石斛兰和秋花独蒜兰种子的原球茎诱导及其生长分化

以石斛兰(Dendrobium nobile)和秋花独蒜兰(Pleion maculate)的干种子为材料,分别于MS、B5和KC液体培养基上诱导原球茎的形成.然后再于MS,KC和B5固体培养基中继续培养并观察其在不同培养基上的生长发育情况.结果表明,两种兰花的种子在B5液体培养基中诱导产生的原球茎最多;秋花独蒜兰原球茎在KC固体培养基上的成活率最高,幼苗生长发育状况最好;石斛兰原球茎在B5固体培养基上的成活率最高,在KC固体培养基上的生长发育状况最好.表明兰花在不同的发育阶段需要的养分不同.因此,根据不同的快繁目标,在兰花的不同生长发育阶段选用合适的培养基,对培养优良单株和建立高效无性繁殖系是非常必要的.     

井冈山独蒜兰再生体系构建研究

[目的]为井冈山独蒜兰的开发利用提供技术依据。[方法]以井冈山独蒜兰的蒴果为材料,将其幼胚接种于培养基中,研究不同幼胚培养基、含不同激素组合的原球茎和丛生芽诱导培养基及根诱导条件的诱导效果。[结果]在MS培养基中,接入的幼胚发育缓慢,65 d才转绿,芽发育瓶数为30%,加入2 mg/L GA3后,芽发育瓶数提高到40% 在1/2 MS培养基中,幼胚43 d即开始转绿,芽发育瓶数为62% MS培养基附加2.0 mg/L 6-BA时,对原球茎和丛生芽的诱导效果最好,诱导率分别为90%和80% 在18℃时,独蒜兰无根苗培养15d即开始生根,在1/2 MS培养基中培养30 d,生根率达到95.2%,平均生根数为4.0条/株。[结论]该研究建立了适宜的井冈山独蒜兰再生体系。     

濒危兰科植物独蒜兰的快繁技术研究

对独蒜兰的离体快速繁殖技术进行了研究。以独蒜兰种子及种子萌发的无菌苗的原球茎、叶片为外植体,诱导产生无菌苗。结果表明：独蒜兰种胚萌发最适培养基为1/2MS+6- BA（0.1 mg/l）+ NAA（1.0 mg/l）+活性炭2 g/l,6- BA、KT有抑制衰老的作用,能促进独蒜兰原球茎直接分化成苗。组培苗的原球茎经切割后在诱导培养基上培养,可产生增殖分化,形成丛芽。原球茎诱导的最适培养基为1/2MS+6-BA （5.0 mg/l）+ NAA（0.2 mg/l）,增值倍数为2.71。以叶片为外植体,未获得组培苗。在独蒜兰组培快繁研究中,以种子为外植体生产组培苗是最好的方法。     

云南独蒜兰原球茎诱导与增殖的研究

为组织培养快速繁殖云南独蒜兰,对其进行了种子无菌萌发的基本培养基、添加物与激素以及原球茎增殖激素配比的优化筛选.结果表明:在KC、1/2MS、B5这3种基本培养基中,B5较适于种子萌发;添加蛋白胨5g/L、马铃薯泥50g/L或活性炭粉1 g/L均有利于种子萌发形成原球茎;生长激素NAA、2,4-D对种子无菌萌发具有促进作用,而细胞分裂素6-BA则抑制了种子萌发.在以B5附加AC(活性炭)1g/L的基础培养基中,激素组合6-Bal.5mg/L+NAA0.5mg/L更有利于原球茎的增殖与生长.     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

独蒜兰种子快速萌发培养研究

[目的]以独蒜兰种子为试验材料,探索其种子萌发的最佳培养条件。[方法]通过用不同浓度的次氯酸钙进行浸种处理,采用NAA、6-BA和活性炭3因素3水平的正交试验探讨其对独蒜兰种子萌发的影响,并观察独蒜兰种子萌发生长过程。[结果]采用0.05 mol/L的次氯酸钙浸种处理独蒜兰种子10 min后,将其接入B₅+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+活性炭1.0 g/L+20.0 g/L蔗糖培养基中,培养50 d后统计种子萌发率为100%。[结论]该研究为独蒜兰植物大规模栽种生产提供科学依据。     

铁皮石斛兰种子萌发及其原球茎的快繁培养条件研究

[目的]对铁皮石斛兰种子萌发及其原球茎的快繁培养条件进行研究。[方法]以铁皮石斛种子为材料,研究基本培养基、外源激素的种类和浓度及光照对铁皮石斛兰种子非共生萌发及后续分化的影响。[结果]铁皮石斛种子在光照条件下1／2MS培养基中萌发率最高,达91．63％,且萌发时间最短;在1／2MS＋0．2mr／LNAA＋0．5mg／L6-BA培养基中,原球茎的分化效果最好。[结论]该研究为实现今后铁皮石斛的工厂化生产奠定了一定基础。     

白芨种子在3种介质上萌发及生长比较

以MS固体培养基、液体培养基和泥炭基质为培养介质,利用体视显微镜观察并拍照比较白芨种子在3种介质上萌发及生长发育的差异.结果表明:(1)种子在固体培养基和泥炭基质上萌发过程相似,顺次形成绿色原球茎-叶片-不定根;在泥炭基质上不定根及假鳞茎发生均迟于固体培养基,但叶片生长较快,当不定根在茎节基部发生时原球茎基本消失;(2)在液体培养基中种子萌发后,原球茎膨大形成类似假鳞茎的储藏性结构;播种15 d后统计发现,白芨种子在固体培养基中萌发率为80.67％,液体培养基中为89.33％,泥炭基质中为62.67％.结果表明,3种不同培养基质的发育模式存在差异,白芨原球茎是一种类似胚胎的结构,在后续发育中可以消失,也可以形成储藏性结构;MS液体培养基培养在不转接情况下可得到大量原球茎,MS固体培养基和泥炭基质培养均可得到白芨幼苗,泥炭基质培育过程简单,可大量繁殖.     

石斛兰叶片再生体系的建立

以石斛兰叶片为材料,建立了叶片外植体的离体再生体系.结果表明:KC+4 mg·L-16-BA+1 mg·L-1NAA是石斛兰叶片诱导原球茎的最佳培养基,诱导率为11.99%;原球茎适宜的增殖培养基为KC+2 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA,增殖倍数达到8.02;分化培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-16-BA;最佳的壮苗生根培养基为1/2 MS+1 mg·L-1NAA,最佳移栽基质为棕树皮,成活率达到93.33%.     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

兰花高频再生体系探究

[目的]为兰花转基因工程研究奠定基础。[方法]以大花蕙兰原球茎、小苗和春兰种子为材料,以MS为基本培养基,将原球茎切成薄片slice、小苗叶片切成小段进行诱导培养,用舍有GFP基因的农杆菌对春兰幼小原球茎进行转化,检测GFP,的瞬间表达。[结果]薄层切片较薄时,褐化和死亡率较高,但从切口处长出的原球茎多而圆;薄层切片较厚时,褐化和死亡率较低,但切口处无再生原球茎产生;对切片进行7d的暗处理可提高薄层的再生率,黑暗中再生的白色原球茎见光培养2～3d后即可转绿,并很快分化出小芽;叶片原球茎仅在叶片基部的居间分生组织处产生;小于1min的类原球茎为最佳转化受体,GFP的瞬间表达率可达60％。[结论]建立了兰花高频再生体系。     

基本培养基和激素组合对金钗石斛原球茎增殖的影响

以野生金钗石斛茎段诱导长出的原球茎为材料,比较了M S、1/2 M S、B 5、M iller四种不同基本培养基在四个不同培养周期中金钗石斛原球茎生长增殖的情况,筛选出最佳增殖培养基为B 5培养基,原球茎的最适培养周期为30d;在不同生长素比较试验中,NAA对原球茎的增殖效果明显好于IBA;在不同激素6 BA和NAA配比组合正交试验中,采用Ducan多重比较法进行差异显著性分析表明,处理6 BA 0.5m g/L NAA 0.2m g/L的配比为最佳激素组合,原球茎净增殖倍数达到5.146倍。     

蝴蝶兰原球茎诱导因素初探

[目的]探讨不同培养基配方诱导蝴蝶兰原球茎的效果及其诱导因素。[方法]以蝴蝶兰(f001和f006)试管苗根尖和叶为外植体,以MS和KC为基本培养基,分别添加不同浓度的6-BA、NAA和活性炭,各设置16个处理组进行原球茎诱导,研究其对诱导蝴蝶兰原球茎效果的影响。[结果]在KC+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+AC 0.3%的培养基中,蝴蝶兰f006根段原球茎状体的诱导率可达20%;f001根段的诱导培养基配方采用KC+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+AC 0.2%,其原球茎的诱导率达17%,f001叶片的诱导培养基配方采用KC+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+AC 0.1%,其原球茎的诱导率达10%。[结论]该研究中所用的6-BA和NAA激素和活性炭浓度在MS和KC培养基上对蝴蝶兰原球茎的诱导影响均不显著;不同外植体在不同培养基中其适宜的外源激素浓度与组合也不同。     

白及种子液体悬浮培养原球茎的研究

[目的]研究白及种子在液体悬浮培养条件下萌发的最佳条件,为快速繁殖白及幼苗提供技术支撑。[方法]研究不同光照条件、不同培养基和不同激素及浓度对白及种子萌发的影响。[结果]黑暗有利于白及种子萌发,1/2 MS适宜作为白及种子萌发基本培养基。植物激素对白及种子无菌萌发有一定的促进作用,其中,添加1.0 mg/L NAA对白及萌发促进效果最明显。[结论]在黑暗条件下,以1/2 MS+1.0 mg/L NAA为萌发培养基,白及种子萌发率高,萌发整齐一致,且原球茎生长速度一致。     

冬凤兰非共生萌发和低温离体保存（英文）

[Objective] The aim of the research was to establish asymbiotic germination and low-temperature in vitro conservation technique system of Cymbidium dayanum by using plant tissue culture technique to realize its rapid propagation and long-term conservation in vitro.[Method] With mature seeds of C.dayanum as explants,different media were selected to establish asymbiotic germination technique system.With protocorms as materials,conservation,resumptive proliferation and plant regeneration conditions were selected to establish low-temperature in vitro conservation technique system preliminarily.[Result] Mature seeds of C.dayanum could germinate after cultured 90 days on MS media as well as "Hyponex 1" media.The germination rate reached more than 98%.Protocorms inoculated in "Hyponex 1" media could be conserved continuously at 5 ℃ in dark for more than 18 months and the survival rate could reach 90%.Conserved protocorms could realize resumptive proliferation culture both on 1/2 MS and "Hyponex 1" media.The seedling-strengthening and rooting media were 1/2 MS media.[Conclusion] This research provided practical basis for in vitro conservation and rapid propagation of C.dayanum germplasm resource.