鸡新城疫病毒分离株F基因的分子特性分析

【目的】对新城疫病毒(NDV)分离毒株进行分子特征分析,了解免疫鸡群发生新城疫的原因。【方法】用非免疫鸡胚从病鸡肺脏中分离新城疫病毒;参考GenBank上发表的NDV的F基因序列设计引物,应用RT-PCR方法对新城疫病毒分离株进行扩增,并构建克隆载体,对阳性质粒测序后进行F基因核苷酸及推导氨基酸序列分析。【结果】从发病鸡群中分离到6株NDV,分离毒株间的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸同源性分别在99.6%~99.9%和99.1%~99.8%;分离毒株与参考毒株的F基因核苷酸和F蛋白氨基酸序列同源性分别在83.2%~87.3%和90.2%~93.8%;分离毒株F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株的分子特征;6个分离株均属NDV基因Ⅶ型。【结论】NDV分离株的F基因已经发生明显变异,与La Sota、Clone-30、V4等常用疫苗株在遗传进化上的亲缘关系较远,这可能是免疫鸡群发生新城疫的重要原因之一。     

鸭源新城疫病毒的分离鉴定及生物学特性

新城疫（ND）是新城疫病毒（NDV）引起的禽类急性、高度接触性和致死性的传染病,对养禽业的危害极其严重,是危害鸡、鸽、某些珍禽等陆生禽类的主要传染病。1997年我国报道了家养水禽鹅发生新城疫的病例,且发病率高,从而改变NDV对水禽不致病之说。近年来,我国也有家鸭感染NDV的病例报道,但未引起更为严重的流行和发病。作者从鸭泄殖腔拭子中分离到1株NDV,并对该株NDV的生物学特性进行了研究。     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒（NDV）引起的一种能导致大多数禽类消化道、胃肠道和中枢神经系统损伤为主要特征的、急性高度接触性传染病。1926年该病首次被发现于印度尼西亚的爪哇,1927年Doyle在英国的新城首次分离报道并将其命名为新城疫病毒,引起的疾病称为新城疫。我国于1948年分离到NDV，但据载1935年曾有过＂鸡瘟＂流行，可能是由NDV引起。     

新城疫病毒对鸡免疫器官病理损伤的观察

新城疫（ND）是由鸡新城疫病毒（NDV）引起的主要侵害鸡和火鸡的一种急性、热性、败血性传染病，具有高度的接触传染性，至今仍是严重危害世界养鸡业的主要疫病之一。据农业部估计，我国每年因各种禽病造成的经济损失高达数十亿元，其中新城疫占了近10％。目前我国对新城疫已普遍采取以免疫预防为主的综合防治措施，     

鸡非典型新城疫的综合防控

鸡新城疫（Avian Newcastle Disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的一种高度接触性、败血性传染病,主要特征是下痢、呼吸困难、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血。随着养鸡业免疫技术的发展和饲养管理水平的不断提高,典型新城疫得到了很好的控制,但非典型新城疫却屡屡发生,是危害当前我国养鸡业的一种主要疾病之一。     

鸡新城疫病毒的分子生物学特性及应用研究进展

鸡新城疫是由NDV引起的一种高度接触性传染病,是危害养鸡业发展最为严重的疫病之一.NDV是负链RNA病毒,含有核衣壳蛋白NP、磷酸化蛋白P、基质蛋白M、融合蛋白F、血凝素-神经氨酸酶蛋白-HN和大聚合酶蛋白L这6种结构蛋白.对NDV分子生物学特性的深入研究,为NDV在分子水平上进行特异性诊断奠定了坚实的基础.这些技术不...     

我国部分地区近年来新城疫病毒流行株分子生物学特征的研究

参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列,在F基因的3’端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增,其扩增长度为450bp．测序结果表明：近十几年来,我国流行的新城疫毒株主要为基因Ⅶ型,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112～117）强毒株的氨基酸序列特征,并从分子水平上进一步证明我国最近流行的NDV主要为基因Ⅶ型NDV强毒株．     

新城疫病毒长春株5种结构蛋白基因序列分析

根据已发表的新城疫病毒 (NDV)的核苷酸序列设计了 5对引物 ,采用RT PCR技术 ,分别扩增新城疫病毒长春株基因组中的F、HN、M、P及NP基因 ,并克隆和测定序列。与新城疫弱毒LaSota株和V4株进行同源性比较 ,并对NDV长春株、LaSota株及F48E9株F蛋白分子结构的疏水性及抗原表位分析 ,表明NDV长春株具有新城疫病毒弱毒株的特性。     

肉鸡非典型新城疫与大肠杆菌混合感染的诊治

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一类禽类高致病性传染病,其传统疫苗对流行毒株有一定保护力。但近年来在生产中几乎所有的商品鸡均多次使用ND疫苗,非典型性新城疫仍不断发生;更重要的是．近几年来非典型新城疫与大肠杆菌的混合感染在养鸡场中广泛发生,使用抗菌药后,用药期临床症状虽有所减轻．但伴发零星死亡,     

1株抗肿瘤新城疫病毒的毒力分析

[目的]分析1株抗肿瘤新城疫病毒(NDV)的毒力。[方法]通过传统毒力的测定方法,测定此株NDV的最小致死量的平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)及静脉致病指数(IVPI)。通过RT-PCR扩增此株病毒基因组的多个片段,相邻扩增片段之间有部分核酸序列重叠且覆盖完整的融合蛋白(F)基因和血凝素神经氨酸酶(HN)基因的区域,并进行测序。[结果]此株NDV的MDT为105.6h,ICPI约为0.26,IVPI为0。测序结果表明,此株病毒是1株新的NDV,其F蛋白剪切位点为112RRQRRF117。[结论]此株NDV为弱毒株,其F蛋白剪切位点与强毒株一致。除F蛋白剪切位点外,NDV的毒力必然与其他因素相关。     

表达传染性法氏囊病毒超强毒流行株VP2基因重组新城疫病毒LaSota疫苗株的构建

 【目的】重组新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）作为新型的活病毒载体疫苗具有巨大的优势和应用前景,本研究旨在探讨新城疫病毒作为防制传染性法氏囊病超强毒（very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV）及新城疫重组二联活病毒载体疫苗的可行性。【方法】采用单股负链RNA病毒反向遗传操作技术,救获野生型NDV LaSota疫苗株rLaSota及表达vvIBDV Gx株VP2基因的重组疫苗株rLaSota-VP2,分别经滴鼻点眼途径免疫SPF雏鸡,免疫后21 d分别以vvIBDV Gx超强毒和新城疫强毒进行攻击。【结果】rLaSota及表达vvIBDV－VP2基因平均鸡胚致死时间均大于120 h,脑内致病指数（ICPI）分别为0.4和0.36,静脉内致病指数（IVPI）均为0;接种后72～96 h每毫升尿囊液EID50则分别达到109.0以上。rLaSota-VP2以106.0 EID50一次免疫7日龄SPF鸡雏,免疫后3周对新城疫强毒致死攻击100％保护,对vvIBDV攻击免疫保护率达90％以上。 【结论】重组病毒rLaSota-VP2保持了LaSota亲本疫苗株高滴度的鸡胚生长特性和低致病性及遗传稳定性,免疫雏鸡对新城疫强毒和传染性法氏囊病毒超强毒株的致死均形成有效免疫保护。本研究为研制传染性法氏囊病－新城疫重组二联活载体疫苗奠定了基础。     

新城疫病毒出芽机制的研究进展

新城疫病毒(Newcastle disease virus,virus,NDV)是引起禽类急性、高度接触性传染病-新城疫(Newcastle disease,ND)的病原,给养禽业造成了严重经济损失,虽然有疫苗可用于该病的预防,但由于对病原的致病机理、免疫机理了解不充分,一直没能从根本上控制该病。近些年来,VLPs(Virus-like Particles,VLPs)技术在病毒的组装和出芽机制的研究以及某些传染病的疫苗开发上应用广泛,以VLPs技术阐述了NDV出芽的机制。     

鸡新城疫病毒F基因部分片段克隆表达及其抗体制备

[目的]为进一步研究新城疫病毒的分子结构和基因疫苗奠定基础。[方法]用自行设计的l对引物,通过RT-PCR从接毒的SPF鸡胚的尿囊液中克隆了新城疫病毒F基因部分片段,将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了重组质粒,对提取的融合蛋白进行亲和层析纯化和琼扩、ELISA及W estern-blot检测。[结果]通过克隆和PCR扩增获得新城疫病毒F基因的部分片段,大小为509 bp;对构建的重组质粒pGEX-4T-1-F509经诱导表达,获得分子大小约为44 000 bp的融合蛋白,其中F基因的部分片段大小约18 000 bp;经亲和层析,获得纯化GST-F509融合蛋白,进一步用该蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡新城疫病毒F蛋白抗体。[结论]琼脂扩散试验、ELISA及W estern-blot检测表明,该融合蛋白中的F片段具有良好的抗原性。     

新城疫病毒F-HN基因DNA疫苗的免疫效果评价

新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度接触性传染病,严重危害全球养禽业.DNA疫苗因其独特的安全、有效等特点将会是解决传统疫苗不足的新途径.为了评价NDV保护性抗原F、HN融合基因的效果,以PBS作为空白对照,将pVAX Ⅰ、pVAX Ⅰ-F、pVAX Ⅰ-HN和pVAXⅠ-F-HN四种质粒肌肉注射2周龄雏鸡,一免后二免.IHA检测免疫期血清样本（1次/7d）抗体效价;二免后,FCM检测外周血淋巴细胞亚群,淋巴细胞增殖实验检测脾细胞淋巴细胞增殖情况;免疫完毕14d后用105 EID50的lasota株NDV滴鼻攻毒,统计发病率、死亡率.结果：F、HN融合基因诱导机体体液免疫和细胞免疫水平显著提高,攻毒后pVAX Ⅰ-F组保护率为30％,pVAX Ⅰ-HN组为46.7％,pVAX Ⅰ-F-HN组保护率为93.3％,表明F、HN融合基因DNA疫苗具有明显的免疫效果.     

新城疫GM2分离株蚀斑克隆纯化及毒力测定

新城疫（newcastle disease,ND）是世界公认的最重要的家禽疫病之一,伴随着NDV活疫苗的广泛使用,野外分离的新城疫病毒往往由多种强弱病毒混合而成。为了避免不同分离株干扰,必须通过蚀斑纯化将混杂在一起的不同NDV毒株区分开来。文章采用蚀斑纯化技术对野外分离毒新城疫GM2进行蚀斑纯化,并对蚀斑纯化前后病毒的生物学特性进行测定,结果显示,该分离毒蚀斑纯化前MDT,ICPI,IVPI分别为50.5,1.78,2.41,蚀斑纯化后MDT,ICPI,IVPI分别为47.5,1.89,2.65。     

鸡新城疫的诊断与防治措施

鸡新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)引起的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病,具有很高的发病率和病死率,是危害养禽业的一种主要传染病。本文将就ND的诊断和防治措施做一详细的综述。     

养殖生产中鸡新城疫常用疫苗及免疫特性

鸡新城疫自1926年首次发现,几乎世界各国都有本病流行的报告。新城疫是鸡病中危害最严重的一种,死亡率极高,强毒力毒株引起的感染常达100%。目前该病主要以疫苗预防为主,介绍新城疫疫苗种类及各类疫苗使用特点,为鸡场免疫及疫苗选择提供一定的参考。     

宁夏2013年重大动物疫病免疫抗体监测情况与分析

高致病性禽流感、口蹄疫、新城疫、猪瘟等重大动物疫病对畜禽业的危害非常严重,目前疫苗免疫是预防和控制动物疫病的最有效的途径,免疫抗体监测能很好地反应出免疫效果的好坏。为了掌握宁夏重大动物疫病的疫苗免疫效果,按照农业部动物疫病监测计划的要求,对宁夏26个市、县（市、区）的13.8277万份免疫血清进行了抗体监测。结果显示,重大动物疫病免疫抗体合格率均达到或超过农业部规定的合格标准,说明宁夏2013年重大动物疫病免疫效果总体良好。     

商品蛋鸡新城疫免疫技术研究

通过对比不同鸡新城疫（ND）疫苗免疫商品蛋鸡后HI抗体的消长规律,确立了ND弱毒苗＋ND灭活苗联用是商品蛋鸡首选的疫苗组合,并制定了ND最佳免疫程序（8日龄首免→60日龄二免→120日龄三免→以后每隔3个月免疫1次）。经田间试验和小区应用试验证实,将该ND免疫程序加入常规免疫程序中,其免疫效果基本不受其他疫苗免疫等因素干扰;在不同养鸡场实施该免疫程序,其免疫效果差异不显著。因此建议大面积推广应用。     

新城疫病毒毒力的演化研究进展

新城疫是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病.该病主要以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征.新城疫对我国养禽业的发展造成了巨大的威胁,其病毒是一种突变快、进化快的病原,该病毒毒力的强弱并不是一成不变的,其毒力具有本身的演化趋势.通过对新城疫病毒的生物特性、新城疫病毒毒力的演化及与其毒力演化相关的因素研究,旨在探讨新城疫病毒毒力的演化与流行趋势的关系.