蛋种鸡J亚群-禽白血病组织病理学与超微病理学研究

本研究旨在探讨蛋种鸡J亚群-禽白血病的发病机理。针对山东济宁某蛋种鸡场200日龄产蛋鸡的组织病料,分别进行组织病理学与超微病理学研究,检测禽白血病病毒(ALV-J)抗原与抗体,分离病毒,并对其进行单克隆抗体间接免疫荧光试验检测。患病鸡群出现渐进消瘦、瘫痪和最后死亡现象,全群死亡率达10%左右。病鸡的肝、脾等内脏器官明显肿大,表面可见大小不一的灰白色结节;其肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织中有一定比例的胞质含红色嗜酸性颗粒的骨髓样细胞瘤细胞增生,也发现间质中淋巴细胞和成淋巴细胞浸润增生。同时在脾脏和法氏囊组织中均看到病毒颗粒,有囊膜,直径约100nm。病料中p27抗原和血清中抗体均呈阳性,并分离到ALV-J。以上结果提示该蛋种鸡群发生的肿瘤病是由ALV-J引起的。随着越来越多的禽白血病病例在蛋鸡中确诊,预示着我国蛋鸡业面临新的威胁,值得引起重视。     

安徽省五华鸡J亚群禽白血病的鉴定及其病理学观察

为调查安徽省五华鸡J亚群禽白血病(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)的感染情况,采用ELISA对五华鸡进行P27抗原和ALV-J抗体检测.挑选5只抗原抗体阳性鸡进行PCR检测,同时将5只抗原抗体阳性鸡和5只抗原抗体阴性鸡进行剖检,制作病理切片.其中1只鸡PCR检测为阳性,能扩增出545 bp条带,PCR检测阳性的鸡其心脏有肿瘤、脾脏肿大等病理学变化;组织切片发现心脏、肝脏、脾、肾、肺等组织内有弥漫性髓细胞样瘤细胞或髓细胞瘤病灶,髓细胞样瘤细胞的细胞质内可见嗜酸性颗粒.结果表明五华鸡已经感染了ALV-J,且部分鸡个体已经发病.     

地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染

2008年9月,山东省菏泽市某柴鸡养殖专业户6 000只鸡80日龄时开始发病,至120日龄时死亡率高达15%.病鸡颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡.部分鸡只可见单侧肢体麻痹症状和皮肤型肿瘤.对66份采自发病鸡群的血清及新生羽毛囊进行血清学检测.琼脂扩散试验结果显示所采的66份待检羽髓抗原MDV阳性率为59.09%,血清中MDV抗体阳性率为65.16%,抗原、抗体双阳性率为37.88%.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中ALV-J、REV抗体,结果显示ALV-J抗体阳性率为7.58%,REV抗体检测会部呈阴性.剖检病鸡可见内脏器官普遍肿大,肝、脾、肾表面及切面有大小不等的灰白色肿瘤样结节.病理组织学观察肿大的器官和组织内都有不同程度的淋巴细胞增生,并可在肝、脾、肾、腺胃等组织内同时观察到淋巴细胞样瘤细胞和髓样瘤细胞2种典型的肿瘤灶.免疫组织化学检测结果表明,发病鸡组织内同时存在MDV和ALV-J抗原的阳性信号.PCR检测结果显示6只来检病鸡MDV和ALV-J均呈阳性,都扩增出相应的条带,REV未扩增出任何条带,PCR呈阴性.以上结果表明地方柴鸡鸡群中存在MDV和ALV-J的共感染,提醒我们应当注意地方柴鸡肿瘤性疾病的预防和净化工作.     

进口海兰褐祖代鸡禽白血病感染状态的持续观察及与国内发病鸡群种蛋p27检出率、病毒分离率的相关性

对自国外直接进口的蛋用型海兰褐祖代鸡群的禽白血病感染状态进行了持续观察,并与国内3个不同发病状况的海兰褐父母代鸡群的种蛋p27检出率、抗体阳性率、投诉情况进行了比较.将国外直接进口的蛋用型海兰褐祖代鸡群3个配套系240只1日龄鸡在SPF环境中饲养,在不同日龄采集泄殖腔棉拭子检测禽白血病病毒(A-vian leukosis virus,ALV)群特异性p27抗原、采集血清检测ALV-AB及J特异性抗体和采集血浆分离外源性ALV,并在鸡群开产后收集种蛋,检测蛋清p27抗原和父母代鸡群胎粪p27抗原.同时对来自天津、山东的不同投诉情况的3个父母代鸡场种蛋p27抗原或ALV-AB及J抗体进行了检测.结果显示,进口祖代鸡ALV-AB及J特异性抗体在68、150日龄检测均为阴性；分别在12、26、68、150日龄采血浆在DF1细胞分离病毒均为阴性；收集的250枚种蛋蛋清和孵化的父母代鸡群胎粪p27抗原检测均为阴性.而其他国内3个父母代鸡场的种蛋p27检出率最高达12％.结果表明,该海兰褐祖代鸡群无外源性禽白血病的感染,不同鸡群的种蛋p27检出率与病毒分离率 及发病情况具有较好的吻合性,可以作为开展ALV的流行病学调查和种鸡场净化的重要指标.     

海兰商品蛋鸡白血病与马立克氏病混合感染案例分析

从临床流行病学、剖检症状、病理变化、马立克氏病、禽白血病、网状内皮组织增生症病毒特异基因的PCR检测等进行综合分析,以期对河南南阳地区某海兰蛋鸡场鸡群的疑似肿瘤疾病进行确诊。结果显示:鸡群大体正常,但零星出现死亡,死亡鸡极度消瘦,心、肝、脾、肺等脏器肿胀及个别病鸡脏器肿胀且有肿瘤结节。PCR检测结果显示:MDV阳性、ALV阳性、REV阴性,确诊鸡群感染马立克氏病病毒和禽白血病病毒。     

一例禽白血病的病理学分析及qRT-PCR诊断

为查明贵州省惠水县某养殖场鸡发病死亡的原因,对送检鸡进行剖检和病理学观察,并应用qRT-PCR方法对病原核酸进行检测。结果：病(死)鸡肝脏肿大,有明显粟粒状细胞瘤增生,均匀分布于肝实质中,呈灰白色;组织病理切片观察发现大量圆形嗜酸性颗粒的髓细胞样瘤细胞和广泛的肝细胞空泡变性;病原核酸检测显示禽白血病病毒阳性,确诊为禽白血病病毒感染。     

ALV-J诱发鸡成红细胞白血病的临床病例分析

2010—2011年检测3批病例,分别来自泰安新泰的110日龄麻鸡、济宁泗水的90日龄麻鸡和济南20日龄蛋雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等,死亡率分别为20%、12%和18%。剖检,3批病鸡均可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,胸腺、肌肉、腺胃等组织器官出血。新泰病鸡肝脏和肺脏表面有明显的白色肿瘤结节。血液涂片与骨髓涂片观察发现大量红细胞转变为体积较大,胞质丰富蓝染,胞核大呈圆形、核内有很纤细的染色质、核周围有空泡的成红细胞,以晚幼成红细胞为主;组织学检查发现,在所有组织脏器血管及间质内均可观察到大量聚集的与血涂片中形态相一致的成红细胞,并且可观察到核分裂相,但未见淋巴细胞聚集。通过血液学和组织学观察不仅排除马立克氏病和网状内皮组织增生症,而且排除中毒及代谢性疾病的可能。以肝脏组织DNA为模板,在3批病鸡中利用PCR检测均扩增出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85基因924bp的特异性片段,而A亚群禽白血病病毒(ALV-A)、B亚群禽白血病病毒(ALV-B)阴性。免疫组织化学检测结果表明,发病鸡肺脏和脾脏等含血量丰富的组织内发现组织细胞及成红细胞胞质呈ALV-J抗原阳性。根据以上检测结果确定此3批患有成红细胞白血病病鸡均由ALV-J感染引起。ALV-J引起单纯鸡成红细胞白血病在国内为首次发现。ALV-J在我国鸡群中的多潜能致瘤机制需要进一步的研究。     

鸡淋巴细胞性白血病的诊断

2005年,通榆县某一养鸡户饲养的依萨褐鸡,在4~6月龄时陆续发病死亡。笔者通过调查,该养鸡户共养鸡1685羽,死亡441羽,死亡率26.1%。应用抗病毒和抗菌药治疗无效。1主要症状患病鸡食欲不振、消瘦、精神萎靡。鸡冠和肉髯苍白、皱缩。病鸡衰弱,进行性消瘦,体重迅速减轻,以至不能站立。有的鸡腹部膨大,指压似面团状,有的可以摸到肿大的肝脏,最后多因衰竭而死亡。2剖检变化肝脏肿大,占据胸腹腔2/3,并掩盖其它脏器,局部发生粘连,呈灰白色,似豆腐渣样,质脆;肝脏大理石样变化,并可见大量的灰白色肿瘤结节。脾脏肿大质脆,呈灰棕色,亦有许多突出于表面的灰白色肿瘤结节。肾脏肿大,色变淡。卵巢部有的病例有数个核桃大的灰白色肿瘤,切开后里面有豆腐渣样物。腔上囊肿大,亦可见灰白色肿瘤。3实验室诊断采集有临床症状和肿瘤性病理变化的5羽病鸡的肝脏经研磨后做待检抗原,并采集血液分离血清,用哈尔滨兽医研究所提供的禽白血病标准抗体和标准抗原做琼脂扩散试验,结果均为阳性。通过对病鸡临床症状观察、剖检病理变化和实验室诊断,确诊为鸡淋巴细胞性白血病。4预防措施鸡淋巴细胞性白血病目前尚无可靠的治疗方法,只能平时注意预防。①每隔1~3个月采用琼脂扩...     

浙江省宁波市部分鸡场鸡免疫抑制性疫病血清学调查

为了解禽白血病、禽网状内皮组织增生症和鸡传染性贫血在本地鸡群的感染情况,对宁波市7个区、县的15个鸡群进行了3种疫病4种抗体的血清学检测。结果显示:362份被检血清中,AB亚群禽白血病病毒(ALV-AB)抗体阳性率为55.0%,J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体阳性率为21.5%,禽网状内皮组织增生症病毒(REV)抗体阳性率为32.0%,鸡传染性贫血病毒(CAV)抗体阳性率为66.8%;15个鸡场AB亚群禽白血病和鸡传染性贫血共感染率为100.0%;12个鸡场共感染了3种免疫抑制性疫病,混合感染率高达80.0%。调查结果表明免疫抑制病在宁波市鸡群中非常普遍。     

J亚群白血病的病理学观察及PCR诊断

从某肉种鸡场取疑似J亚群白血病的自然发病鸡，剖检，观察病理学特征(光镜、电镜)。随后对该场进行ALV-J抗体ELISA检测，发现感染率达28％，从中选取部分抗体阳性鸡及阴性鸡剖检，取肝进行ALV-J特异性PCR检测。结果：自然发病鸡病变明显，在肝、脾、肾、睾丸(卵巢)肺等多种组织肿大，并有大小不等的灰白色结节。镜检：病灶内及肿瘤主要由密集的髓细胞组成，在大脑、小脑坐骨神经中未见。电镜，肿块中的髓细胞样瘤细胞呈圆形、核圆形或椭圆形，体积大小不一、染色质边集，胞浆中溶酶体增多，有些电子密度较高，有些趋于溶解，肝细胞体积增大，核浓缩或淡染，胞浆中线粒体增多，肿胀，嵴减少或消失，在胞浆膜下有病毒粒子存在。PCR结果：6例抗体阳性鸡和部分自然病例PCR阳性而2只对照鸡PCR阴性。通过以上证据可知，病变明显的和抗体阳性的鸡PCR结果全部为阳性，证明鸡体内病毒与抗体共存，而抗体阴性，病毒阳性的结果未出现，说明此肉种鸡场感染的ALV-J大部分是由于水平传播造成的。     

蛋鸡父母代群开展禽白血病净化检测的效果评估

通过对徐州市某蛋鸡父母代群禽白血病(AL)感染情况调查,参考国际通用及国内学者提出的AL净化方案,结合该场实际,开展AL净化检测效果评估。对照试验结果:经AL净化鸡群的p27抗原阳性率(2.4%)、ALV-A/B抗体阳性率(1.9%)、ALV-J抗体阳性率(2.1%),远低于未经AL净化鸡群的p27抗原阳性率(16.4%)、ALV-A/B抗体阳性率(11.4%)、ALV-J抗体阳性率(13.8%);同时,对父母代鸡群所产商品代雏鸡带毒情况检测,经净化的父母代鸡群所产商品代鸡1、40日龄p27抗原阳性率分别为1.3%、3.1%,也远低于未经净化的父母代鸡群所产商品代鸡1、40日龄p27抗原阳性率的13.7%、18.2%。以上结果表明,该场禽白血病净化取得了一定成效。     

J亚群禽白血病病毒引发蛋鸡多种肿瘤类型的病理分析

本试验对J亚群禽白血病病毒引发商品蛋鸡发生多种肿瘤进行了详细的病理学观察。尸检10只病死鸡,其中髓细胞性白血病占8/10,表现肝脾明显肿大,被膜下可见弥散的灰白色结节,组织学观察发现几乎所有组织均见典型髓细胞样瘤细胞增生。其中5/10病例表现有其他类型肿瘤,包括血管瘤、纤维瘤、脂肪肉瘤。用ALV-J特异性引物H5/H7进行PCR确诊该鸡群感染了ALV-J。     

一例禽白血病的诊断

为了对广东某麻黄种鸡场疑似禽白血病的患鸡进行确诊,试验采用了剖检、反转录PCR(RTPCR)、病理组织切片观察等方法进行诊断。结果表明:患鸡剖检可见皮下、心脏、肾脏、肺脏、胰腺均出现不同程度的灰白色肿瘤结节,肝脏、脾脏、肾脏严重肿大,质地变硬,颜色变淡;随机收集该场5只疑似病鸡的病料进行PCR检测,4只病鸡的病料可扩增出目的条带;采集病鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、肾脏、脑、肠进行病理组织切片观察,内脏器官和软骨组织的骨化部分中含有数量不等的髓细胞样瘤细胞,呈单个散在或局灶样分布,大脑有单个散在的髓细胞样瘤细胞出现,小脑组织轻度水肿。综合以上结果确诊该鸡场病鸡所患疾病为禽白血病。     

湖北省禽白血病自然病例的病理学诊断及p53和Bcl-2基因表达情况的观察

应用组织病理学和SABC免疫组织化学技术,对湖北省武汉市的2批14日龄和33日龄疑似禽白血病肉鸡进行了病理学诊断,并观察了病鸡肝肿瘤组织中p53基因和Bcl-2基因的表达情况。剖检可见病鸡肝、肾、脾均不同程度肿胀,组织病理学检查在肝、肾、心等脏器可见散在或聚集成团的骨髓瘤细胞,胞浆内充满球形的嗜酸性颗粒;在病鸡肝肿瘤组织中p53和Bcl-2基因均呈阳性表达,诊断为J亚群禽白血病（ALV-J）,提示p53基因和Bcl-2基因与肉鸡J亚群禽白血病有关。     

上海地区商品代蛋鸡J亚群禽白血病的病理学观察

对上海地区2个规模化商品蛋鸡场疑似禽白血病病例进行了组织病理学观察和ELISA检测，发现发病鸡群中血管瘤占50％，纤维肉瘤占37．5％，髓细胞瘤占12．59／5，J亚群禽白血病的血清抗体阳性率分别达25％和15％。血管瘤主要见于脚部和翅膀，组织病理学观察表明为海绵状血管瘤，纤维肉瘤主要见于肌肉组织内，对弥漫性肝、脾肿大的病例观察表明肿瘤组织为髓细胞瘤。证实该鸡群感染了J亚群禽白血病病毒，并表现为以髓细胞瘤、血管瘤和纤维肉瘤为主的多种肿瘤性传染病。     

商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病理学初报

2007年7月,山东某鸡场8 000余只150日龄海兰褐鸡发病,病鸡特征性表现衰竭、消瘦和血管瘤。大体病变：内脏器官肿大,表面及切面可见大小不等的灰白色结节;血管瘤大小不等、富有弹性,内含大量血液,血液内富含成髓细胞;组织学病变：肝脏、脾脏、骨髓、肠管和胰腺浆膜面有大量的胞质含嗜碱性颗粒的成髓细胞增生,同时在肠管固有层出现明显的肠腺上皮细胞和网状细胞增生,腺胃固有层出现明显的网状细胞增生,血管瘤为典型的海绵状血管瘤,可见其发展的各个阶段;免疫组织化学检测：经REV与ALV-J单克隆抗体检测发现,REV抗原阴性,而ALV-J抗原强阳性。在骨髓、肝脏及其它组织内的成髓细胞内、血管瘤海绵状壁层内皮细胞、增生的肠腺上皮细胞、腺胃腺小管上皮细胞、网状细胞内及部分间质内可见强阳性信号。因此,此病为成髓细胞瘤、血管瘤型并伴发多种肿瘤的J亚群白血病,这在国内外尚未见报道。     

禽骨髓细胞瘤病自然病例的病理学研究

对禽骨髓细胞瘤病显性型病鸡、ELISA阳性的稳性型病鸡和阴性对照鸡进行了病理学研究。结果表明，临床症状明显的显性型病鸡肝、脾、肾、睾、丸（或卵巢）、肺等组织有灰白色结节状病灶和不同程度的肿胀，甚至在股骨或肋骨等处出现大小不一的硬固肿块，镜检病变部位有大量髓细胞样瘤细胞，呈典型的骨髓细胞瘤病的病理特征。电镜下瘤细胞病变明显，瘤细胞膜下疑似病毒样粒子；在自然病例肾悬液感染的鸡膛成纤维细胞培养物中巨噬细胞的膜性结构上发现增殖的病毒样凸起。ALV-ELISA抗体检测试剂盒检出阳性、无明显临床症状和眼观病变的隐性型病鸡，光镜下骨髓、肝、卵巢、心肌等组织中可见与显性型相同的髓细胞样瘤细胞，但数量较少。ELISA抗体检测阴性对照鸡骨髓中胞浆含有嗜酸性颗粒的髓细胞明显少于阳性鸡，除在肝、卵巢等组织中偶尔出现外，其他组织很少见到。     

1例肉鸡J亚群禽白血病的病原学诊断

研究旨在了解贵州省某养殖场内肉鸡禽白血病的感染情况,对该场疑似感染禽白血病病毒（ALV）的20只发病鸡进行病理剖检、PCR检测,并对阳性条带进行测序比对,构建系统进化树。结果显示：发病鸡肝脏肿大、有白色肿瘤结节;肾脏肿大、有肿瘤样结节,质黑如颗粒状;脾脏肿大;气管出血。PCR检测结果显示,20只发病鸡中有12只鸡存在ALV感染;对阳性样品进行ALV分型鉴定可知,阳性样品在422 bp处出现特异性扩增条带,阳性率为60%(12/20)。测序结果显示,所得序列与J亚群参考株J-AHaq02的相似性最高（99.8%）。研究表明,12只禽白血病患病鸡均为J亚群禽白血病病毒（ALV-J）感染,所得序列与ALV-J聚于一支。     

江苏安徽部分地区禽白血病流行病学调查

为了解江苏安徽地区禽白血病病毒(ALV)流行情况,本研究以自制的p27抗体检测试剂盒及商品化p27抗原检测试剂盒对江苏安徽地区5个品系父母代种鸡及其中的3个子代鸡群进行了禽白血病的检测。结果发现,受调查的5个鸡群均有鸡只呈现p27抗体阳性和抗原阳性,其中抗体个体阳性率为25.44%,抗原个体阳性率为24.93%,抗原抗体同时阳性的鸡只很少。其中,部分鸡群的p27抗体阳性率高达49.77%。因净化措施的实施,与父母代鸡群比较、3个检测的子代鸡群p27抗体阳性率呈下降趋势。另外,还发现,公鸡整体抗体阳性率高于母鸡。这些结果提示江苏安徽地区种鸡鸡群不仅存在ALV感染,而且高水平的抗体证明水平感染较严重。结论,加强生物安全和加快ALV净化是当今种鸡群疾病控制的重要工作之一。     

鸡实验性淋巴细胞性白血的病理学研究

给３５只１日伊莎褐蛋母鸡雏腹腔接种淋巴细胞性白血病病毒ＲＡＶ－１株、应用常规病理技术，对接毒后第１５天、１、２、３、４、５、６个７批次的实验鸡做了病理学研究。结果：接毒后１５ｄ和１个月，部分实验鸡发生性细胞性白血病，主要表现为骨髓在髓细胞大量增生，或形成成髓细胞性肿瘤瘤结节，肝、心、肾、法氏囊等内脏器官出现成髓细胞聚集，接毒后２－６个月，实验鸡发生了淋巴细胞性白血病，主要表现为法氏囊髓淋巴细胞发生