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试验旨在研究重组鸭β-防御素-2制剂对肉鸭免疫性能与肠道绒毛的影响。将1 000只11日龄肉鸭随机分成5个处理组,每处理组4个重复,每重复50只肉鸭。A组为对照组,饲喂基础饲粮;B组在基础饲粮中添加500 g/t杆菌肽锌;C、D和E组分别在基础饲粮中添加300、450和600 g/t的重组鸭β-防御素-2制剂。试验结果表明:胸腺指数,E组显著高于A、B和C组(P<0.05);A和D组均显著高于B和C组(P<0.05);其余各组差异不显著(P>0.05)。脾指数各组间均无显著性差异(P>0.05)。法氏囊指数,除E组显著高于A组外(P<0.05),其余各组无显著性差异(P>0.05)。随重组鸭β-防御素-2制剂添加量的增加,胸腺指数、脾指数及法氏囊指数均有增加的趋势。禽流感疫苗抗体效价E组显著高于A和B组(P<0.05),其余各组均无显著性差异(P>0.05)。随重组鸭β-防御素-2制剂添加量的增加,禽流感抗体效价也有增加的趋势。十二指肠绒毛高度,C和D组均显著高于A和B组(P<0.05)。空肠绒毛高度,A组显著高于B、C、D和E组(P<0.05)。十二指肠与空肠隐窝深度均无显著性差异(P>0.05)。试验结果表明:重组鸭β-防御素-2制剂能提高肉鸭的免疫性能与肠道绒毛的高度。 相似文献
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为了建立操作简单、高效率的猪β-防御素-2转化酿酒酵母的方法,试验比较了酿酒酵母的两种转化方法,即电转化和醋酸锂法。结果显示,两种转化方法对细胞生长状态均有严格的要求。在醋酸锂转化中,以培养10 h,D600 nm为1.051的细胞制备感受态,热激时间为60 min时,转化率为136个/μg DNA;在电转化中,以培养12 h,D600 nm为1.359的细胞制备感受态,电击电压2.5 kV时转化效率为154个/μg DNA。但综合操作效率,最终选择醋酸锂法进行酿酒酵母的转化。 相似文献
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防御素是广泛分布于动植物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,它在先天性免疫系统宿主防御机制中起着重要的作用。笔者从哺乳动物β-防御素的组成分布入手,对β-防御素的分子结构与染色体定位、基因表达调控、生物学作用及应用前景等最新研究作一全面综述。 相似文献
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研究孕酮(P4)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2(SBD2)基因表达的影响,探讨P4调节SBD2表达的潜在机制。建立绵羊输卵管上皮细胞体外培养体系,用不同浓度(10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol/L)P4分别处理绵羊输卵管上皮细胞0、2、6、12、24、48h,筛选P4诱导绵羊输卵管上皮细胞SBD2mRNA表达的最佳条件。然后使用10-6mol/L孕激素核受体拮抗剂RU486,50μmol/L蛋白激酶C(PKC)信号通路阻断剂H7预处理细胞1h,再使用P4诱导SBD2mRNA表达的最佳条件处理细胞,同时设只添加阻断剂(RU486和H7)处理组、只添加孕酮(P4)处理组和空白对照组,通过RT-qPCR技术检测SBD2mRNA的表达变化。10-9mol/LP4诱导绵羊输卵管上皮细胞6h和24h时SBD2mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且与P4组相比,添加RU486和H7后显著抑制了P4诱导的SBD2mRNA的表达水平(P<0.01)。P4以浓度和时间依赖性方式显著增加SBD2mRNA表达,并且诱导可能通过孕酮核受体(PR)介导的基因组途径以及PKC信号通路来提高绵羊输卵管上皮的先天免疫防御能力。 相似文献
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防御素是一种广泛分布于动植物中的阳离子小肽,是哺乳动物先天性免疫防御系统的重要成分,具有广谱抗菌、抗病毒和抗真菌活性。猪β防御素-2(porcine β-defensin-2,PBD-2)是猪表达的天然防御素之一,在体外具有良好的抗菌活性。本研究旨在评价PBD-2在动物体内对重要的人兽共患病原菌猪链球菌感染的治疗效果,为评估PBD-2成为治疗性药物的潜在价值提供依据。首先,在体外检测了PBD-2对猪链球菌临床分离菌株SC-19的杀菌活性,并且在鼠源巨噬细胞(RAW264.7)上检测了PBD-2的细胞毒性。随后,选取4~6周龄,体重在18~22 g的C57雌鼠,检测了PBD-2处理组和PBS对照组小鼠(n≥6)感染猪链球菌SC-19后的存活率、组织载菌量、炎性细胞因子水平和病理变化。结果表明,PBD-2(25~200 μg·mL-1)可显著地抑制猪链球菌SC-19生长(P<0.05),且抑制作用随浓度升高而增强,同时,对RAW细胞无显著的毒性作用(P>0.05)。在体内,PBD-2处理能有效降低小鼠感染猪链球菌SC-19后的死亡率,并且显著降低小鼠感染细菌后的脑、肺、脾组织和血液中的细菌载量,以及血清中炎性细胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的水平(P<0.05)。同时,PBD-2治疗也显著降低了小鼠感染细菌后肺和脾组织的病理变化程度(P<0.05)。这些结果说明,PBD-2在体外具有良好的抗猪链球菌的活性,无显著细胞毒性,同时,在小鼠体内对猪链球菌感染具有治疗效果,提示,PBD-2具有进一步开发为治疗性药物的潜力。 相似文献
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研究旨在验证丁酸钠与维生素D3 (VD3)联合使用对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)β-防御素-3(pBD3) mRNA表达的协同作用.试验分别设置丁酸钠组、VD3组、丁酸钠与VD3联合使用组.使用荧光定量PCR检测各试验组对猪小肠上皮细胞pBD3基因表达水平的影响.结果 表明,不同浓度丁酸钠均能上调β-防御素-3 m... 相似文献
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鸡β-防御素是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3个分子内二硫键。防御素对细菌、真菌乃至某些被膜病毒具有广谱杀伤作用。试验根据已发表的Gal-2基因序列,设计并合成了一对引物。以骨髓中的总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pGEM-TEasy载体上,经筛选鉴定获得阳性重组子pGEM-T-Gal-2。再经EcoRI、XbaI双酶切,插入pMAL-c2x质粒构建表达载体。利用PCR技术和酶切反应筛选转化子成功获得pMAL-c2x-Gal-2重组质粒。 相似文献
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鸡β-防御素CDNA的克隆与序列分析 总被引:11,自引:0,他引:11
使用总RNA提取试剂盒,从1月龄粤黄鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素(Gal-2)cDNA片段.PCR产物经凝胶回收纯化,加A尾后与载体pGEM-T Easy相连,然后转化感受态细胞DH-5α在含X-gal、IPTG的LA平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR与提取质粒作限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序.结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段碱基数为195bp,用Blast程序进行检索比较表明此扩增序列与Genbank中发表的鸡Gal-2 cDNA编码区序列100%相同.该cDNA编码64个氨基酸,包括信号肽、前片段和成熟肽,成熟肽由36个氨基酸残基组成. 相似文献
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在复合酶中添加β-甘露聚糖酶对樱桃谷肉鸭生长性能的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
研究在高含量棕榈粕-椰子粕日粮中添加复合酶的基础上补充β-甘露聚糖酶对樱桃谷肉鸭生长性能的影响。选择1日龄樱桃谷肉鸭1515羽,随机分为5个组,每组设3个重复,每个重复101羽。对照组为玉米-豆粕-棕榈粕-椰子粕型基础日粮,试验Ⅰ~Ⅳ组为在基础日粮中添加150g/t复合酶FE806G,并分别添加7.5×104、1.5×105、3.0×105和6.0×105IU/tβ-甘露聚糖酶。试验分为前期(1~14日龄)和后期(14~46日龄),共46d。结果表明:在高含量榈粕-椰子粕日粮添加复合酶FE806G的基础上补充β-甘露聚糖酶提高了樱桃谷肉鸭14日龄和46日龄体增重(P0.05),除试验Ⅲ、Ⅳ组后期平均日增重外,添加β-甘露聚糖酶的各组樱桃谷肉鸭各阶段平均日增重和前期平均日采食量均高于对照组,而试验各组后期和全期平均日采食量均低于对照组(P0.05),前期、后期和全期料重比也都低于对照组(P0.05);试验各组前期、后期和全期存活率均不同程度地高于对照组。综上所述,高含量棕榈粕-椰子粕日粮在添加复合酶FE806G的基础上分别补充7.5×104、1.5×105、3.0×105和6.0×105IU/tβ-甘露聚糖酶均能提高樱桃谷肉鸭的生长性能,而综合考虑添加成本,7.5×104IU/t为适宜添加水平。 相似文献
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樱桃谷SM2型肉鸭是英国樱桃谷公司培育的瘦肉品种 ,该品种具有抗病力强 ,成活率高 ,增重快 ,饲料报酬高 ,自由采食而不进行填饲 ,肉中脂肪含量低 ,产绒量高且品质好等很多优点。哈尔滨某公司同英国樱桃谷公司合作 ,引进了该品种父母代种鸭 ,为验证其商品代肉鸭在北方地区的生长性能做了这个实验。1 材料与方法1.1 雏鸭来源在某公司种鸭场孵化厂 2 0 0 0年 7月 2 6日出雏的樱桃谷SM2 型商品代雏鸭中随机选取 133只 ,平均雏重 6 2 .0 g。1.2 饲养场所及用具准备进雏前清理消毒饲养鸭舍 ,鸭舍面积 2 4m2 ,地面铺一层新刨花为垫料 ,饲… 相似文献
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驯鹿β-防御素reBD-1 cDNA的克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
从驯鹿舌黏膜上皮组织中提取总RNA,采用RT—PCR技术扩增出reBD-1的cDNA,并重组到pBlueselect T载体,经限制性内切酶谱分析和DNA序列测定,证实所克隆的reBD-1的cDNA为β-防御素,因为该cDNA包含由192个碱基组成的开放读码框(ORF),该ORF编码64个氨基酸残基的前原防御素,该前原防御素含有伊防御素特征性结构即6个在特定位置上的保守半胱氨酸残基。驯鹿β-防御素属首次发现,为更好地了解驯鹿黏膜防御机制有很大的帮助。 相似文献