莲子草假隔链格孢菌除草活性产物研究初报

 莲子草假隔链格孢（Nimbya alternantherae）可产生两类不同类型的致病毒素（毒素A和毒素B）,毒素A引致空心莲子草叶片水渍状死亡,毒素B引致局部坏死斑。病原菌在不同培养基中产生不同类型的毒素,在改良Fries基本培养基3号中只产生毒素A,在改良Czapek培养基和Richard培养基中只产生毒素B,而在PS,PD和改良Fries3号基本培养基中两类毒素均产生。25～40 ℃,振荡（120 r/min）及pH 7～8较利于毒素A的产生。毒素A为一种分子质量在10 000 u以下的弱极性物质,具热不稳定性,煮沸10 min即失活。     

莲子草假隔链格孢毒素对空心莲子草叶片和根尖组织超微结构的影响

用不同质量浓度的莲子草假隔链格孢毒素处理空心莲子草叶片和根尖,研究毒素对组织超微结构的影响.结果表明:毒素处理后,叶片细胞质壁分离、质膜消解,叶绿体片层紊乱、膜消解,线粒体膜破裂、嵴消解;根尖细胞质壁分离、质膜消解,线粒体膜破裂、嵴消解,分生区和表皮细胞空泡化并萎缩.随毒素质量浓度的增加和处理时间的延长,对叶片和根尖细...     

莲子草假隔链格孢在不同条件下的生长和产孢能力

莲子草假隔链格孢(Nimbyaalternantherae)在PDA、PCA、NBA、CMA、MA、ZA、GA、OA、Czapek和“组织煎汁”等10种培养基上均能生长;在PCA上产孢最多,而在Czapek培养基上不能产孢病菌经回接后从病茎再分离,产孢能力可提高1倍多病菌在30℃下生长最快,25℃下产孢量最大,15℃下则不产孢全光照(3000lx)可促进菌丝生长,但会抑制产孢     

莲子草假隔链格孢毒素对空心莲子草根尖组织防御酶活性的影响

研究了莲子草假隔链格孢Nimbya alternantherae毒素2-乙酰基-3,4-二羟基-5-甲氧苯基-乙酸(Vulculic acid)对空心莲子草Alternanthera philoxeroides根尖组织防御酶活性的影响.结果表明:Vulculic acid能够引起空心莲子草根尖组织防御酶活性发生变化,在处理初期,细胞内过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性均低于对照,而苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性高于对照.     

莲子草假隔链格孢毒素的致病机理研究

就莲子草假隔链格孢(Nimbya alternantherae)毒素Vuculic acid对空心莲子草(Alligaror alternanthera)的致病机理进行了研究.分别用不同含量的毒素溶液处理空心莲子草离体叶片,测定其对叶片组织细胞膜透性、丙二醛(MDA)含量、细胞内Na 、K 渗漏量以及过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明,空心莲子草叶片组织浸出液的相对电导率随毒素含量的增高和处理时间的增加而增大;Na 的渗漏量高于对照;叶片组织MDA的含量也高于对照;空心莲子草叶片组织内CAT和POD活性在处理前、中期(1～6 h),均随时间的延长呈上升趋势,但酶活性都低于对照;APX活性高于对照.     

几种除草剂与莲子草假隔链格孢混用防除空心莲子草的初步研究

在测定使它隆、农达、农思它、盖草能等除草剂对莲子草假隔链格孢(Nimbyaalternantherae)菌丝生长和孢子萌发抑制作用的基础上,研究了使它隆和农达与莲子草假隔链格孢混用防除空心莲子草的可能性实验结果表明:在1000倍的浓度下几种除草剂对该菌菌丝生长的相对抑制率依次为农思它(955%)>盖草能(80%)>使它隆(694%)>农达(445%);对孢子萌发则只有农思它稍有抑制作用(174%),其它3种均无抑制作用;2000倍的使它隆和农达分别与40g/L菌丝(湿重)的莲子草假隔链格孢菌丝悬浮液等量混合比单纯使用除草剂或菌丝悬浮液的除草效果好     

几种除草剂与莲子草楣隔链格孢混用防除空心莲子草的初步 …

在测定使它隆、农达、农思它、盖草能等除草剂对莲子假隔链格孢（Ｎｉｍｂｙａ ａｌｔｅｒｎａｎｔｈｅｒａｅ）菌丝生长和孢子萌发抑制作用的基础上,研究了使它隆和农达与莲子草假隔链格孢混用防除空心莲子草的可能性,实验结果表明：在１０００倍的浓度下几种除草剂对该菌菌丝生长的相对抑制率依次为农思它（９５．５％）〉盖草能（８０％）〉盖草能（８０％）〉使它隆（６９．４％）〉农达（４４．５％）;对孢子萌发则只有农思     

链格孢菌对空心莲子草致病性的研究

为探讨链格孢菌对空心莲子草的防治潜力,采用离体叶片法检测了链格孢菌不同极性代谢产物、菌丝体及分生孢子对空心莲子草的致病性.结果表明,链格孢菌乙酸乙酯相代谢产物对空心莲子草离体叶片具有较强的致病性,在最高浓度2 000 μg/mL时,石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相及水相导致叶片的病斑直径分别是对照的2.05倍、16.00倍、4.79倍和2.23倍.链格孢菌菌丝体和分生孢子同样对空心莲子草离体叶片具有较强的致病性,且随着浓度的增加致病性增强,在最高浓度9.88×106片段/mL和8.76×106个孢子/mL时,菌丝体和分生孢子所导致的叶片病情指数分别为最低浓度0.62×106片段/mL和0.55×106个孢子/mL时的2.78倍和3.41倍.链格孢菌具有开发为空心莲子草生防菌的潜力.     

生防菌SF-193对空心莲子草的致病力和田间生物防除效果

经室内生物活性测定、田间小区试验和较大面积示范试验结果表明,生防菌SF-193能够有效防除空心莲子草。生防菌SF-193在室内生物测定致病力时最佳菌液稀释倍数为25倍,在田间试验防除效果时最佳菌液稀释倍数为10倍;生防菌SF-193混合液的防除效果最好,菌丝悬浮液的防除效果其次,培养滤液基本没有防除效果。经江苏省疾病预防控制中心检测,生防菌SF-193菌液的毒性为微毒级。     

链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草的致病性

以空心莲子草离体叶片和植株为材料,采用离体叶片针刺法及离体植株培养法研究链格孢菌毒素细交链孢菌酮酸对空心莲子草的致病性。结果表明,细交链孢菌酮酸对空心莲子草叶片具有较强的致病性。在31.25 ～ 500.00 μg/mL浓度范围内,随着毒素浓度的升高,空心莲子草叶片的病斑直径增大,500.00 μg/mL时为2.41 mm;浓度为20.00 μg/mL时,毒素对空心莲子草植株不同部位叶片的致病性存在差异,对幼嫩的顶部叶片致病性较强;细交链孢菌酮酸对空心莲子草植株的生长产生抑制作用,抑制强度随浓度的升高而增强,与对照相比,当浓度达到125.00 μg/mL时,毒素对植株生长的长度、鲜重及平均根长的抑制作用达到显著水平,浓度达到250.00 μg/mL时,植株的生根数也受到显著抑制,在最高浓度500.00 μg/mL时,植株处于零生长,生长长度和生根数均为0,鲜重为负增长,达－0.77 g。本研究表明细交链孢菌酮酸具有开发为防除空心莲子草生物源除草剂的潜力。     

植物乳杆菌发酵培养基的优化

[目的]在成功筛选出1株有强产酸能力的植物乳杆菌的基础上,优化其发酵培养基,以提高其生物量。[方法]使用单因素试验和正交试验法对培养基的成分进行优化。[结果]优化后的发酵培养基为:蔗糖30.00 g/L,酵母浸膏50.00 g/L,无水乙酸钠5.00 g/L,磷酸氢二钾2.00 g/L,柠檬酸氢二铵2.00 g/L,硫酸镁0.58 g/L,硫酸锰0.25 g/L,吐温-80 1 m L/L,碳酸钙2.00 g/L。经优化后植物乳杆菌发酵液的OD值从5.701增长到15.021,活菌数达7.1×109cfu/m L。[结论]优化后的植物乳杆菌发酵培养基降低了生产成本,为后续工业化生产的研究提供了参考。     

1株益生蜡样芽孢杆菌发酵培养基优化研究

[目的]通过优化蜡样芽孢杆菌的发酵培养基,提高蜡样芽孢杆菌的生物量。[方法]在初始发酵培养基的基础上,通过单因素试验和正交试验确定蜡样芽孢杆菌发酵培养基的最适碳氮源和碳氮比。[结果]优化后的发酵培养基为:葡萄糖15.00 g/L,可溶性淀粉40.00 g/L,蛋白胨10.00 g/L,玉米浆干粉30.00 g/L,硫酸铵3.00 g/L,磷酸氢二钾5.00 g/L,磷酸二氢钠5.00 g/L,硫酸镁1.25 g/L,硫酸锰0.60 g/L,氯化钙2.00 g/L。优化后蜡样芽孢杆菌在50 L不锈钢发酵罐中的发酵液活菌数达1.6×1010cfu/m L,较优化前提高了1个数量级。[结论]优化后的蜡样芽孢杆菌发酵培养基大大提高了该菌的生物量,为工业化放大生产提供了参考。     

生防菌瘦果红酵母增殖培养基的优化

为保证葡萄白腐病生防菌瘦果红酵母液体培养的菌体数,采用单因素和正交设计的方法对瘦果红酵母增殖培养基组分进行了优化。首先通过单因素试验确定了适宜瘦果红酵母生长的碳源、氮源、碳源浓度、氮源浓度和无机盐种类,再通过L9(34)正交试验进一步确定了瘦果红酵母J1增殖培养基的最佳配方为:葡萄糖3%、牛肉膏1%、豆饼粉0.5%、K2HPO40.03%、MgSO40.05%。利用该培养基,在100mL三角瓶中,28℃、150r/min振荡培养56h,其菌数可达15.58×107cfu/mL。     

响应曲面法及其在微生物发酵工艺优化中的应用

[目的]介绍响应曲面法及其在微生物发酵工艺优化中的应用。[方法]应用响应曲面法对微生物发酵的培养基配方、培养条件和补料工艺进行优化。[结果]响应曲面法克服了传统方法的局限性,对影响试验指标的各因子水平及其交互作用进行优化和评价,快速有效地确定微生物发酵工艺中多因子系统的最佳条件。[结论]为正确运用响应曲面法开展微生物发酵工艺优化研究提供了科学依据和理论指导。     

透明质酸摇瓶发酵培养基的优化

[目的]优化透明质酸摇瓶的发酵培养基。[方法]利用Plaekett—Btmnan设计及响应面分析法（RSM）对透明质酸产生菌摇瓶发酵培养基进行优化,确定影响透明质酸产量的关键因子。[结果]影响透明质酸产量的关键因子为葡萄糖和酵母膏,葡萄糖最佳浓度为55．78g／L,酵母膏的最佳浓度为23．43s／L;在此条件下,发酵液透明质酸的平均产量为0．219（‰。）。[结论]通过对培养基的优化,透明质酸产量得到提高。试验值与预测值基本一致。     

基于响应面法的土霉素高产菌株S189发酵培养基优化

[目的]提高龟裂链霉菌S189土霉素发酵效率,对其发酵培养基进行优化。[方法]通过PB试验,对培养基中影响发酵效率的各因素进行评价,筛选出显著因素,进一步通过最陡爬坡试验确定其较优浓度,最后利用中心组合试验设计方法结合响应面分析方法,确定3个因子的最佳浓度。[结果]PB试验结果表明,黄豆饼粉、玉米浆和碳酸钙对发酵效率有较大影响。响应面试验优化后这3个因素的最佳含量为:黄豆饼粉41.0 g/L,玉米浆16.4 g/L,碳酸钙12.8 g/L。采用优化后的培养基进行摇瓶发酵,发酵单位可达29.8 mg/L,比优化前提高了24.3%。[结论]响应面方法可用于土霉素发酵培养基的优化,该研究有利于提高土霉素发酵效率。     

响应面法优化产二氢大豆苷元菌株发酵培养基

【目的】 研究采用单因素试验设计和响应面分析法对产二氢大豆苷元菌株发酵培养基的主要营养成分进行优化。【方法】 以脑浸心肉汤培养基(BHI)为基础,通过单因素试验确定主要因素(碳源、氮源、生长因子和无机盐)及其适宜的浓度范围,利用Box-Behnken中心组合试验设计,采用响应面法进行回归分析,确定培养基中的最佳组成成分。【结果】 通过单因素试验确定了葡萄糖、蛋白胨、VB₁和KH₂PO₄能够提高二氢大豆苷元的产量,响应面分析法进一步确定在以BHI为基础的条件下,葡萄糖的补充量为10.22 g/L、蛋白胨为6.00 g/L、VB₁为0.49 g/L、KH₂PO₄为0.82 g/L。验证试验显示在培养基优化后的条件下,DHD的产生量为0.27 μg/mL,与预测值0.28 μg/mL接近。【结论】 利用单因素试验和响应面法,分析明确了产二氢大豆苷元菌株发酵培养基最佳成分为38 g/L的BHI、10.22 g/L的葡萄糖、6.00 g/L的蛋白胨、0.49 g/L的VB₁、0.82 g/L的KH₂PO₄。     

利用菠萝酒合成细菌纤维素的发酵培养基优化

为了提高菠萝酒醪生产细菌纤维素的产量,运用Plackett Burman试验设计法对7个相关影响因素的效应进行评价,筛选出有显著效应的3个因素: MgSO₄、FeSO₄和无水乙醇,然后采用Box Behnken的中心组合试验设计和响应面分析方法(RSM)确定上述3个因素的最佳含量。经优化后的发酵培养基为：酵母膏7 g/L,K₂HPO₄ 0.5 g/L,MgSO₄ 20 g/L,FeSO₄ 0.6 g/L,ZnSO₄ 3 g/L,柠檬酸0.3 g/L,无水乙醇9.4 mL/L。在此优化培养基条件下,菌株M₄₃₈发酵生产细菌纤维素湿膜平均产量为376.8 g/L,是优化前的3倍。可见,Plackett Burman试验和响应面分析相结合的试验方法用于优化发酵培养基科学且有效。