犬精液冷冻保存技术的研究进展

国内犬精液冷冻保存技术起步较晚,尚处在研究探索阶段,犬精液冷冻保存技术还不成熟,冷冻精液受胎率、窝产仔数与自然交配相比还有一定的差距,而且品种、地域、采精时间的不同,精液冷冻效果也不一致。从犬精液的冷冻保存方法、冷冻保护剂、解冻方法三个方面,综述了近年来国内外的犬精液冷冻研究成果,为探索更加有效的犬精液冷冻技术,提高犬精液冷冻效果提供参考。     

德国牧羊犬精液冷冻保存研究

用手握法采９条德国纯种牧羊犬（２～８岁）精液,在卵黄Ｔｒｉｓ和卵黄－葡萄糖稀释液中添加保护剂甘油和ＤＭＳＯ,液氮熏蒸制作颗粒冻精。结果表明,卵黄－Ｔｒｉｓ稀释液优于卵黄－葡萄糖稀释液。ＤＭＳＯ单独加和与甘油混合加均不利于解冻后精子活率,最佳甘油浓度为４％～６％,始冻温度－１５０℃热平衡温度－１０５℃,入氮温度－１１８℃,保持了正常的冷冻温度曲线,干解冻法解冻后活率高于湿解法（Ｐ〈０．０５）。在最优     

抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

目前,猪的人工授精以鲜精和常温保存的液态精液为主,冷冻精液在人工授精中所占的比例不足1%,由于解冻后精子复苏率较低、异常精子多、受胎率低等原因,在生产上猪的精液冷冻与牛的精液冷冻相比尚未得到普遍推广、应用。精子的冷冻处理在畜牧业上是一个重要且具有特殊优势的操作过程。提高精子冷冻技术水平,需要对配子的生理学知识和精子收集、处理过程的生化改变有更深入的了解,这些     

谷胱甘肽对犬精液冷冻保存效果的影响

为探讨在冷冻稀释液中添加谷胱甘肽（GSH）对犬精液冷冻保存效果的影响,采用按摩法采集5只杂种土犬的精液,离心去精清后,在冷冻液中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的GSH,制成0.25 mL的冻精进行冷冻保存,以不添加GSH的处理组作为对照组。解冻后在含有5% CO₂的空气、37 ℃、相对饱和湿度条件下孵育10 h,分别在孵育0、2、4、6、8、10 h时检查精子活力。结果显示：冻融后0 h,0.5、1.0 mmol/L GSH处理组的精子活力较高,分别为0.36和0.38,均显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组,且两者之间差异不显著（P>0.05）;1.0 mmol/L处理组的精子顶体完整率最高,为85.10%,显著（P<0.05）高于对照组,同时,其精子畸形率最低,为23.00%,显著（P<0.05）低于对照组。冻融后体外孵育2、4 h时,0.5、1.0 mmol/L处理组的精子活力均较高,其中,0.5 mmol/L处理组在体外孵育4 h时,其精子活力仍可达到0.30;孵育6 h时,1.0 mmol/L处理组精子活力最高,显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组;孵育8 h时,各GSH处理组的精子活力均显著（P<0.05）高于对照组;在孵育至10 h时,各GSH处理组的精子活力较其他孵育时间均有较大幅度的下降,未检测到对照组中有呈直线运动的精子。综上提示,在犬精液冷冻液中添加0.5~1.0 mmol/L的GSH能够显著提高冻融后的精子质量和体外存活时间。     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

自1956年Polge首次利用猪冷冻精液进行人工授精并获得仔猪至今,猪精液冷冻技术得到了发展,但与奶牛冷冻精液的应用相比,仍有很大差距。早在1930年,Milovanov等人对猪人工授精进行了试验,并提出最初的猪精液稀释剂(葡萄糖-硫酸盐和葡萄糖-酒石酸盐)。近年来,猪精液冷冻保存液中的非渗透性保护剂糖类物质引起了研究人员的高度关注,     

不同冷冻温度对野牦牛精液品质的影响

试验目的是了解在不同冷冻温度条件下生产的细管冻精在相同的解冻温度、相同的解冻时间条件下,对野牦牛细管冷冻精液品质的影响,以便根据实际情况来确定较为理想的生产操作规程,从而生产优质细管冻精服务于我国畜牧业发展.     

犬冷冻精液技术的试验研究初报

介绍了犬微型细管(0.25 mL)冻精制作方法,优选出冷冻稀释液及稀释操作程序。制作结果:冷冻精液解冻活力达0.405±0.058,精子顶体完整率为(43.58±6.73)%,复苏率达54.6%。精子畸形率为(13.80±4.26)%;不同品种公犬鲜精和冻精品质差异不大,但个体差异显著,有的耐冻性很差;不同初始冷冻温度下,解冻效果各异,以-111~-130℃冷冻效果较好;冷冻时间10~15 min为好;稀释方法还待进一步探讨。     

冷冻颗粒精液的解冻温度与奶牛受胎率关系的研究

我们于1988年4月至1989年8月对698头具有正常繁殖机能的黑白花奶牛冷冻颗粒精液进行不同解冻温度与受胎率关系的研究。试验结果表明,用70℃、60℃解冻的冷冻颗粒精液给奶牛输精的受胎率分别比用40℃解冻的冷冻颗粒精液给奶牛输精的受胎率高29.41％(P<0.01)和12.39％(p<0.05)。     

解冻稀释液及孵育温度对冷冻-解冻后犬精液品质的影响

实验旨在比较解冻后解冻稀释液(Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液)的添加比例(1:0、1:1、1:2)对精液品质的影响,并比较了4种孵育温度(37、34、25、4℃)对精子寿命及精子活力的影响,探索合适的冷冻-解冻后犬精液的孵育条件.结果显示:解冻稀释液的添加与否及添加比例对解冻后孵育30 min的精子活力、活率、质膜完整...     

犬精液冷冻与解冻方法的研究报告

<正>犬的精液冷冻保存,是将采集的新鲜精液,经过品质评定、稀释和冻前处理,按特定的程序降温,最后在超低温(-79℃～-196℃)下的长期保存。精液冷冻的实质就是精液与其周围的冷源环境进行能量交换的过程。精液在冷冻过程中放出一定的能量后,使由液相变化到固相。在这个过程中,对精子最有害的温度区是-20℃～-70℃的冰晶化温度区。精液     

鸡精液冷冻保存技术研究进展

鸡精液冷冻保存对于家禽生产业发展和种质资源保护具有重要意义,有利于在鸡育种中进行后裔测定和基因组选择.但由于鸡精子的特殊结构,冷冻保存对其活力和受精率有较大影响,目前尚处于研究阶段.本文分析了鸡精子的结构与特点,对鸡精液冷冻技术的发展历程、冷冻保护剂和冷冻方法等研究进展进行综述,为今后禽类精液冷冻技术研究提供参考.     

兔精液冷冻保存的综述

1稀释液和抗冻保护剂(CPAS)一般来说,三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸和果糖或葡萄糖作为稀释基础液常用于兔精冷冻保存。事实上,当比较几种兔精冷冻保存的稀释液时,它们没有一种比三羟甲基氨基甲烷稀释液提供更好的结果。正如多数家畜,卵黄常用在兔精冷冻稀释液     

犬精液冷冻解冻技术研究

试验以Tris-果糖稀释液为基础稀释液,研究了甘油浓度(4%、6%和8%)、冷冻起始温度(-80℃和-113℃)、冷冻时精液在液氮面上的高度(2 cm4、cm和6 cm)和解冻方法(30℃、12s和65℃、5 s)对犬精液冷冻保存效果的影响。结果表明,犬的精子冷冻保存以6%的甘油浓度、-80℃的始冻温度、在液氮面上2 cm的高度进行冷冻和65℃5 s的解冻方法为好,冷冻-解冻后精子的活率可达0.450 0±0.044 7。     

牛“细管冻精”不同解冻温度的精子活力对比试验

青海省种畜冷冻精液站１９９９年从法国卡苏公司引进了“细管冻精”设备并投入生产。生产一年多来，用户曾多次咨询细管冻精的解冻温度及解冻方法，因为卡苏公司介绍的３５－３７℃的解冻温度不适应地处高寒的青海省实际情况，不能使解冻后的冻精精子活力达到最高值，针对这一课题，笔者先后经过在不同温度下的１００多次解冻对比试验，暂选定了青海省高原气候条件下的最佳解冻方法和解冻温度。１ 解冻方法１．１ 根据青海省实际，一般采用“水浴”和“手搓”两种解冻方法。１．１．１ 水浴法：先将细管冻精从贮精罐内取出迅速投入已准备好…     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

解冻温度和时间对牛精子活力的影响试验

[目的]为了找到较为理想的解冻温度与时间,为基层黄牛改良工作提供技术参考。在不同温度区、不同时间解冻牛细管冷冻精液,对解冻后的精子活力进行检测。[方法]采用50~90℃每隔10℃设一个温区解冻牛细管冻精,检测解冻后精液的活力。[结果]在50~90℃5个温度梯度下快速解冻不同时间后的精子活力均在0.35以上,其中90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s后的精子活力均大于0.4,显著高于其他时间解冻后的精子活力。[结论]不同温度、时间解冻后精子活力各异,其最佳解冻温度和时间为90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s。     

冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响

研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。     

犬精液冷冻及解冻技术研究

犬冷冻精液质量的好坏直接影响受胎率 ,影响养犬户的经济效益。而冻精解冻后精子活动和生存时间 (解冻后 37℃保存 4ｈ精子活力 )又是冷冻精液质量中最重要的两个指标。我们进行了同一样品 ,采用不同温度解冻 ,对冻后精子活力及生存时间影响的对比试验。目的是寻找最佳的解冻温     

犬精液冷冻保存条件的优化

犬精液冷冻保存技术在犬种资源的保护、品种选育和加快良种进程等方面均能发挥关键作用。自1780年,意大利生理学家SpMlanzani首次用犬进行人工授精(AI)试验后,A.E.Harrop[1]又首次对犬的冻精进行AI试验并获得成功。我国在这方面的研究起步较晚,目前尚处于试验研究阶段。研究发现,精     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。