仿刺参ACE抑制肽的纯化及其分子量的测定

利用仿刺参体壁制备具有抑制血管紧张素转移酶(ACE)活性的多肽,为进一步研究ACE抑制肽提供理论基础。本研究采用动物蛋白水解酶酶解仿刺参体壁,得到具有ACE抑制活性的酶解液;将酶解液粗品通过截留分子量5KDa的超滤系统,将活性部分继续用Sephadex G15分离纯化,采用HPLC法测定各组分的ACE抑制活性,同时利用RP-HPLC测定其相对分子质量分布。结果可知:仿刺参活性较高的ACE抑制肽主要由二肽到五肽组成,且分子量越小,抑制活性越高,得到了具有较高ACE抑制活性且组成比较单一的组分d,其IC50为439μg·mL-1。     

亮菌多糖的分离纯化及体内抗肿瘤活性研究

本文建立高效的亮菌多糖分离纯化工艺,并研究其体内抗肿瘤活性。以市售亮菌粗粉为原料,采用水提醇沉、Sevag法脱蛋白、DEAE纤维素离子交换层析、SephadexG-100凝胶过滤层析等方法得到亮菌多糖ATPSⅡ和ATPSⅡ-2;建立小鼠S180实体瘤模型,以生理盐水和环磷酰胺为阴性和阳性对照,观察ATPSⅡ和ATPSⅡ-2在不同剂量（10mg／kg40mg／kg80mg／kg）给药10d后,对小鼠肿瘤抑制的作用。结果表明：亮菌粗粉中多糖含量为22．7g／100g;紫外光谱分析显示纯化得到的ATPSⅡ纯度接近100％;ATPSⅡ和ATPSⅡ-2对肿瘤的抑瘤率随着多糖浓度的增大而增大,其高剂量组对S180的抑瘤率分别为46．7％和51．7％,与阳性对照组相比,亮菌精制多糖ATPSⅡ和ATPSⅡ-2高剂量组抗s180效果接近于临床化疗药环磷酰胺,具有显著的抗肿瘤活性。     

亮菌多糖提取工艺优化及体外抗肿瘤活性研究

本研究进行了亮菌多糖水提、醇沉工艺条件优选并对其体外抗肿瘤活性进行了研究。以多糖含量为指标,设计正交试验考察料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对亮菌多糖提取工艺的影响;以多糖得率为评价指标,选乙醇浓度、乙醇加入量、醇沉时间为考察因素,通过正交试验优选醇沉工艺;采用MTT法测定多糖对4种肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果显示亮菌多糖最佳浸提工艺为料液比1：10,提取次数为2次,浸提温度100℃,时间6 h;最佳醇沉条件为加4倍量95%乙醇沉淀15 h;醇沉后多糖得率11.768%。活性测试结果显示ATPS对人红白血病细胞和人肺癌细胞株的生长具有抑制作用。优选的提取工艺条件稳定,可为ATPS的生产提供实验依据;亮菌多糖对体外肿瘤细胞的生长具有抑制作用。     

海洋细菌Bacillus pumilus PLM4产抗肿瘤多糖的发酵条件优化研究

从广西北部湾红树林海洋淤泥中筛选到的海洋细菌B acillus pum ilus PLM 4具有产生抗肿瘤多糖的能力。通过单因素试验找到了该海洋细菌产生抗肿瘤多糖的最佳发酵碳源、氮源,分别为可溶性淀粉和牛肉膏,最佳发酵pH和海盐用量分别为pH 7.0和6%~10%。通过正交试验对B.pum ilus PLM 4产生抗肿瘤多糖的发酵条件进行了优化,其最佳发酵条件为:可溶性淀粉3.0%,牛肉膏1.5%,海盐6.0%,pH 7.0,30°C下发酵5 d。     

多糖的功能研究进展

多魔芋葡甘聚糖是一种具有天然的生物活性的多糖,具有多方面的生物活性和保健功能,在生物体内起着重要作用,现已成为许多学科研究的热点.针对国内外近年来关于多糖的研究,综述了多糖的一般性质和功能,包括多糖的免疫调节、抗肿瘤、抗突变、降血脂、抗病毒、抗衰老、抗氧化作用和抗风湿性关节炎等研究现状;最后对其发展前景进行了展望.     

玉米花粉多糖对猪瘟免疫效果的研究

本研究采用醇沉淀法从 350 g玉米花粉提取得粗提复合物 38.3 g。经用蒽酮反应、α萘酚反应、间苯二酚反应、碘化反应及高效液相色谱法鉴定 ,证实为多糖。用上述多糖作为免疫增强剂按剂量 50、 1 0 0、2 0 0 mg分别与猪瘟弱毒细胞冻干苗共同免疫猪 ,测定其免疫效果。结果表明 ,各剂量组的 IHA抗体效价均高于对照组 ;T细胞活性 E花环试验测得各剂量的活性 E花环百分率分别为 2 1 .84 %、2 5.4 6%、2 1 .92 % ,均高于对照组 1 5.91 % ;T淋巴细胞转化试验显示 ,各试验组的 T淋巴细胞转化率分别为 55.32 %、 56.39%、54.2 7% ,均高于对照组 4 7% ,上述三种方法测定的结果均显示显著差异。对 T淋巴细胞亚群的测定结果为 ,各试验组的 CD3、CD4、CD8T淋巴细胞的测定平均值均明显高于对照组 ,但 NK细胞的变化不显著。根据试验结果选取 1 0 0 mg剂量组在两个猪场进行田间扩大试验 ,测得的 IHA抗体效价亦高于对照组。研究结果表明 ,玉米花粉多糖既可增强体液免疫 ,又能增强细胞免疫。     

实验性乳腺炎大鼠细胞免疫功能的变化及黄芪多糖对其影响

30只孕鼠随机分成正常对照组(Con,n=10)、阳性对照组(P,n=10)和实验组(T,n=10)。实验组大鼠每天按100mg/kg体重灌喂黄芪多糖(astragaluspolysaccharide,APS),直至实验结束,而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水(physiologicalsalinesolution,PSS)。孕鼠于产后72h分别用灭菌PSS和50μg大肠杆菌(Escherichiacoli)内毒素经乳头管灌注到大鼠第四对乳腺内。灌注后24h处死大鼠,取乳腺组织固定,进行组织学观察,观察显示P组的大鼠乳腺组织破坏得最为严重。P组大鼠乳腺组织中白细胞介素-2(IL-2)浓度与正常对照组相比显著降低(P<0.05);T组大鼠乳腺组织中IL-2浓度与P组相比显著升高(P<0.05)。与正常对照组相比,P组大鼠外围血CD4 T细胞数量显著下降(P<0.05),CD8 T细胞数量显著升高(P<0.05),CD4 /CD8 水平显著下降(P<0.05);而T组大鼠外周血CD4 T细胞数量、CD8 T细胞数量及CD4 /CD8 水平均无显著变化(P>0.05)。结果表明,灌喂APS可以减轻炎症对T淋巴细胞增殖反应的抑制,改善感染导致的机体细胞免疫功能下降,对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的保护作用。     

金蝉花多糖对小鼠免疫功能的影响

为探讨金蝉花多糖对环磷酰胺(CTX)致免疫抑制小鼠的免疫调节作用,将70只试验小鼠随机分为7组,除正常组外,其他6组腹腔注射CTX以建立免疫低下模型,其中,高、中、低剂量组灌胃不同剂量的金蝉花多糖溶液30 d,正常对照组、CTX模型组给予等体积生理盐水,茯苓多糖组、盐酸左旋咪唑组分别给予等体积茯苓多糖溶液和盐酸左旋咪唑溶液,分别测定各组的小鼠体重增量、免疫器官指数、迟发型超敏反应、血清溶血素水平、IFN-γ、IL-2、IgG含量等指标。结果表明,与CTX模型组相比,金蝉花多糖中、高剂量组能显著提高小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素水平(P0.05);各剂量组均能显著影响小鼠迟发型超敏反应(P0.05),均显著提高了IFN-γ、IL-2、IgG含量(P0.05),说明金蝉花多糖对小鼠免疫功能具有一定的调节作用。本研究结果为进一步探究金蝉花多糖的免疫作用机制提供了参考,有利于金蝉花多糖在保健功效方面的应用研究。     

扰流风机降温对奶牛泌乳性能和免疫功能的影响

为研究奶牛舍采用扰流风机降温对奶牛泌乳性能和免疫功能的影响,该研究选择结构和饲养管理相同的两栋泌乳牛舍,检测安装风机（风机舍）和不安装风机（对照舍）对不同时期奶牛泌乳性能、淋巴细胞凋亡率、血液理化指标及免疫相关基因mRNA表达的影响,并分析奶牛泌乳性能、免疫性能指标与等温指数（equivalent temperature index for cattle,ETIC）之间的相关性。结果表明：1）安装风机改善了舍内温热环境,整个试验期风机舍的平均ETIC较对照舍降低了3.52 ℃,有效缓解了奶牛的热应激。2）风机舍的产奶量和4%标准乳在试验中、后期均显著高于对照舍（P<0.05）,且风机舍的乳脂率较对照舍也表现出显著性提高（P<0.05）。3）安装风机改善了热应激条件下奶牛的免疫功能。与对照舍相比,风机舍奶牛血液中淋巴细胞数量在试验中、后期显著增加（P<0.05）,并降低了淋巴细胞的早期凋亡率（P<0.05）,淋巴细胞中促凋亡因子Bax的mRNA表达量及其血清浓度在试验后期均表现出显著性降低（P<0.05）,抗凋亡因子Bcl-xl的mRNA表达量（P<0.01）及其血清浓度（P<0.10）在试验中、后期表现出增加趋势。此外,风机舍的血清白细胞介素-12（Interleukin-12, IL-12）和免疫球蛋白G（Immunoglobulin G, IgG）浓度较对照舍也表现出显著性增加（P<0.05）。4）从各项指标之间的相关分析得出,乳蛋白率、淋巴细胞数量与ETIC均呈显著负相关关系（P<0.05）,淋巴细胞BAK mRNA表达、血清IL-6浓度与ETIC呈显著正相关关系（P<0.05）。 可见,安装扰流风机可改善舍内温热环境,有效缓解夏季奶牛的热应激,提高奶牛生产性能和免疫功能。     

免疫应激对肉鸡肠道微生物区系的影响

微生物区系的平衡是确保肠道健康的重点,本研究对不同免疫状态下肉仔鸡消化道内微生物变化规律进行了研究。选用 180 只 AA 肉公鸡随机分 4 个处理,每个处理 5 个重复,每个重复 9 只肉公鸡。实验分为无免疫组、常规免疫组、免疫亢进和免疫抑制 4 个处理组。于 21、28、35 和 42 日龄肠段的内容物,提取总 DNA,并以此为模板获得反映肠道微生物群落结构特征的肠杆菌基因间重复序列 -PCR(ERIC-PCR)指纹图谱,比较各 DNA 样品指纹图谱的相似性指数。ERIC-PCR 扩增产物大部分为 200～2 000 bp 的基因片段,聚类分析显示,各日龄阶段,处理组间十二指肠细菌种群结构的相似性最高(75%),其次是盲肠(40%),回肠(39%)和空肠(38%)的相似性较低。图谱的条带数目为十二指肠>回肠>盲肠>空肠。28 和 35日龄,十二指肠和空肠脂多糖(LPS)组条带都低于 21 日龄,而回肠和盲肠的未见显著变化。21 日龄,回肠环磷酰胺(CYP)组的条带低于其他处理组。不同免疫状态影响回肠、空肠和盲肠道微生物区系,42 日龄,不同免疫状态对微生物数量和种群的影响不明显。     

电子束辐照对川麦冬品质及抗氧化活性的影响

为探讨高能电子束辐照对麦冬的影响,以川产道地药材麦冬为研究对象,研究不同剂量0 (CK)、2、4、6 kGy电子束辐照对其微生物数量、感官品质、理化品质、活性成分含量及抗氧化活性的影响。结果表明,电子束辐照能明显降低麦冬中需氧菌、酵母及霉菌总数;此外,所有样品中均未检出大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)及沙门氏菌(Salmonella)。电子束辐照有利于提高麦冬总皂苷含量,对水分、总灰分、水溶性浸出物、总黄酮、总多糖、总酚含量及抗氧化活性均无显著影响(P>0.05)。电子束辐照后麦冬颜色变暗,主要表现为a^*值增加。主成分分析(PCA)及线性判别分析(LDA)结果表明,2 kGy电子束辐照剂量对麦冬风味影响较小。综上,2 kGy辐照处理能有效降低麦冬中微生物数量,对其活性成分含量及抗氧化活性无显著影响,能保持麦冬的色泽及风味品质。本研究为电子束辐照技术在麦冬及其制剂的加工应用提供了一定的理论依据。     

热应激对鸡免疫性能的影响

以绵羊红细胞(SRBC)作为抗原,根据鸡对其产生抗体水平的高低,分为高抗体(HA)组和低抗体(LA)组鸡,然后以高温作为激源,研究其对两组鸡免疫性能的影响。结果表明: 1)在未受应激时,HA组和LA组鸡的淋巴细胞转化率无差异;LA组鸡白细胞总数明显比HA组鸡高(P<0.01);LA组鸡异嗜性细胞与淋巴细胞的比值(H/L)显著高于HA组鸡(P<0.05)。 2)急性热应激使HA组鸡淋巴细胞的转化受到抑制,但对LA组鸡无影响;慢性热应激使两组鸡的淋巴细胞转化率都下降,但对LA组鸡影响更明显。 3)慢性热应激对HA组鸡白细胞总数无影响,但使其H/L值明显升高;慢性热应激对LA组鸡的H/L值无明显影响,但却使其白细胞总数明显下降。     

γ射线对日本囊对虾生物学效应的初步探讨

本试验探讨了不同辐射剂量60Co γ射线处理日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus L.）的亲体及幼体的生物学效应,并通过产卵量、孵化率、存活率、畸形率及亲虾的活力等,对辐射诱变效应进行评估。实验数经过SPSS11.0进行单因素方差分析以及线性回归分析显示,亲虾的活力、产卵量、孵化率和存活率随着辐射剂量的升高而下降,而畸形率则相应呈现出上升趋势,辐射剂量同日本囊对虾幼体各性状指标呈显著相关（R2>0.85）。试验还表明,大量受精卵在胚胎时期就发生死亡,但部分畸形的胚胎会发育到无节幼体阶段,并极有可能进一步发育到成体阶段,这将是对可能产生的诱变个体进行人工筛选的工作基础。     

铅胁迫对大叶黄杨铅积累量及叶片生理特性的影响

采用盆栽方法研究了大叶黄杨(Euonymusjaponicus)在单一铅胁迫下对各器官铅积累及叶片生理指标的影响.结果表明:随着土壤铅浓度的增高,大叶黄杨的生物量、叶片叶绿素含量和叶绿素a/b值逐渐下降;植物各器官铅积累量逐渐增加.铅在大叶黄杨体内分布的规律是:根>茎>叶;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性在低浓度范围内呈现上升的趋势,表现出一定的适应能力;在高浓度处理水平时,3种酶活性呈现下降趋势,并都低于对照;叶片膜透性则表现出随胁迫强度的增加而上升.从生理指标反映出:在铅浓度300 mg/kg范围胁迫时,大叶黄杨具有较强的适应能力.     

超声辅助竹节虾头酶解及抗氧化肽分离研究

为了实现竹节虾加工副产物的高值化利用,以竹节虾加工废弃物中的虾头副产物为原料,以水解度和DPPH清除率作为评价指标,采用中性蛋白酶酶解,通过响应面法优化超声辅助酶解工艺,并依次通过超滤、凝胶层析色谱和反相高效液相色谱等分离方法,从竹节虾虾头酶解产物中分离制备抗氧化肽,采用超高压液相色谱串联质谱联用技术对肽的结构进行表征。结果表明,在中性蛋白酶添加量为3 000 U·g~(-1)、p H值7.0条件下,最佳超声辅助酶解工艺参数为超声时间41 min,超声温度55℃,超声频率22 k Hz,料液比1∶9(w/v),在此条件下获得的酶解产物DPPH清除率达69.50%。当水解时间为0.5~2.5 h时,超声辅助酶解的酶解产物水解度和DPPH清除率比非超声辅助酶解工艺分别高17.95%和18.83%,该工艺缩短了酶解时间,节约了能耗。酶解产物经超滤初步分离发现,相对分子质量在3k Da(SHP4)的组分具有显著的抗氧化活性。用凝胶层析法进一步分离纯化SHP4组分后得到4个峰,其中SHP4-II的DPPH清除率最高;SHP4-II通过反相高效液相纯化后也得到4个主要肽峰,在多肽含量为1.5 mg·m L~(-1)时,SHP4-II-4的DPPH清除率最高,达到85.69%,并且具有较好的分离度,质谱分析发现,该抗氧化肽的结构为Gly-Asn-Gly-Leu-Pro(455.99 Da)。本研究结果为虾肽抗氧化保健食品的研发提供了一定的科学依据。     

湿地资源生态功能的调控

湿地具有调节气候、调蓄水量、净化水体、保持水土、物质生产、生物多样性保护、动植物栖息地、教育休闲旅游等生态服务功能。本文总结了我国湿地资源目前所面临的问题,各种湿地资源未来发展的趋势,在此基础上,设计了技术措施和非技术措施,以保障湿地生态功能的恢复、重建,修复受损的湿地生态功能,以实现湿地生态功能的调控。     

法氏囊素在大肠杆菌中的表达及其免疫增强活性

选用大肠杆菌(Escherichiacoli)编码赖氨酸(Lys)、组氨酸(His)和甘氨酸(Gly)的常用密码子按顺序排列成BS基因:5'-AAACACGGT-3'。连续合成10个BS(BS10)串连基因单链及其反向互补链,通过退火使其复性成双链。BS10基因经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后,克隆进表达载体pGEX-6P-1中。获得的重组质粒pGEX-Bur转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,串连的BS10基因获得了高效表达。表达产物经GST亲和层析和胰酶消化处理后,按适当的浓度和新城疫病毒(NDV)混合,免疫90只30日龄的小白鼠。分别在免疫后第7,14和21天,用血凝抑制试验(HI)测定小鼠血清中NDV的抗体水平,结果加入囊素的实验组比不加囊素的对照组HI平均高出22.5个滴度。同样的实验样品免疫100只8日龄SPF(speclficpathogenfree)鸡,15d后实验组的抗体水平比对照组平均高出20.7个滴度。研究结果证实了用大肠杆菌表达的法氏囊素对小鼠和鸡具有免疫增强的作用。     

油田道路对水土保持功能的影响评价

[目的]对生产运营期因油田道路占压和硬化损失的水土保持功能价值进行定量评价,为生产运营期石油天然气项目水土保持补偿费的计征标准提供测算依据。[方法]采用国内外较为常用的生态服务价值测算方法,选取陕西省志丹县境内油田为研究对象,测算生产运营期内油田道路造成水土保持功能价值的损失量。水土保持功能服务价值等于固持土壤、水源涵养、固碳供氧、防风固沙等价值之和。[结果]初步估算,生产运营期油田道路造成的水土保持功能价值的损失量,每口井每年约为1 827元。按照油田道路占油田总面积30%～50%的比例进行折算,则石油、天然气项目在生产运营期造成的年度水土保持功能损失值为3 654～6 090元/井。[结论]现行的水土保持补偿费按年度计征的方式和征收标准(每口井不超过2 800元)是合理可行的。