蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠精子计数与精子存活率均降低,且差异显著（P<0.05）。低剂量染毒组大鼠生精小管无明显变化;中剂量染毒组大鼠生精上皮层数减少,小管间隙增宽;高剂量染毒组大鼠部分生精小管出现基膜溶解,生精上皮细胞层次紊乱,细胞间隙增大,间质出现水肿、渗出。免疫组化分析结果显示,AQP-8蛋白主要表达于各级生精细胞的细胞膜和精子细胞,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中AQP-8阳性细胞平均光密度值显著（P<0.05）升高;survivin蛋白...     

不同激活方法对猪卵胞质内单精子注射（ICSI）效果的影响

采用不同的注射方式结合人工激活方法处理猪卵母细胞,旨在探讨各处理方法对猪ICSI效果的影响。结果表明：假性注射＋未激活处理组卵母细胞的激活率虽然高于无机械刺激＋无激活处理对照组,但明显低于假性注射＋人工激活处理组;精子注射卵母细胞经CaCl2（1.8pL,30mmol/L）、离子霉素（15μmol/L,40min）和电脉冲（场强0.4kV/cm、脉冲时程90μs、1次脉冲）激活处理后,其激活率无显著性差异（P〉0.05）,CaCl2处理组的受精率显著高于离子霉素处理组（P〈0.05）,并与电激活处理组无显著性差异（P〉0.05）;但是,在假性注射组和对照组中,CaCl2处理组的孤雌发育率极显著地低于离子霉素和电激活处理组（P〈0.01）;CaCl2处理组的卵裂率（P〈0.01）和囊胚总细胞数（P〈0.05）显著高于对照组。因此,单纯注射性机械刺激对猪卵母细胞的激活效果较差,有必要进行人工激活;ICSI卵母细胞经CaCl2溶液激活处理后,能够取得较好的ICSI效果,而不显著增加其孤雌发育率。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠附睾的影响

试验旨在研究还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）对氟中毒小鼠附睾的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,分别为对照组和4组染氟组。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别供给含100 mg/L NaF的蒸馏水,自由饮水30 d。之后在染氟组中选择3组每日分别灌胃200、400和800 mg/（kg·只）GSH,同时各组小鼠再自由饮含氟水30 d。试验结束后,摘取小鼠附睾进行活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、GSH含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽硫转移酶（GSTs）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测,同时制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100 mg/L NaF组精子密度、精子活力、GSH含量、GPx和GR活性均显著下降（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均有所升高;100 mg/L NaF组精子畸形率、ROS和MDA含量较对照组均显著升高（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均降低,其中800 mg/kg GSH组效果明显。与对照组相比,100 mg/L NaF组附睾头、附睾体及附睾尾管腔厚度升高,管腔内精子数量下降;GSH添加组附睾头、附睾体及附睾尾的管腔厚度与管腔内精子数量都有所恢复,其中800 mg/kg GSH组效果较好。综上所述,添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,附睾组织形态结构一定程度上有所恢复,对附睾有一定的改善作用。     

从江香猪生精上皮周期及睾丸发育的形态学分析

试验旨在探究初情期前后生精上皮周期差异及睾丸发育过程中的形态学变化。通过测定15、30、60和90 d睾丸相关指数，结合睾丸组织形态学特征，判断香猪初情期，划分从江香猪生精上皮周期。结果显示，30 d的睾丸指数较15 d极显著升高（P<0.01），睾丸重、长轴及短轴的增长率分别为298.05%、66.42%和65.45%，60和90 d两个阶段睾丸重增长率相对稳定。形态学观察表明，从江香猪30 d时生精小管出现游离精子，完成第一次生精并进入初情期；与15 d相比，30 d生精小管面积和生精上皮厚度极显著增加（P<0.01），增长率分别为136.12%和40.19%，在60和90 d均处于稳定增长状态。睾丸细胞数统计显示，日龄增加不影响支持细胞（setoli cells，SC）数量（P>0.05），而30 d生殖细胞数（germ cells，GC）较15 d极显著增加（P<0.01）。相关分析结果发现，生殖细胞数量增加与生精小管面积增大、生精上皮厚度变化之间呈明显正相关（r=0.994；0.96）。根据生殖细胞组合形式差异，将初情期前后生精上皮分为3和8个阶段。初情期前生殖细胞以第一次减数分裂前期为主，A、B型精原细胞、SC、初级精母细胞（primary spermatocyte，Ps）、前细线期（preleptotene，PI）、细线期（leptotene，L）等生殖细胞在初情期前后生精上皮中均存在，而圆形精子（round spermatids，R）、延伸精子（elongating spermatid，E）、精子细胞（spermatozoa，S）仅存在于初情期后的生精上皮。本研究结果表明，从江香猪30 d初情，睾丸发育以生殖细胞和生精小管面积的迅速增加为主，该结果对从江香猪早熟性状挖掘、种猪选育及开发利用等有重要的指导意义。     

增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

为评价增精宝对雄性动物生精作用的影响,采用环磷酰胺致小鼠生精障碍为动物模型,考察不同剂量增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍的保护作用。结果显示,高剂量组对小鼠的附睾、睾丸、储精囊和前列腺均有较显著的促进作用;低剂量组精子总密度和精子活率均差异显著(P<0.05);高剂量组精子活率差异显著(P<0.05);对小鼠睾丸各倍体生精细胞比例的影响,高剂量组小鼠睾丸生精小管较为饱满,管腔内存在大量精子,生精上皮较厚,可见各级生精细胞排列整齐,界膜明显,睾丸间质细胞排列整齐。结论表明,增精宝两种剂量均能够显著促进环磷酰胺导致小鼠生精障碍的保护作用,高剂量组对雄性小鼠的作用尤为显著。     

性成熟前不同日龄伊拉兔睾丸和附睾形态学与组织学特征

【目的】探究不同日龄伊拉兔睾丸和附睾组织在性成熟前的变化规律,为其初情期及性成熟的判定提供组织学依据。【方法】将45只伊拉兔随机分为9组,每组5只,从30日龄开始每隔15日采集1组试验兔的睾丸及其附睾,运用形态学与组织解剖学方法对其生长发育规律进行研究分析。【结果】随着日龄的增加,睾丸指数、睾丸重、睾丸长径、睾丸短径及厚径等指标逐步增加,且150日龄时各指标均显著高于其他组(P<0.05);30、45、60日龄睾丸内生精小管排列稀疏,75、90、105日龄时睾丸间质成分逐渐增多,管腔逐步形成,120、135、150日龄时间质细胞进一步增生并成群分布,90日龄起出现圆形和长形未成型精子,120日龄的睾丸生精小管、附睾管腔中出现少量成型精子,150日龄时有大量精子密集分布于睾丸管腔内,且在120、135、150日龄时生精小管面积、上皮细胞厚度、支持细胞数均显著大于其他组(P<0.05);30日龄以上各组间质细胞个数在各组间差异不显著(P>0.05),但均显著高于30日龄;120、135、150日龄时附睾头、体、尾的直径均极显著高于其他组(P<0.05),而附睾头的柱...     

日粮中添加赖氨酸和苏氨酸对提高种公犬精液品质的效果研究

选用德国牧羊公犬6头,随机分为试验组和对照组,每组3头。试验组每千克基础日粮中添加赖氨酸（98%）2.0 g和苏氨酸（80%）2.0 g,试验期15个月,测定2组公犬的射精量、精子密度、精子活力和畸形率。结果表明,试验组公犬的射精量为9.2 m L,比对照组提高17.94%（P〈0.05）;试验组公犬的精子密度达到1.66亿/m L,比对照组提高24.81%（P〈0.05）;试验组公犬的精子活力为0.85级,比对照组提高13.33%（P〈0.05）;试验组公犬的精子畸形率比对照组降低7.4%。结果提示,日粮中添加赖氨酸和苏氨酸能明显提高公犬的精液品质,增强精子活力,促进精子的早期形成。     

添加咖啡因、亚牛磺酸对牛精子功能的影响

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因（0、2.5、5.0、7.5 mmol/L）或亚牛磺酸（0、5、10、20、40 μmol/L）的获能处理液中,且每个处理组加入约200 μL的精液,在CO₂培养箱里经上游处理45 min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0 mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且2.5 mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20 μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且20 μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20 μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20 μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5 mmol/L咖啡因组和对照组（P<0.05）。因此,20 μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5 mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。     

甘油和海藻糖对低温保存精液品质的影响

为了研究低温保存下海藻糖和甘油对牛精液品质的影响,本试验选取了宁夏四正生物技术公司的健康荷斯坦种公牛的精液,在低温保存液里分别添加5%的甘油以及0.028mol/L、0.014mol/L、0.0416mol/L的精液保护剂海藻糖为试验组,以不添加试剂的低温保存精液为对照组,对保存不同时间的精液品质进行测定。结果显示添加甘油的试验组精子活力低于对照组,但差异不显著（P〉0.05）。海藻糖浓度为0.0416mol/L组的精子畸形率低于对照组及其他海藻糖组,并且差异显著（P〈0.05）;海藻糖组与对照组精子活力相比,在24h、48h、72h时差异不显著（P〉0.05）;在96h、216h、240h时差异显著（P〈0.05）,其活力下降明显。     

脱氢表雄酮对雄性小鼠睾丸组织发育的毒性作用

昆明种雄性小鼠32只,随机分为4组。脱氢表雄酮（DHEA）日摄取量分别为0（对照组）、20、40和60mg／kg,试验期52d。各组分别在42日龄、72日龄处死小鼠,分离睾丸,制作石蜡切片,HE染色,显微观察、摄影。结果显示,与对照组比较,42日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形,各时期的生精细胞和成熟精子数量均减少;高剂量组曲精小管内生精细胞层次基本消失,出现较大腔隙,间质发生不同程度的变化。72日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形。基膜变薄伴有断裂和间质受损增加。中剂量组出现畸形精子,高剂量组曲精小管中央空白区域增大,缺乏成熟精子。以上结果表明,中、高剂量的DHEA对生长期小鼠的睾丸组织结构发育有明显的毒性作用。     

醋酸铅对妊娠小鼠雄性后代生殖毒性的研究

将妊娠母鼠随机分为高剂量(1／10LD50)、中剂量(1／50 LD50)、低剂量(1／250LD50)和溶剂对照组。高、中、低剂量染毒组和对照组母鼠分别于妊娠的9,11,13,15 d和17 d腹腔注射1.2,0.24,0.048 g／L的醋酸铅[Pb(CH3COO)2·3H20]溶液和灭茼蒸馏水0.01 mL／g。研究醋酸铅对妊娠小鼠雄性后代的生长发育和生殖能力的影响。试验结果表明:①高剂量染毒母鼠带仔行为受到醋酸铅的显著影响;②各试验组后代公鼠体重增长变化无统计学差异(P>0.05);③各试验组公鼠的睾丸、附睾湿重及其与体重的比值均无明显差异(P>0.05);④各染毒组后代公鼠精子相对密度显著低于对照组(P<0.01);⑤各染毒组后代公鼠精子活力与对照组之间无统计学差异(P>0.05);⑥高剂量和中剂量组后代公鼠精子畸形比率显著高于对照组(P<0.05),低剂量组则与对照组无统计学差异(P>0.05);⑦备染毒组后代公鼠精子顶体形态异常率与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。     

细胞色素P450芳香化酶活性调控对小鼠卵巢发育的影响

本研究旨在探索P450芳香化酶抑制剂（来曲唑）对小鼠卵巢发育的影响。将SPF级昆明系雌性小鼠随机分为对照组和2、4、6、8、10、30、50 g/kg来曲唑剂量组,连续灌服3 d,在停药后的第9、15和30天观测小鼠卵巢的发育情况。结果表明：①在停药后第9、30天的6和8 g/kg组及第15天的4～10 g/kg组的卵巢指数显著高于对照组（P<0.05）,而停药后第15和30天的50 g/kg组显著低于（P<0.05）对照组和2~10 g/kg组;②在停药后第9和15天的4～8 g/kg组及停药后第30天的6 g/kg组的初级卵泡数显著高于（P<0.05）对照组和其它各试验组,而停药后第9天的30和50 g/kg组、第15天的50 g/kg组及第30天的10～50 g/kg组都显著低于（P<0.05）对照组和其它各试验组;③在停药后第9、15和30天的4～8 g/kg组的次级卵泡数都显著高于对照组（P<0.05）;而停药后第9天的30和50 g/kg组、第30天的50 g/kg组都显著低于对照组（P<0.05）;④在停药后第9天的4～8 g/kg组、第15天的6和8 g/kg组及第30天的2～8 g/kg组的成熟卵泡数都显著高于对照组（P<0.05）;而停药后第9天的10～50 g/kg组、第15、30天的30和50 g/kg组几乎没有成熟卵泡的形成。以上结果表明,用6 g/kg来曲唑浓度可一定程度抑制P450芳香化酶的活性,降低内源性〖JP2〗雌激素合成,能够促进小鼠卵巢和卵泡的发育。     

Canine spermatozoa—What do we know about their morphology and physiology? An overview

Spermatozoa are unique cells because of their morphological and physiological characteristics. They are produced during the process called spermatogenesis. Spermatogenesis consists of three phases: spermatocytogenesis, spermiogenesis and spermiation, during which spermatozoa undergo several changes. Spermatogenesis takes place within the seminiferous tubules containing two types of cells—the germ cells and the Sertoli cells—that alongside the Leydig cells, which play an important role when it comes to normal fertility. Everything is regulated by the hypothalamic–pituitary–gonadal axis and specific hormones due to multi-hormonal feedback systems. Spermatozoa possess morphological and physiological features, which are sometimes completely different from what is observed in various somatic cells. What is more, canine spermatozoa have specific characteristics making them special compared to the spermatozoa of other mammalian species. The metabolic energy production, which is crucial for the appropriate functioning of spermatozoa, can be fuelled by different metabolic pathways utilizing different chemical substrates. Inseparable from the oxidative phosphorylation process is the production of reactive oxygen species, which are both essential and toxic to spermatozoa. Furthermore, epididymis is a very important structure, responsible for the transport and maturation of spermatozoa, which are then stored in the last segment of epididymis—the epididymal cauda. Moreover, the retrieval of spermatozoa from the epididymides is crucial for the development of assisted reproduction techniques and sperm cryopreservation methods. The information gained from the research on domestic dogs might be transferred to their wild relatives, especially those species categorized as endangered.     

稀释液中添加半胱氨酸对绵羊冷冻精液品质的影响

在绵羊冷冻精液稀释液中添加0mmol／L、2．5mmol／L、5．0mmol／L、7．5mmol／L4个不同梯度的半胱氨酸，通过测定解冻后的精子活率、畸形率、顶体完整率、质膜完整率以及各项酶（SOD、GSH、GSH-PX、CAT和MDA）的活性来确定最适添加量。结果表明，添加5．0mmol／L的半胱氨酸组的精子活率和顶体完整率均极显著高于对照组和其他组（尸〈0．01），而畸形率显著低于对照组和其他试验组（P〈0．05）；各项酶指标中，5．0mmol／L半胱氨酸组SOD和GSH浓度与其余各组间差异不显著（P〉0．05），MDA浓度极显著低于对照组和7．5mmol／L试验组（P〈0．01），CAT和GSH-PX活性极显著或显著高于对照组和其他试验组（P〈0．01，P〈0．05）。说明冷冻稀释液中添加5．0mmol／L的半胱氨酸可有效保护精子免受过氧化物的损害。     

纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响

在冷冻稀释液中分别添加分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖（Nonomaterialsrhodiolasa—chalinensispolysaccaride,NRSP）溶液,以添加6mg／L红景天多糖（Rhodiolasachalinensispolysaccaride,RSP）为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15％NRSP组的精子活力（0．69）、顶体完整率（51．42％）、质膜完整率（25．95％）均高于其他组,并显著高于空白组（P〈0．05）。此外添加15％NRSP组的解冻后直线运动精子百分比（46．33％）要显著高于其他各组（P〈0．05）;添加6mg／LRSP组丙二醛（MDA）浓度最低（10．83±0．39）／2mol／L,并且显著低于空白组（31．85土1．36）μmol／L,（P〈0．05）,但与15％的NRSP组（11．60±0．42）μmol／L无显著差异（P〉0．05）。添加20％的RNSP组超氧化物歧化酶（SOD）活力最高（343．05-＋-19．64）μ／mgprot,显著高于其他添加组（P〈0．05）。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系（P〈0．05）,而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关（P〈0．05）,与SOD活力呈显著正相关（P〈0．05）,质膜完整率与两者含量相关性不显著（P〉0．05）。     

不同平衡时间对獭兔精液冷冻保存效果的影响

为探讨獭兔精液冷冻保存适宜的平衡时间,将精液稀释后分别平衡30 min、60 min、90 min、120 min后装管,并进行冷冻保存,解冻后分析精子活率、畸形率、质膜完整率和顶体完整率四个指标.结果表明,平衡60min时冻后精子活率（0.30）显著高于30 min（0.15）、90 min（0.21）和120 min（0.15） （P＜0.05）;畸形率显著低于30min（16.16％ vs26.23％）（P＜0.05）,但与其他各组差异不显著（P＞0.05）;平衡30 min、60 min时精子质膜完整率显著高于120min（83.05％、81.79％ vs74.79％） （P＜0.05）,与90 min差异不显著（83.05％、81.79％ vs78.63％）（P＞0.05）;不同平衡时间组精子顶体完整率差异均不显著（P＞0.05）.综合分析表明,獭兔精液在冷冻时适宜的平衡时间为60 min.     

The effect of enrofloxacin on sperm quality in male mice

Current study was designed to evaluate toxic effects of enrofloxacin on male mice reproductive system. In the treatment group enrofloxacin was administered subcutaneously to male mice at a fixed dose of 150 mg/kg once daily for 15 days, whereas saline solution was given in the same regimen in the control group for the same period. Mice were sacrificed on day 15 and analyzed for sperm quality. In addition to routine examination of sperm material, spermatogenetic activity and organization of each animal were graded according to Johnsen's scoring to assess the spermatogenesis relying on seminiferous tubule cross-section scores. A significant decrease in both epididymal sperm count and sperm motility besides abnormal spermatozoa rate were observed in enrofloxacin group compared to controls (P < 0.01, for all). Johnsen's score in control mice were better than those in treatment group (P < 0.01). These results suggested that a fixed 150 mg/kg dose of enrofloxacin would lead disruption of spermatogenesis in the testes causing deterioration of motility and content of sperms as well as morphological abnormalities.     

稀释液中添加棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响

本试验目的是研究稀释液中添加不同浓度的棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响。选用10只健康乌珠穆沁种公羊,采集精液经检验合格在37 ℃下混匀,精液样品平均分成5份,用含有0、5、10、15、20 mmol/L的不同浓度棉子糖稀释液稀释。采用0.25 mL细管法冷冻,将冷冻后的细管精液置于37 ℃水浴锅中解冻15 s后进行相关指标评价及酶(SOD、GSH、MDA、GSH-Px和CAT)的测定。结果表明,当棉子糖的添加量为15 mmol/L时精子活率显著高于对照组(P＜0.05),畸形率显著低于对照组(P＜0.05),弯尾率显著高于对照组(P＜0.05),SOD活力显著提高(P＜0.05),MDA也显著低于对照组(P＜0.05)。