火龙果溃疡病病原菌鉴定及生物学特性

为确定火龙果溃疡病病原菌,应用柯赫氏法则测定了从病样中分离的纯培养物的致病性,根据形态学特性和ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并采用菌落生长法和玻片法研究了其生物学特性.结果表明,火龙果溃疡病的病原菌为新暗色柱节孢Neoscytalidium dimidiatum (Penz.) Crous & Slippers.碳氮源对病原菌菌丝生长和产孢量的影响差异明显,菌丝生长和产孢的最佳碳源为蔗糖,菌丝生长最佳氮源为酵母膏,产孢最佳氮源为甘氨酸.温度、pH对病原菌菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响差异显著,菌丝生长、产孢、孢子萌发的最佳温度均为30℃;菌丝生长最佳pH为8,产孢和孢子萌发最佳pH为7.光照对病原菌菌丝生长和产孢有抑制作用,对孢子萌发没有明显影响.相对湿度高有利于孢子萌发,高于98％时,萌发率达100％.     

三株病原真菌对稗草生防潜力的研究

从稻田中采集自然感病的稗草标样,分离获得10余种病原真菌,经生测,链格孢菌、尖角突脐孢菌和内脐孢菌是3株很有希望的稗草生防潜力菌。对它们的生长及产孢特性、寄主范围及孢子悬浮液喷雾接种对水稻和稗草的致病性等进行了研究。结果表明,3个菌各有优缺点。链格孢菌对稗草致病力稍差,对水稻有轻度感染,但其产孢速度快,产孢量大;尖角突脐孢菌对稗致病力强,对稻无影响,但产生孢子慢,产生菌丝多;内脐孢菌对稗致病力强,对稻安全,菌落生长较慢,但产孢速度快,产孢量多,气生菌丝少。黑暗、空气充足有利于3菌株的生长及产孢。     

新疆葡萄枝孢果腐病病原菌的鉴定及生物学特性

2019年在新疆葡萄上发现一种新病害,主要危害成熟葡萄果实。感病果实病部产生橄榄绿色霉层,导致葡萄产量和品质严重下降。为明确该病害病原菌种类及其生物学特性,从南北疆11个葡萄园采集80个病样,用常规稀释分离法和单孢分离法对病原菌进行分离和纯化,根据采集地点、葡萄品种、菌落生长速度等特征选取21个代表性菌株进行形态学鉴定、分子生物学鉴定和致病性测定以明确病原菌种类;并研究了温度、光照、培养基、pH对病原菌生长及产孢的影响。结果表明,引起新疆葡萄果腐病的病原菌为枝孢菌,有两个种,即枝状枝孢Cladosporium cladosporioides和柠檬形枝孢Cladosporium limoniforme,其中枝状枝孢为优势种。两种病原菌的适宜生长和产孢的温度均为25℃,适宜生长和产孢的培养基是PDA,不同光照条件下都可大量产生分生孢子,最适宜生长和产孢的pH为7。明确了新疆葡萄枝孢果腐病病原菌及其生物学特性,为今后该病害的预测预报、发生规律和防治方法的研究打下基础。     

不同浓度增效剂对金龟子绿僵菌、黄绿绿僵菌和球孢白僵菌产孢的影响

生防菌作为一种重要的生物杀虫剂,被开发成多种制剂应用于农林害虫的防治;微生物制剂的生产成本高、耗时长,极大影响其生产效率。本试验通过液固两相发酵法筛选出提高金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae、黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride和球孢白僵菌Beauveria bassiana产孢量的最优增效剂浓度。结果表明0.1%浓度增效剂对金龟子绿僵菌的促产孢作用达最大化,浓度达4.48×10⁹孢子/g;黄绿绿僵菌的最适增效剂浓度为0.05%,浓度达2.75×10⁹孢子/g;当增效剂浓度小于0.1%时利于黄绿绿僵菌的产孢,增效剂高于0.1%时抑制产孢;而球孢白僵菌的产孢量与增效剂浓度正相关,最大浓度达7.41×10⁹孢子/g。在真菌液体发酵过程中添加产孢增效剂,有效提高了真菌产孢量,缩短了真菌培养周期,为提高真菌制剂生产效率、节约成本提供理论支持。     

促进镰刀菌产孢的培养基

 镰刀菌是真菌中一个重要的属,其中多种是重要病原,如麦类赤霉病菌,棉枯萎病菌等,但也有一些是有益的,如寄生于昆虫和锈菌及产生植物激素的种。镰刀菌的研究和鉴定主要依据大型分生孢子、小型分生孢子、产孢细胞、厚壁孢子及菌落性状等。镰刀菌在常用的PSA、PDA等基物上,往往气生菌丝茂盛,色泽明显,但不易产生典型的孢子以供鉴定,产孢细胞亦难观察,这是研究中经常遇到的难题,因此作者开展了筛选培养基试验,初步结果简报如下。     

水葫芦生防菌Cercospora piaropi菌株BA-57的生物学特性

尾孢菌属的Cercospora piaropi是一种水葫芦生防真菌,有潜力被开发成为防除水葫芦的真菌除草剂。本试验研究了该菌BA-57菌株的生物学特性。结果表明,BA-57菌丝生长、产孢和孢子萌发的最适温度都为30℃,最适pH分别为7.6、10.0和9.0。光照处理对BA-57的菌丝生长以及产孢量无显著影响,而全黑暗有利于孢子萌发。碳源中,甘露醇最适于BA-57菌丝生长,而葡萄糖和蔗糖有利于BA-57产孢。BA-57菌丝生长和产孢的最佳氮源都是硝酸钠。蛋白胨和玉米粉对BA-57的孢子萌发有促进作用。湿度条件,在水滴中BA-57的孢子萌发率最高。     

木霉菌厚垣孢子形成相关基因的克隆及功能研究

意义与目的厚垣孢子是抗逆能力极强的一类真菌繁殖体,大规模生产真菌厚垣孢子是突破生防真菌产业化的主要技术瓶颈之一,克隆和分析厚垣孢子形成相关基因,对阐明真菌厚垣孢子形成的遗传机制、真菌生长发育的遗传机制、生防真菌产厚垣孢子工程菌的构建以及病原真菌初侵染原的控制具有重要意义。材料与方法根据作者已研究出的木霉菌大量快速产厚垣孢子的液体发酵产孢培养基和发酵控制工艺,采用根癌农杆菌介导的T-DNA插入方法,建立哈茨木霉或绿色木霉的插入突变体库,然后通过所发明的产厚垣孢子特异培养基筛选T-DNA插入突变体库,筛选出产厚…     

病原真菌单孢子显微镜下分离技巧

植物真菌病害鉴定主要是根据症状和病原真菌形态。不同的真菌有时可以引起类似的症状,因此鉴定应以病原真菌的形态为依据。一般真菌病害通过症状观察和显微镜检查病原,可以作出初步诊断。有些还必须经过分离、培养、接种等一系列工作才能最后确定。在病原分离过程中,分离到的真菌不一定是纯的,有时会有各种腐生菌混杂其中,必须纯化,尤其是研究真菌的生理小种或遗传变异等现象,更要求单个孢子纯分离物。单孢子分离的方法很多,常采用单孢子挑取法,即将孢子稀释液涂布在培养皿中的ＰＤＡ培养基平板上,倒置在显微镜载物台上,镜检查找…     

花生果腐病拮抗菌贝莱斯芽胞杆菌Hsg1949鉴定与防效

花生果腐病是由复合病原真菌引起的病害,直接严重影响花生的产量和品质。为筛选花生果腐病的生防微生物,以花生果腐病主要病原菌镰孢菌为靶标菌,采用稀释涂布平板法和平板对峙培养法,在花生根际土壤中筛选到一株对镰孢菌具有拮抗作用的生防细菌Hsg1949。经形态学观察、Biolog微生物自动鉴定系统及16S rDNA和gyrA序列构建系统发育树等综合分析,鉴定菌株Hsg1949为贝莱斯芽胞杆菌。菌株Hsg1949对3株镰孢菌分离株具有稳定的的拮抗活性,继代培养40代时,对3株镰孢菌的抑菌率分别为77.0%、69.7%和61.9%,与初始菌株F0代的抑菌活性无显著差异。其无菌上清液活性物质耐高温,耐强酸但不耐强碱,在pH 11的环境下拮抗活性显著降低。田间试验结果表明,Hsg1949菌悬液2×10⁸和5×10⁸cfu/mL可显著降低花生果腐病发病率,对花生果腐病的防治效果分别为66.54%和71.27%,与化学药剂多菌灵防效（75.11%）相当。菌株Hsg1949对花生白绢病菌、棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌也具有较强的拮抗作用,在植物真菌病害的生物防治中将具有较大的应用潜力。     

影响链格孢菌生长及产孢的因子

在实验室研究了影响稗草病原真菌链格孢生长及产孢的因子.链格孢菌可在较宽的温度范围内生长、繁殖;连续黑暗、空气充足条件下有利于产孢;该菌在4种不同的植物产品上培养可产生大量的孢子,最多的无芒稗籽上每克干物质产孢量达3.59×108个,这些培养物在首次产孢收获后均可直接培养作二次产孢利用.固体(菌块)和液体(菌悬液)接种培养物均能成功产孢.但培养量大时液体接种优于固体接种,产孢量与接种菌悬液浓度呈正相关.     

木耳菌糠培养球孢白僵菌的条件筛选及优化

白僵菌是一种虫生真菌,目前在农林害虫防治中取得了明显的效果。为了进一步促进白僵菌农药的发展,开发低成本的白僵菌发酵方法或优化其发酵条件是不可缺少的一环。本文尝试以木耳菌糠作为主要培养基液体发酵球孢白僵菌,通过单因素试验和正交试验确定菌糠培养基配方并优化发酵条件。结果表明,废弃菌糠适宜作为球孢白僵菌的主要培养基,当料液比为1:4,补充0.3%硫酸锰、0.5%硝酸铵,接菌量10%,培养温度为25℃,培养时间为4 d时,球孢白僵菌的产孢量达到了2.0×109个孢子/mL。研究证实了木耳菌糠培养球孢白僵菌的可行性,希望为低成本发酵其他生防菌提供新思路。     

一株虫生真菌的分离、鉴定及其对筛胸梳爪叩甲幼虫致病力测定

绿僵菌Metarhizium spp.是虫生真菌的主要类群之一,是当前世界上研究和应用最广的虫生真菌之一。由于绿僵菌能在自然土壤环境下长期存活,对地下害虫的控制具有明显优势。本研究从蛴螬僵虫上分离出一株寄生真菌,结合形态学和EF-1α基因5'端序列分析结果鉴定为黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride var. pemphigi。菌株培养的试验表明,乳糖有利于该菌株的菌丝生长,葡萄糖有利于该菌株产孢,KNO₃为该菌株最适宜的氮源,在乳糖和KNO₃为碳氮源时,C/N比为34:1有利于菌丝生长及产孢,添入微量元素Mn能促进产孢。在灭菌土中含5×10⁶孢子/g时该菌株的对筛胸梳爪叩甲幼虫的校正累积死亡率为57.14%,幼虫逃逸率为4.76%。     

介绍一种改进的单孢分离技术——小玻片注射法

真菌的单孢分离法是植病研究中常用的基本方法,目前常用的琼脂平板表面单孢子挑取法、微块单孢子分离法、微块注射单孢子分离法,获得单孢纯株的可靠性虽较大,机率也较高,但由于都是采用琼脂作为孢子载体,镜检寻找单孢时因厚薄不匀、透明度差等原因,往往难以快速进行。尤其当孢子     

贵州柑橘真菌病害种类调查及病原鉴定

为明确贵州柑橘主要真菌病害种类,采集柑橘病害标本,并分离鉴定其中的真菌病原。结果表明,贵州柑橘常见的真菌病害有炭疽病、白粉病、煤污病、树脂病、脚腐病、青霉病、绿霉病、黑腐病、黑星病,分别由刺盘孢菌、白粉菌、煤炱菌、球壳菌、镰刀菌、意大利青霉菌、指状青霉菌、丝梗孢菌和茎点霉菌引起。     

葡萄黑痘病发生及其防治技术

葡萄黑痘病发生及其防治技术薛德乾福建省上杭县临城农技站３６４２００葡萄黑痘病又称疮痂病，是一种半知真菌痂园孢菌［Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａａｍｐｅｌｉｎｕｍ（ｄｅＢａｒｙ）］所致，在我县发生日趋严重，个别果园甚至于毁产无收。１、发生为害规律葡萄黑痘病菌主要...     

楚雄腮扁叶蜂虫生真菌粉红粘帚霉的鉴定及其生物学特性

为明确楚雄腮扁叶蜂Cephalcia chuxiongica病原真菌的种类,以组织分离法对自然罹病死亡的楚雄腮扁叶蜂进行虫生真菌的分离培养,根据形态学特征和rDNA ITS序列分析对所得虫生真菌进行鉴定,并对其中的高毒力菌株进行生物学特性测定。结果表明:共分离得到4属25株菌株,其中以粉红粘帚霉Clonostachys rosea出现频率最高,共分离到15株,均与GenBank中粉红粘帚霉相关菌株亲缘关系最近,ITS序列同源性达100%,属优势种。按照柯赫法则证实4个属的虫生真菌对楚雄腮扁叶蜂均有致病力,其中粉红粘帚霉致病力最强,其高毒力菌株SWFUYHL 02-01对楚雄腮扁叶蜂幼虫致死中时为10 h;蛋白胨马铃薯葡萄糖琼脂培养基最适宜该菌株生长和产孢,其次是马铃薯葡萄糖琼脂培养基;该菌的最适生长温度为25℃,光照对其菌丝生长无显著影响;在以不同种类糖为碳源的培养基上该菌株均能生长,以蔗糖为碳源的培养基上产孢量最高,显著高于以其它糖为碳源时;适宜其生长的氮源是酵母浸出粉,适宜产孢的氮源是硝酸铵和尿素,以硫酸铵和酵母浸出粉为氮源时不产孢;适宜菌丝生长和产孢的无机盐分别是MnSO_4和MgSO_4,添加CaCl_2的培养基上未见产孢;光照对粉红粘帚霉孢子萌发无显著影响。粉红粘帚霉菌株在采样点的出现频率与其生物学特性完全吻合。     

小菜蛾高致病力绿僵菌的筛选、鉴定及培养特性研究

为开发蔬菜害虫小菜蛾Plutella xylostella的高致病力真菌生物农药,以3龄小菜蛾幼虫为供试虫源,测定了25株虫生真菌菌株对小菜蛾的致病力,从中筛选出1株对小菜蛾幼虫有较高致病力的菌株CQM125。生测结果显示,在20℃、1.0×108孢子mL 1菌株CQM125菌液处理小菜蛾幼虫的LT50为3.97 d;25℃、5.0×107孢子mL 1菌液的LT50为2.44 d;在25℃下,第7 d的LC50为2.31×104孢子mL 1;接种处理后,20℃、8 d的小菜蛾死亡率为84.22%,对小菜蛾表现出良好的控制效果。依据菌株的形态特征、培养性状和rDNA ITS序列分析将菌株CQM125鉴定为金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae。对该菌株的培养基和培养条件进行了优化,优化后的产孢培养基为PPDA,其中葡萄糖2%,蛋白胨0.5%;最适产孢温度30℃,最适产孢pH值为6.0;最适光照条件为前6 d黑暗,后8 d光照。     

西藏八角莲炭疽病病原鉴定及室内药剂筛选

从西藏大学农牧学院药材基地的西藏八角莲叶片病斑上分离到1种炭疽病菌,根据病害症状特点、病原菌形态特征、培养性状和致病性测定等进行鉴定,结果表明:西藏八角莲炭疽病的病原菌为半知菌亚门,腔孢纲,黑盘孢目,刺盘孢属(Colletotrichum sp.)。药剂筛选试验结果表明,对菌丝生长和孢子萌发均有强烈抑制作用的药剂有80%福.福锌可湿性粉剂、58%甲霜灵可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂、72%霜脲.锰锌可湿性粉剂,稀释倍数在2000倍时,对菌丝和孢子的抑制率均达90%以上。     

球孢白僵菌

理化性质：球孢白僵菌属半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、白僵菌属，是一种昆虫病原真菌。产品的有效成分为分生孢子．属微生物杀虫剂。在SDAY培养基上．球孢白僵菌菌落绒毛状、丛卷毛状至粉状，白色至浅黄色，偶成淡粉色。在显微镜下．“之”字形弯曲的产孢结构是其重要鉴别特征。产孢细胞单生或簇生于菌丝或分生孢梗上．基部柱状或膨大呈烧瓶形．顶部变细。其分生孢子球形或近球形．     

丽江山慈菇的一种新病害

丽江山慈菇的鳞茎发现干腐状病害,根据科赫氏法则分离得到病原菌,经鉴定为半知菌亚门丝孢纲丛梗孢目瘤座孢科镰孢霉属长孢直喙镰孢霉。