一例犬腹腔肿物的病理学诊断

2009年1月吉林农业大学动物科学技术学院收治1只雌性凯利蓝梗病犬,通过一系列检查诊断为小肠肿瘤。实施手术,切除空肠中段一直径约10cm外生性生长的形态不规则肿瘤。肿瘤无包膜,较坚实,切面呈肌肉样外观。病理切片发现肿瘤大部分为平滑肌构成,但肌细胞失去原有的梭形形态,细胞核大小不等,形态多样,染色质粗糙,核分裂像多见。最终确诊为空肠的平滑肌肉瘤。     

不同周龄SPF级SD大鼠胰腺自发性病变的组织学观察

研究不同周龄SPF级SD大鼠胰腺自发性病变的种类及其病变发生率,为药物安全性评价提供背景资料。收集3年安评试验中11、19、31周龄试验对照组大鼠胰腺制作病理切片,光学显微镜下观察SD大鼠胰腺病变的种类及组织形态学特点,并统计其病变发生率。结果显示,大鼠胰腺主要出现了以下病变:①单核细胞浸润:11周龄大鼠该病变的总体发生率为0.6%,其中雌性为0,雄性为1.25%;19周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为1.0%,雄性为1.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为0,雄性为1.96%。②腺泡细胞空泡变性:11周龄大鼠未观察到该病变的发生;19周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为0,雄性为2.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为3%,其中雌性为2.1%,雄性为3.9%。③腺泡细胞萎缩、腺管增生:11周龄大鼠未观察到该病变的发生;19周龄大鼠该病变的总体发生率为0.5%,其中雌性为0,雄性为1.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为3.0%,其中雌性为1.0%,雄性为4.9%。结果表明,SPF级大鼠胰腺可发生单核细胞浸润、腺泡细胞空泡变性、腺泡细胞萎缩及腺管增生等自发性病变,且病变发生率可随着年龄的增加而增加。     

高寒藏区巴青1号青稞开花习性的研究

研究表明:巴青1号青稞在青海高寒地区种植,大部分在抽穗之后开花,小花开放顺序通常由中部向上下两端开放,单个花序开花持续时间为5~8d,群体开花时间可达到10d。一日开花高峰在上午09~11时和下午13~15时。青稞开花的适宜温度为17.2℃~22.6℃,相对湿度55%~65%,结实率为85.7%。     

不同季节蛋种鸡产蛋性能的测定分析

以海兰褐蛋种鸡为观察对象,从122日龄开始到429日龄结束,收集7 520只蛋种鸡1个产蛋年（2014年1月—12月）的产蛋资料,分析得出每月的产蛋率、破蛋率等相关数据,对12个月的数据进行统计分析。结果表明,产蛋率以春季最高,秋季最低;种蛋合格率冬季最高,秋季最低;料蛋比以冬季最高,春季最低;破蛋率以夏秋两季最高,冬季最低;死淘率以秋季最高,冬季最低。     

甘肃省猪流感H5和H9抗体的血清学调查

用血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）对甘肃省742份猪血清进行了猪流感H5和H9亚型抗体检测。在12个市州的猪群中检出SIH9亚型抗体,检出阳性34份,平均阳性率为4．58％。阳性率最高为9．09％,最低为0．91％。在2个市州的猪群中检出SIH5亚型抗体,检出阳性3份,平均阳性率为0．40％。阳性率最高为4．76％,最低为2．98％。检测患病猪（非流感病）血清66份,其中8份检测出SIH9抗体．抗体阳性率为12．12％。     

特种经济动物纤维超微结构的研究

以银狐、蓝狐、南貉、美洲貉、紫貂、水貂为试验材料,观察特种经济动物狐、貉、貂毛绒纤维的超微结构,利用扫描电镜法比较其鳞片层结构特征。结果显示:银狐针毛翘角平均值为34.6°;鳞片高度平均值为10.88μm,鳞片厚度平均值为0.48μm,银狐绒毛翘角平均值为25.3°,鳞片高度平均值为11.59μm,鳞片厚度平均值为0.51μm;蓝狐针毛翘角平均值为33.1°,鳞片高度平均值为15.09μm,鳞片厚度平均值为0.63μm,蓝狐绒毛翘角平均值为25.0°,鳞片高度平均值为9.80μm,鳞片厚度平均值为0.55μm;南貉针毛翘角平均值为35.1°,鳞片高度平均值为14.54μm,鳞片厚度平均值为0.67μm,南貉绒毛翘角平均值为32.7°,鳞片高度平均值为16.41μm,鳞片厚度平均值为0.65μm;美洲貉针毛鳞片高度平均值为6.05μm,鳞片厚度平均值为0.26μm,美洲貉绒毛翘角平均值为25.5°,鳞片高度平均值为13.04μm,鳞片厚度平均值为0.51μm;紫貂针毛鳞片高度平均值为10.18μm,鳞片厚度平均值为0.54μm,紫貂绒毛鳞片高度平均值为9.24μm,鳞片厚度平均值为0.52μm;水貂针毛鳞片高度平均值为11.50μm,鳞片厚度平均值为0.60μm,水貂绒毛鳞片高度平均值为22.33μm,鳞片厚度平均值为0.59μm。不同种的动物纤维具有独特的形态特征,在超微结构上存在明显的差别。不同种的动物纤维,其鳞片翘角、鳞片高度、鳞片厚度差异显著(P<0.05),同一种动物纤维其针毛与绒毛的鳞片翘角、鳞片高度、鳞片厚度差异显著(P<0.05)。     

非洲猪瘟病毒VP73结构蛋白表达及鉴定

 
为获得可作为血清学诊断抗原的体外诱导表达ASFV VP73 结构蛋白,根据GenBank登录的ASFV 基因序列,人工合成VP73主要抗原表位区基因克隆至pUC57载体中,设计1对引物,PCR扩增获得429 nt的VP73基因片段;将VP73基因片段使用EcoRI和SalI酶切后亚克隆至表达载体pGEX KG,经PCR、酶切、测序鉴定挑选阳性克隆,转化进表达菌株BL21(DM3)中进行体外诱导表达,SDS PAGE和Western blot分析蛋白表达及其活性。结果显示,成功构建表达重组载体pGEX KG VP73,且诱导有效表达了41Ku重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白的35％;Western blot分析表达该蛋白具有良好的表达活性。试验为建立无感染性、快速、敏感的血清学诊断方法奠定了一定基础。     

徐淮山羊H-FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆徐淮山羊H-FABP基因cDNA,进行生物信息学分析,构建其融合表达载体pEGFP-H-FABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞(GEF),48h后进行荧光检测,RT-PCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内,在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果,徐淮山羊H-FABP基因完整编码区(CDS)大小为402bp,编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊H-FABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%,氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP-H-FABP,目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊H-FABP基因cDNA,而且H-FABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽,在单细胞水平上可表达于细胞质中,在小鼠体内也可以成功表达。     

“国峰7号”李子在山西的引种表现及栽培技术要点

‘国峰7号’是辽宁省果树科学研究所2005年以‘龙园秋李’和‘澳14’李杂交育成的新品种,2016年由山西农业大学果树研究所引进,具有极晚熟、抗寒、抗流胶病、耐贮运、风味浓郁等特点。果实扁圆形,果顶平,平均单果重70.445克,最大单果重88.34克,果实整齐度好,缝合线浅,两半对称;果皮底色黄绿,成熟时果皮紫黑色,不易剥离;果肉黄色,近皮红色,纤维细、少,果肉品质上;果实可食率98.64%。可溶性固形物含量21.28%,可溶性糖含量9.0%,可滴定酸含量1.6%,Vc含量6.0 mg/100g,花青素含量0.732mg/g,硬度10.8 kg/cm2;半离核,核倒卵圆形,核鲜重0.958g。在山西省晋中市8月中下旬成熟,果实发育期138d左右,适宜在晋中及周边地区栽培。     

新罗曼褐壳商品蛋鸡在湟源地区的生产性能观测

在湟源五九二六四部队养殖场观测整理了两批新罗曼商品蛋鸡的生产性能。结果表明，育雏成活率99．94％，育成成活率975，入舍母鸡存活率93％，164日龄开产，高峰产蛋率在90％，68周龄入舍母鸡累计产蛋240枚，平均蛋重63．4d，料蛋比2．70：1，该品种比较适宜青海东部地区的气候条件，具有一定推广价值。     

类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS0180基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

试验旨在对类鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallea）的BPSS0180基因进行克隆和原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌K96243标准株BPSS0180基因序列设计1对引物,对类鼻疽伯克霍尔德菌hn-1株进行PCR扩增获得BPSS0180基因片段。将得到的BPSS0180基因连接到pET-28a （+）载体,构建pET-28a （+）-BPSS0180重组质粒,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,提取质粒进行酶切鉴定。鉴定正确后,将构建成功的pET-28a （+）-BPSS0180重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行分析。应用DNAMAN、ProtParam、SOPMA和Protscale对BPSS0180基因序列进行生物信息学分析。结果显示,本试验成功克隆了1 146 bp的BPSS0180基因,诱导表达得到的His-BPSS0180融合蛋白大小约为45 ku,且主要以包涵体形式存在。BPSS0180蛋白的分子式为C₁₇₇₉H₂₈₀₉N₅₄₅O₅₃₆S₇,分子质量为40.6 ku,消光系数为40 575,疏水指数为85.43。其不稳定系数为46.52,属于不稳定蛋白;理论等电点（pI）为5.54,为酸性蛋白;总平均疏水性（GRAVY）是-0.261,为亲水性蛋白。该蛋白的二级结构以α-螺旋（58.79%）和无规卷曲（32.02%）为主,预测其在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h。本试验结果为进一步探究类鼻疽伯克霍尔德菌的BPSS0180基因提供了一定的理论依据。     

蒲公英内生真菌PG23抗癌活性的初步研究

研究药用植物蒲公英内生真菌PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制作用。蒲公英内生真菌PG23通过培养,乙醇沉淀获得粗多糖、苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用MTT法测定PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制率,并计算半抑制浓度(IC50)。结果表明,PG23发酵液中多糖得率为2.754%,多糖含量为26.82%;对A549肺癌细胞的抑制率以第1天为最高;抑制率不与多糖浓度成比例,最佳作用浓度为14.42μg/mL,抑制率为87.63%(P<0.01),IC50为1.073mg/mL(24h)。PG23发酵液多糖对肺癌A549细胞具有较强的抑制能力。     

罗非鱼无乳链球菌生物学特性与致病力研究

本试验分离纯化1株致使罗非鱼具有链球菌发病症状的病原菌,药敏试验结果表明,该菌对氯霉素等10种药物敏感。PCR扩增该菌的cfb基因,将扩增片段测序后与GenBank上登录的罗非鱼无乳链球菌的cfb基因序列进行比对。同时对该病原菌的生物学特性进行研究,包括培养时间和pH对该菌生长的影响;培养温度对其致病力的影响;探讨了不同攻毒方式(腹腔、胸腔和背部肌肉注射)与鱼发病快慢的关系;并对不同规格(100和10 g左右)的罗非鱼对该菌的易感性进行分析。试验结果表明,该病原菌为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);该菌的最适培养时间为11.5 h,最适培养pH为7.5;腹腔、胸腔和背部肌肉注射后,其发病时间几乎一致,但胸腔注射的试验鱼死亡速度最慢,背部肌肉注射是较安全可行的攻毒方式;33℃培养的无乳链球菌攻毒的罗非鱼发病最快,死亡最集中;100 g的试验鱼比10 g的试验鱼更易感染。     

猪生长激素促分泌素受体基因真核表达载体的构建及鉴定简

本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体（pGHS-R）真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞（HEK293T）观察其表达情况。以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应（SOE-PCR）克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/pGHS-R,酶切鉴定并测序,加myc标签,瞬时转染HEK293T细胞,用Western blotting鉴定该重组质粒是否能在真核细胞中表达相应的目的蛋白。结果显示,本试验成功扩增出pGHS-R编码序列,酶切和测序结果表明pcDNA3.1(+)-myc/pGHS-R构建正确,Western blotting方法证实转染的该质粒能在HEK293T细胞中正确表达目的蛋白。结果表明,本试验成功构建了pGHS-R真核表达载体,并正确表达蛋白,为进一步研究GHS-R的功能奠定了基础。     

大蒲莲猪与长白猪杂交商品猪肥育性能和胴体及肌肉品质研究

选择60头长白×大蒲莲猪杂种商品猪,研究其生长肥育性能、胴体品质和肉质特性。结果表明,60头试验猪35~100kg阶段平均日增重688.39g,料重比2.79。4头屠宰测定,宰前重95.25kg,胴体瘦肉率60.22%;肉质优良,肉色和大理石纹评分分别为3.45、3.33,pH为6.38,滴水损失较低为1.57%,剪切力较小为46.80N,肌内脂肪含量较高为3.78%。每100g背最长肌中氨基酸总量、鲜味氨基酸含量和必需氨基酸含量分别为22.09g、17.11g、9.14g,鲜味氨基酸占氨基酸总量的比例和必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为77.45%和41.35%,肌肉营养价值较高。背最长肌的棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸含量分别为24.90%、12.53%、44.58%和8.18%。     

Cloning,Prokaryotic Expression and Bioinformatics Analysis of LpxB Gene of Brucella melitensis

The study was aimed to clone and express LpxB gene,and perform the bioinformatics analysis of protein.The genomic DNA of Brucella melitensis M5-90 was used as template.According to the genome sequence of M5-90 on GenBank,a pair of primers was designed.LpxB gene,which was 1 188 bp,was amplified by PCR,and was ligated into pMD20-T vector.The constructed recombinant plasmid pMD20-T-LpxB was transformed into E.coli DH5α.The recombinant plasmid was confirmed by endonuclease digestion and sequencing.The coding region of LpxB from pMD20-T was digested by BamHⅠ and XhoⅠ.Then,the fragment was inserted into prokaryotic expression vector pET-28a,and the positive plasmid was named pET-28a-LpxB.The pET-28a-LpxB was transformed into E.coli BL21 (DE3).The expressed protein was identified by SDS-PAGE and Western blotting.DNAMAN and BioEdit softwares were used to analyze the sequence of amino acids encoded LpxB gene.The results showed that the CDS of LpxB was successfully cloned and expressed.The secondary structure of LpxB protein consisted structure α -helix,extended strand,β-turn and random coil which accounted for 52.41％,14.94％,8.10％ and 24.55％,respectively.     

羊种布鲁氏菌LpxB基因的克隆、原核表达及其蛋白的生物信息学分析

试验旨在克隆羊种布鲁氏菌LpxB基因并进行原核表达和蛋白的生物信息学分析。以布鲁氏菌M5-90株基因组为模板,参照GenBank中M5-90株基因组DNA序列,用DNAMAN软件设计1对引物,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增得到大小为1 188 bp的LpxB基因,将其连接入pMD20-T载体上,构建pMD20-T-LpxB重组质粒,将其转化到E.coli DH5α感受态细胞中,经BamH Ⅰ和 Xho Ⅰ双酶切鉴定正确后扩大培养。将BamH Ⅰ和 Xho Ⅰ双酶切获得的LpxB片段连接入pET-28a,构建重组质粒pET-28a-LpxB,转化到E.coli BL21（DE3）中,双酶切鉴定正确后扩大培养。经IPTG诱导其表达,用SDS-PAGE和Western blotting对蛋白进行鉴定。运用DNAMAN、BioEdit等软件对LpxB基因编码的氨基酸序列进行分析。结果表明,本研究成功克隆了LpxB基因并进行了蛋白表达,在LpxB蛋白二级结构中,α-螺旋、伸展链、β-折叠和无规卷曲分别占52.41%、14.94%、8.10%和24.55%。     

Reproductive performance in gilts through their first two parities

Fertility data were collected for 766 gilts from 12 breeding and commercial herds. The age at first breeding was 244.5 days and at first farrowing 363.2 days. The litter size was 9.91 piglets born (9.16 live). The farrowing rate at the first service was 87.8%. The total farrowing rate was 95.5% of the mated gilts and 88.4% of all the gilts. 9.8% were repeat breeders. 2.6% of the once mated gilts never returned to oestrus and still did not farrow. The culling rate was 11.6%. The major reason for culling was delayed puberty/anoestrus (7.7%). Of the 565 gilts having a first litter 85.3% were mated after weaning. The age at second farrowing was 541.7 days. The litter size was 10.9 piglets born (10.3 live). The farrowing rate after first service was 83.0%. The total farrowing rate of the 482 sows was 92.9% and of the 565 weaned sows 79.3%. 12.2% were repeat breeders. 4.8% of the sows once mated never returned to oestrus and still did not farrow. The culling rate was 20.7%. Culling because of anoestrus was 4.4%. The month of birth significantly influenced the number of gilts culled because of anoestrus, the age at first breeding and at first and second farrowing. The season also influenced the interval from weaning to service, the percentage of sows served within 7 days of weaning and culled because of anoestrus. No correlation between a high ultrasonic index and lowered fertility was found. The age at first breeding was 1.12 days younger per unit higher ultra-sonic index.     

鲤吉陶单极虫体被结构的扫描电镜观察

应用扫描电镜,对鲤鱼肠道内的吉陶单极虫体被进行了形态学观察。吉陶单极虫的孢子呈瓜子形,后端钝圆,向前一端逐渐尖细。从孢子的后端向前端方向常常包裹着一个无色透明的薄膜。孢子可分为背面和腹面,背面光滑无皱褶,并可见一长卵圆形的极囊,极囊一般较大,约为孢子长度的一半。孢子的腹面褶皱不平,形成形态各异、大小和数量不等的迷宫状沟回,沟回主要分布在孢子的中后端。偶见放出极丝的孢子,极丝较长,常为孢子长度的1倍以上。     

氟苯尼考PEG6000固体分散体的无溶剂熔融法制备与分析

采用无溶剂熔融法,对难溶性药物氟苯尼考的水溶性粉进行了研究。以聚乙二醇6000（PEG6000）为载体,制备氟苯尼考（florfenicol,FF）固体分散体,用X-射线衍射法、红外光谱法、电子显微镜扫描法和溶出速率法对固体分散体进行了表征,比较氟苯尼考原粉、氟苯尼考PEG6000固体分散体、氟苯尼考-PEG6000物理混合物的溶出速率,并用高效液相法测定固体分散体的溶解度。结果显示,氟苯尼考原粉、固体分散体和混合物的X-射线衍射图谱、红外光谱、电镜结果和溶出速率存在明显差异,氟苯尼考原粉是晶体态的片层结构,固体分散体则为无定形态,固体分散体的溶出速率高于氟苯尼考原粉和物理混合物,固体分散体的溶解度达到3．441mg／mL。无溶剂熔融法制备氟苯尼考PEG6000固体分散体可以提高氟苯尼考溶解度,且方法简单,易于推广。