瑞士褐牛蜘蛛腿综合征致病位点检测方法的建立

牛蜘蛛腿综合征（Arachnomelia Syndrome,AS）是一种常染色体隐性遗传病,现主要见于德系西门塔尔牛和欧洲瑞士褐牛。患病犊牛先天骨骼系统严重畸形,出生即死亡或出生不久死亡。已证实瑞士褐牛蜘蛛腿综合征是由编码亚硫酸盐氧化酶的基因SUOX外显子4上一个单碱基插入突变c.363-364insG所致。本研究首次建立了瑞士褐牛蜘蛛腿综合征致病基因突变位点分子筛查的方法：荧光引物PCR产物电泳法和PCR产物直接测序法。使用荧光引物PCR产物电泳法对10个品种187头牛样本进行该突变位点的基因型分型,没有发现携带该致病基因的个体。荧光引物PCR产物电泳法判定基因型快速可靠,实验成本较低,适合大规模群体的检测。由于我国曾多次进口瑞士褐牛遗传物质,可能将该致病基因引入本地牛群体。因此对我国相关牛群开展AS隐性不利基因的筛查是必要的,尤其是针对种公牛进行筛查,可避免该致病基因在群体的传播造成重大经济损失。     

新疆褐牛蜘蛛腿综合征的遗传检测

蜘蛛腿综合征(Arachnomelia syndrome,AS)是一种牛的先天性致死性骨骼畸形遗传病。在瑞士褐牛群体中该病是由位于BTA5上编码亚硫酸盐氧化酶的SUOX基因外显子4上的一个G碱基的插入所致,插入突变c.363-364insG会导致SUOX蛋白编码提前终止,从而导致犊牛患病。鉴于我国新疆褐牛含有瑞士褐牛血液,本研究对我国新疆地区广泛使用的55头褐牛公牛AS致病位点c.363-364insG进行了筛查。结果显示被检的55头公牛在SUOX基因该突变位点全部为纯合子,不含G碱基插入位点,表明目前经常使用的褐牛公牛不含有致病位点,不存在传播AS疾病的风险,但未来仍需要对其他褐牛公牛及母牛群体开展检测工作,进而排除AS在中国牛群中的传播。     

荷斯坦牛瓜氨酸血症焦磷酸测序检测方法的建立与应用

为建立一种快速高通量的荷斯坦牛瓜氨酸血症(Citrullinemia,CN)分子检测方法,依据CN是由于精氨酸琥珀酸(ASS)合成酶基因编码第86位精氨酸的密码子突变为终止密码子的遗传学基础,利用Assay Design SW软件设计了1对引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析。用建立的方法对55份进境荷斯坦牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物进行常规测序,结果与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法可用于荷斯坦牛瓜氨酸血症的检测,是一种有效的新方法。     

荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征焦磷酸测序检测方法建立与应用

为建立一种快速高通量的荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征（complex vertebral malformation,CVM）的分子检测方法,根据CVM是由于SLC35A3基因第4外显子559位处发生G→T突变的遗传学基础,利用Assay Design SW软件设计了1对PCR引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析,建立焦磷酸测序检测方法。对55份进境荷斯坦奶牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物进行测序,其DNA序列与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法是一种有效的新方法,可用于荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征的检测。     

新疆褐牛Leptin基因外显子Ⅱ E2JW多态性与体尺性状的相关性研究

为探讨新疆褐牛Leptin基因与体尺的相关性,以42头成年健康的新疆褐牛为研究对象,利用PCR-SSCP方法,检测Leptin基因外显子II E2JW多态性并与新疆褐牛体尺性状进行相关性分析。结果表明,Leptin基因E2JW具有三种基因型AA、AB和BB型,其基因型频率分别为0.1908、0.5238和0.2857。经测序发现:该位点T103C、C113T、C126G和T252A处存在突变。群体多态信息含量0.3727,属于中度多态、遗传杂合度0.4954,B等位基因是优势等位基因。与新疆褐牛相关性分析结果表明:AA基因型个体体高、十字部高均值显著高于BB基因型个体(P0.05)。BB基因型个体后腿围显著高于AB型(P0.05)。研究结果表明,新疆褐牛Leptin基因外显子II E2JW多态性与其体尺性状具有显著相关性,可作为新疆褐牛体尺性状选育的潜在分子标记位点。     

信阳水牛GHRH基因第二外显子的SNPs检测

[目的]检测信阳水牛群体GHRH基因的SNP多态性。[方法]以56头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GHRH基因(gi:194719389)序列作为参照序列,设计PCR引物,采用PCR-SSCP和DNA测序方法对该基因第二外显子的进行突变检测。[结果]经SSCP分析发现,这些个体总共出现六种不同的带型。测序结果表明:位于GHRH基因的4 461bp、4 529bp、4 845bp、5 053bp和5 058bp处分别存在C→T、T→G、G→A、G→A和G→T五个单核苷酸突变。[结论]表明该基因在信阳水牛群体中单核苷酸多态较为丰富。     

CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达研究

为了探究CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达丰度差异,初步掌握CD46基因在新疆褐牛不同组织中的表达规律,试验设计了特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术分析新疆褐牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、大肠、胃、肌肉、卵巢和乳腺中的CD46基因表达情况。结果表明,新疆褐牛CD46基因在所检测的11种组织中均有表达,不同组织部位的表达存在差异,其中肝脏CD46表达丰度最高,其表达丰度显著高于肺脏、脾脏、肾脏、胃、小肠、大肠、卵巢和乳腺（P< 0.05）。本研究对新疆褐牛各组织CD46基因的表达规律进行初步分析,为CD46基因表达规律与其生物功能研究的开展提供了参考依据。     

荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征PCR-DHPLC检测方法建立与应用

为建立一种快速高通量的荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)变性高效液相色谱(DHPLC)的分子检测方法,根据CVM是由于SLC35A3基因第4外显子559位处发生G→T突变的遗传学基础,设计了1对引物对3种不同基因型的基因材料PCR扩增,利用Navigator软件分析确定检测温度、洗脱浓度及梯度等条件,建立检测方法。对55份进境荷斯坦奶牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物送测序,结果与DHPLC检测结果一致。研究表明,PCR-DHPLC是一种可有效用于荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征检测的新方法。     

山羊成纤维生长因子受体（FGFR1）基因的多态性检测

选择与羊同源性较高的牛FGFR1基因组序列（NM_001110207）设计3对特异性引物,采用DNA池PCR直接测序法快速检测黔北麻羊FGFR1基因的多态性,并以内蒙古白绒山羊和关中奶山羊比较,结果表明：在引PCR产物中只有黔北麻羊检测到多态,分别处于外显子5和内含子5的T133C和C211T的碱基突变,而其他2个品种...     

荷斯坦奶牛瓜氨酸血症PCR-DHPLC检测方法建立与应用

为建立一种快速高通量的荷斯坦奶牛瓜氨酸血症(CN)的分子检测方法,根据CN是由于精氨酸琥珀酸(ASS)合成酶第86位精氨酸突变为终止密码子的遗传学基础,设计了1对引物对3种不同基因型的基因材料PCR扩增,利用Navigator software软件分析确定检测温度、洗脱浓度及梯度等条件,建立检测方法。对55份进境荷斯坦奶牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物送测序,结果与DHPLC检测结果一致。研究表明,该方法可用于荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征的检测,是一种有效的新方法。     

新疆褐牛同期发情和同期排卵—定时输精效果

[目的]新疆褐牛是新疆北疆牧区养牛业主导品种,夏季放牧区新疆褐牛人工授精集中冷配点模式的广泛推广,对新疆褐牛选育提高和新品系培育起到了积极作用,为探索新疆褐牛同期发情和同期排卵—定时输精最佳处理方法。[方法]试验选用2胎以上45头牛,分3组,A组,PG+PG法;B组,PG法;C组,CIDR+PG法,比较3种同期发情处理方法效果,同时选用2胎以上20头牛,分2组,D组,GnRH+PG+GnRH+AI法;E组,CIDR+GnRH+PG+GnRH+AI法,比较2种同期排卵—定时输精方法效果。[结果]结果表明,3种不同同期发情处理方法母牛集中在12～24 h内发情,其中12～24 h内A组和C组处理方法母牛发情率极显著高于B组处理方法(P0.01),C组比A组高出32.3%,B组和C组母牛总发情率差异不显著(P0.05),A、B、C 3组总发情率分别达到86.7%,40.0%,93.3%;发情母牛经人工授精配种后,情期受胎率3组差异不显著(P0.05)。2种同期排卵—定时输精方法中,E组发情牛排卵率显著高于D组,D组和E组总受胎率差异不显著(P0.05)。[结论]综上所述,新疆褐牛同期发情处理应采用B组方法,即2次PG法,即降低了成本,有可取得较好的效果;同期排卵—定时输精宜采用D组方法,成本低,且受胎率较好,适宜在牧区集中人工授精冷配点推广。     

应用约翰逊法估测美新杂交褐牛体重

[目的]新疆地区通过引进美国瑞士褐牛导入杂交改良新疆褐牛,以提高新疆褐牛品质和生产性能。研究旨在校正约翰逊估测法中系数,准确估测美新杂交褐牛体重,为今后新疆褐牛选育提高和新类型培育中体重测定提供方法。[方法]试验共测定美新杂交褐牛生产母牛283头,包括体重、体斜长和胸围,通过实测体重与约翰逊法估测体重比较分析,校正约翰逊法公式中系数,再进行验证。[结果]结果表明,美新杂交褐牛实测体重极显著低于约翰逊法估测体重(P0.01),对约翰逊法公式中的系数校正,校正后系数为12 300,即经过校正后的美新杂交褐牛体重约翰逊法估测公式为:体重=胸围~2×体斜长/12300,该公式在50头美新杂交褐牛进行验证,实测体重与估测体重差异不显著(P0.05),说明校正系数后的约翰逊法公式用来估测美新杂交褐牛估测体重可行,但本次试验实测和验证牛群数较少,还需大量不断验证以获得更可靠的结果。     

新疆伊犁部分地区奶牛新孢子虫病血清学调查

用新孢子虫地方虫株SRS2重组抗原作为ELISA诊断抗原,对新疆伊犁部分地区奶牛新孢子虫病进行了血清学调查。结果表明,从101份奶牛血清样品中检出牛新孢子虫抗体阳性血清12份,阳性率为11.9%,各种年龄段的奶牛均可感染,经统计学分析,差异不显著(P0.05)。本次血清学调查为新疆伊犁地区有效地控制该病的发生和蔓延提供了重要的理论依据。     

新疆褐牛乳用性能的研究

本研究旨在比较舍饲与放牧条件下新疆褐牛乳成分的差异,分析乳成分变化的规律及产奶量、乳脂率、乳蛋白率之间的相关性。试验选用昭苏县草原放牧新疆褐牛52头和乌鲁木齐种牛场舍饲新疆褐牛154头,跟踪测定其产奶量、乳成分。结果显示,新疆褐牛放牧条件下主要乳成分指标极显著高于舍饲条件下（P<0.01）;产奶量与乳脂率、乳蛋白率呈负相关,相关系数分别为-0.174（P<0.01）、-0.245（P<0.01）;乳脂率和乳蛋白率呈正相关,相关系数为0.411（P<0.01）。因此,新疆褐牛舍饲条件下产奶量高于放牧条件下产奶量;除电导率和体细胞数外,新疆褐牛其它乳成分指标在放牧条件下均高于舍饲条件下。     

新疆夏洛莱肉牛群体体重、体尺性能评价分析

夏洛莱肉牛引入新疆已有50余年的历史,为了验证新疆夏洛莱牛在塔额垦区的适应性,更好的开发利用新疆夏洛莱肉牛的种质资源,通过对新疆夏洛莱体尺和体重的测定和分析,以达到为新疆夏洛莱的选育和综合评价提供基础,推进新疆夏洛莱牛对哈萨克牛群体选育效果的目的。本试验方法：选取健康状况良好的导入夏洛莱外血培育后代新疆夏洛莱母牛567头进行了群体体重、体长、管围、胸围、体高等性状的调查。并与报道的西门塔尔牛与哈萨克牛杂交后代（简称西杂牛）、新疆褐牛与哈萨克牛的杂交后代（褐杂牛）做比较分析。采用excel（2019）进行统计分析,结果表明：导入夏洛莱外血培育的新疆夏洛莱牛体重、胸围、体高、体长均明显优于哈萨克牛;出生到3周岁之间,新疆夏洛莱牛在胸围和体重方面比西杂牛和褐杂牛有明显的优势。结论：新疆夏洛莱肉牛经过改良和选育,其生长性能有大幅度的提高,今后应积极运用现代育种技术,加强本品种的保护、选育和利用,构建地方特色肉用牛选育体系有积极的作用。     

美国褐牛杂交改良新疆褐牛效果的研究

[目的]旨在为研究美国褐牛对新疆褐牛杂交改良的效果。[方法]选取伊犁新褐种牛场纯种新疆褐牛母牛30头作为对照组、美新 F1代母牛30头作为试验组,跟踪测定两组0~36月生长发育性能指标,进行体重、体尺对比分析,计算体尺指数,构建体重、体尺生长曲线,分析体重、体尺相对增长曲线。[结果]表明：美新 F1代母牛在18~36月龄体高、体长、胸围和体重等指标极显著高于新疆褐牛母牛（P 〈0.01）;新疆褐牛、美新 F1代母牛6~36月龄体重体尺整体呈现快速增长趋势,且美新 F1代母牛各项指标总体上均高于新疆褐牛母牛;新疆褐牛、美新 F1代母牛在12月龄之前体重、体尺增加速度均较快,12月龄之后增加速度均减慢。[结论]表明两组牛早期生长强度明显高于后期,体重的增加速度和强度一直高于体尺,且美新 F1代母牛6~24月龄体尺指标相对增长值要高于新疆褐牛母牛。     

Evaluation of Spoligotyping and MIRU-VNTR for Mycobacterium bovis in Xinjiang, China

Mycobacterium bovis, the causative agent of bovine tuberculosis (bTB) in cattle, is also a pathogen for human and other mammals. In this study, 406 cows were screened for bTB by both single intradermal comparative cervical tuberculin (SICCT) test and IFN-γ assay. 135 M. bovis were isolated from 31 SICCT and IFN-γ double-positive cows in Xinjiang Uygur Autonomous Region of China. Spoligotyping and MIRU-VNTR were evaluated for genotyping, and 4 and 7 genotypes were identified, respectively. A new combination of nine MIRU-VNTR loci was most discriminative for M. bovis clones from Xinjiang. Interestingly, two new spoligotypes (SB1903 and SB1904) and special repeat numbers of three loci (ETR-D, QUB 1895 and QUB 3336) were discovered in this study. These results indicated a specific epidemic conservation in Xinjiang, China. M. bovis strains with the unique genotypes were isolated from the herds maintaining parent cows imported from the bTB-free countries, suggesting a possible transmission from the local breed of Xinjiang brown cattle.     

新疆褐牛犊牛放牧补饲试验效果分析

[目的]为了研究新疆褐牛犊牛放牧补饲增重效果.[方法]选择4～6月龄新疆褐牛80头作为研究对象,随机分为试验组和对照组,在不同饲养条件下进行日增重效果对比试验.[结果]表明:放牧加补饲的日增重效果明显优于纯放牧的饲养方式(P＜0.01);新疆褐牛公犊和母犊的日增重效果差异不显著;放牧加补饲的新疆褐牛犊牛在第1个月和第2...     

新疆褐牛细管冻精改良当地蒙古牛效果分析

用新疆褐牛细管冻精为父本,以新疆博尔塔拉州本地蒙古牛为母本进行杂交,即采用人工授精的方法获得杂交F1。褐蒙F1,初生重公犊比蒙古牛提高28．26％,母犊提高27．23％,断奶重公犊提高92．04％,母犊提高92．16％。同龄褐蒙F1屠宰率、净肉率比本地蒙古牛提高6．6％和8％。平均每头褐蒙F1牛可增肉70．3kg,按每千克牛肉25元计算,增效1758元。细管冻精配种可降低成本130元。     

新疆褐牛种群资源调查研究

[目的]对新疆褐牛主产区的种群资源进行调查研究,掌握新疆褐牛资源现状与分布特点,为品种的选育提高、改良与合理开发利用提供基础资料。[方法]按照地、县、乡分划成调查小区,每个小区涵盖所有住户,做到不重不漏,然后再进行统计分析。[结果]目前纯种新疆褐牛为17.068万头,各类新疆褐牛改良牛存栏已达到150万余头,其中伊犁河谷存栏约90万头,塔城地区存栏约36万头,其它地区新疆褐牛存栏约20余万头。[结论]成年新疆褐牛母牛中优良个体较少,整体生产性能不高。建议在现有的生产方式下,因地制宜的开展新疆褐牛的选育提高与品种改良工作,同时提高生产管理与技术水平,挖掘和发挥当前种群的生产潜能。