百合子房培养胚培养及杂种鉴定

栽培的百合,除新太保品种外,个体和百合片繁殖得到的个体1年不开花.用球根切花栽培,虽然球根费比率大,但高沙五、新太保百合的实生个体播种1年后具有开花性状.把这一性状导入其他百合,能够降低切花栽培的球根费比率.由于以往的杂交法难以获得杂种个体,因此以高沙五、新太保百合作母本,其他百合作父本,通过节间杂交培育个体,开发了包括培养技术的胚培养法,研究了有关组合杂交个体的早期确认法.(一)胚培养1、胚培始期:把园沙迈、中仙姬和新太保3种百合的种内受精胚每隔7日摘出培养,无论哪种百合,授粉35日后胚培养都能得到植物体,授粉40日后,胚的长度约0.8mm.通过胚培养培植的胚约20 %—30%成为植物体,授粉50日后,胚的长度1mm以上,中仙姬、新太保培养的胚大部分生育,而园沙迈培养的胚,有30%—40%不能生育.     

李、杏属间远缘杂交及杂种胚培养技术研究

以李为母本、杏为父本进行李、杏远缘杂交,在获得果实的5个杂交组合中,授粉后30d的坐果率为4%～30%,授粉后90～100d的坐果率为4%～16%。杂交后90～100d,取杂种胚进行离体培养,结果表明在S1:改良SH+6-BA1.0mg/L+IAA1.0mg/L和S2:改良SH+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,杂种胚均可萌发。对萌发芽进行继代培养,结果在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上增殖和生长良好。     

杨梅种间杂交及杂种F_1的胚培养

在杨梅属的杨梅种和矮杨梅种之间进行了人工远缘杂交,然后对其杂交F1代成熟种子作了胚培养研究,并用SSR分子标记对杂种的真实性进行了鉴定。结果表明,杨梅种和矮杨梅种有着较好的杂交亲和性,以杨梅种为母本、矮杨梅种为父本的F1杂交种中,70.5%的种子胚正常发育;以矮杨梅种为母本、杨梅种为父本的F1杂交种中,76.5%的种子胚发育正常。用MS添加0.5mg·L-1的6-BA培养基对矮杨梅种(♀)×杨梅种(♂)和杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)2个F1杂交组合以及杨梅品种晚稻杨梅(WD)、迟色(CS)等4份材料的胚培养中,绿苗诱导率分别为85.0%、28.6%、6.9%、0.0。在1/2MS添加0.5mg·L-1IBA的生根培养基中,矮杨梅种(♀)×杨梅种(♂)和杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)F1绿苗的生根率分别为29.2%和33.3%。SSR分子标记对杨梅种(♀)×矮杨梅种(♂)F1的鉴定表明杂交后代为真杂种。研究结果为杨梅育种提供了新的途径,并为杨梅遗传连锁作图研究的群体构建奠定了技术基础。     

三倍体柑桔幼胚离体培养研究

三倍体柑桔幼胚离体培养研究伊华林１邓秀新２史永忠２郭文武２（１华中农业大学园艺系；２华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室，武汉４３００７０）关键词柑桔；三倍体；体细胞杂种；胚抢救；有性杂交ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＣｕｌｔｕｒｅｏｆＩｍｍａｔｕｒｅＴｒｉ...     

甜樱桃与中国樱桃杂种的胚抢救及杂种鉴定

 以甜樱桃为母本，中国樱桃为父本，进行种间杂交，建立了杂种胚抢救技术体系，并对部分 杂种进行了鉴定。结果表明：(1)母本中，‘养老’坐果率最高，‘养老’在授粉4周后胚发生败育，而‘那翁’与‘红灯’则是在第3周后败育；(2)最佳萌发与生长培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳继代增殖培养基为1／2 MS+BA 2 mg／L+IAA 1 mg／L+NAA 0．1 mg／L+维生素c 10 mg／L，最佳生根培养基为1／2 MS+IBA 0．2 mg／L+维生素C lOmg／L；(3)S-allele specific PCR、RAPD及叶片形态鉴定结果证实了杂种的真实性.     

银杏幼胚离体培养再生植株的研究

 以佛手银杏幼胚为外植体, 研究了不同大小幼胚在不同培养条件下, 愈伤组织和胚状体的诱导发育情况。结果表明: 大于3 mm的幼胚, 在MK +NAA 1.0 mg·L ^{- 1} +BA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基上胚状体诱导率最高, 达到53.6% , 最多的一块愈伤组织形成多达38个胚状体。暗培养不利于胚状体的发生。在MK培养基上添加10%椰汁对胚状体的生长发育有很好的促进作用, 有34.5%生长成苗。     

柿胚与果实发育相关性的研究

以甜柿品种卡迟莎和涩柿品种高安方柿为材料,采用常规石蜡切片法及SAS统计分析法,对果实发育及其与胚发育相关性进行了研究。结果表明:果实横切面从外到内是表皮层、石细胞层、中果皮及内果皮组成的果肉组织。表皮外层主要表现为垂周分裂和平周生长;石细胞是厚壁组织中典型的短石细胞。果实、种子发育与胚发育有着密切的关系,果径、种子长与胚长存在高度的正相关性,各相关方程的相关系数均达极显著水平。     

枣幼胚培养畸形苗发生影响因素的研究

以'冷白玉'30 d胚龄的幼胚为材料,对影响胚发育的外源激素、放置方式、胚乳看护时间、光照条件、低温处理的效果进行了研究,以期降低畸形苗发生率,提高幼胚培养效率.结果表明,在IBA0.8 mg/L+ZT0.5 mg/L+GA37.0 mg/L+NAA0.2 mg/L激素条件下,可获得较高的成胚率56.82％;合点端插入...     

枣的胚败育及幼胚培养研究

 对30 个枣优良品种坐果后30 d 的胚败育情况进行了调查, 结果表明, 败育率高于75 %的高度败育品种占53.4 % , 败育率介于25 %至75 %的中度败育品种占3.3 % , 败育率低于25 %的轻度败育品种占43.3 %。以优良品种‘冬枣’、‘金丝丰’等为试材, 对坐果后10～70 d 幼胚进行培养的结果表明, 枣离体胚接种后主要有3 种生长方式, 即形成愈伤组织、子叶间小叶增生和胚直接萌发成苗。本文还提出了提高枣胚培养及胚培养苗移栽成功的技术要点。     

结球甘蓝—大白菜异源三倍体小孢子培养的研究

 为创建结球甘蓝—大白菜异附加系, 以大白菜二倍体(AA, 2n=2x=20) 与结球甘蓝四倍体(CCCC, 2n=4x=36) 杂交获得的8个异源三倍体(ACC, 2n=3x=28) 单株系为试材, 进行游离小孢子培养研究, 获得再生植株, 并对其进行了染色体数目鉴定和性状调查。结果表明, 异源三倍体(ACC) 的小孢子诱导成胚的能力低于双亲; 在NLN中添加15%的蔗糖和0.1 mg·L^-1 6-BA、0.2 mg·L^-1 2, 4-D、0.05 mg·L^-1 KT的培养基上小孢子胚胎发生最高为0.0250个·蕾^-1, 8个株系间有差异, 平均为0.0100个·蕾^-1; 胚胎再生率只有33.3%。小孢子再生植株染色体数在14～27条之间, 田间性状表现多样。     

极早熟油桃幼胚离体培养成苗相关因素探讨

以极早熟油桃‘超红短枝’的幼胚为试材, 在离体培养条件下, 研究了不同胚龄、低温处理时间、蔗糖浓度、6-BA、GA₃浓度配比及种皮等因素对幼胚发育和成苗的影响。结果表明: 果实发育56 d时, 平均PF值仅为0.086。在各处理中, 以低温处理80 d、糖浓度6%对幼胚的发育和成苗效果最佳。6-BA、GA₃配比对经80 d低温处理的幼胚影响较小, 9 mg/L的6-BA对30 d低温处理的幼胚发育有一定的促进作用。在低温条件下, 带种皮培养对幼胚PF值增大和提高成苗率的效果明显好于不带种皮培养的。     

核果类果树胚培养研究进展和育种成效

综述了国内外核果类果树胚培养研究进展。重点分析了培养基对桃、杏、李和梅胚培成苗的影响,对在核果类果树胚培养中常用的培养基类型进行了讨论。同时也分析了低温处理和胚龄对胚培成苗的影响,即核果类果树胚培养需要一定量低温处理,胚龄越长胚培成苗率越高(胚败育除外)。最后阐述了应用胚培养技术在桃和杏品种选育中所取得的成效。     

荔枝组织培养中胚状体产生的类型及分析

以荔枝２０—３０ｄ龄幼胚为外植体诱导产生愈伤组织，并筛选建立了幼胚胚性愈伤组织系。胚性愈伤组织在附加２，４－Ｄ的ＭＳ培养基上诱导胚状体分化，在附加ＮＡＡ和ＩＢＡ的培养基中促进胚状体的发育和成熟。在体外胚胎发生过程中，形成大量各种类型的胚状体，其中出现不少异常胚；胚性愈伤组织继代培养过程中存在大量的染色体变异，这可能是产生异常胚的重要原因之一。     

野鸢尾和射干属间杂交亲和性及杂种鉴定

 以鸢尾科鸢尾属的野鸢尾（Iris dichotoma）和射干属的射干（Belamcanda chinensis）为试材,对其常规授粉后的结实性、花粉管行为及胚胎发育过程进行了观察,并对其杂种进行了形态学和根尖细胞染色体鉴定。结果表明：野鸢尾和射干属间杂交存在一定程度障碍,但仍具有良好的亲和性,且正、反交存在差异。以野鸢尾为母本与射干杂交时,部分花粉不萌发,或者花粉管在柱头或花粉粒上缠绕;不亲和障碍主要发生在受精前,结实率和有胚率分别为48.1%和69.3%。以射干为母本与野鸢尾杂交时,在珠孔端出现胚的解体现象,不亲和障碍主要发生在受精后,结实率和有胚率分别为87.9%和54.3%。所得杂种F₁的株高、花冠幅、分蘖能力都介于野鸢尾和射干之间;杂种的花期和果期较亲本有所延长,叶宽大于亲本;根状茎、花形与野鸢尾相似;花色、雄蕊、花柱、果实和种子与亲本迥异。杂种根尖细胞染色体数与亲本相同,2n = 2x = 32,均为1B型,杂交后代的染色体数相对保守,变异较小,且核型具有较高的对称性。     

采用胚挽救获得Ogura CMS甘蓝与甘蓝型油菜的种间杂种

为将甘蓝型油菜细胞质雄性不育系(Ogura CMS)的恢复基因转至甘蓝Ogura CMS材料上,以6份甘蓝Ogura CMS材料为母本,以含恢复基因的甘蓝型油菜为父本,人工杂交结合胚挽救培养,研究取材时期、培养基成分和杂交组合对胚珠成苗的影响,同时对胚挽救培养获得的植株是否为真实F1杂种进行鉴定。结果发现,胚珠培养以剥蕾授粉后16d取材时胚珠成苗数最多,成苗率为4.56%;培养基以MS+GA 0.1 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+0.5%水解酪蛋白(CH)+0.5%活性炭(AC)成苗效果最好,成苗率高达6.24%;M09CMS×RFO-46组合成苗数最多,成苗率为5.96%。67株胚挽救培养得到的植株经流式细胞仪、SSR分子标记和形态学鉴定,得出65株为真杂种,真杂种率高达97%。     

果梅胚离体培养研究

本试验以优选果梅‘黔荔1号’单株成熟胚为材料，对其进行离体培养，并对外植体灭菌时问、胚萌发和增殖以及生根培养进行研究。结果表明：以0．1％HgCl2消毒8min效果最好，其存活率为75．0％；适合胚萌发和增殖的基本培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋1．0mg／LNAA＋3．0mg／LGA3和1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA＋1．0mg／LGA3；适合生根的培养基是1／2MS＋0．5mg／LIBA，生根率为91％，平均根数达到3．1。     

磨盘柿的合子胚挽救培养

 以‘西村早生’为父本与‘磨盘柿’杂交, 对杂交后的磨盘柿合子胚进行了挽救培养。利用正交试验法研究了改良MS培养基中N、蔗糖、6-BA和IBA浓度4个因素及其组合对磨盘柿合子胚萌发、生根及成苗的综合影响。结果表明: (1) 蔗糖浓度对合子胚的萌发生长影响最显著, 6-BA和IBA次之, N浓度仅对叶色的影响较大; (2) 最佳的培养基以(3 /4N) MS为基本培养基, 添加6-BA 0.1 mg·L - 1和IBA 0.02 mg·L ^{- 1} , 蔗糖最适浓度为50 g·L ^-1。     

两种牡丹胚珠与幼胚离体培养的初步研究

开展牡丹选择育种和杂交育种时，从开花授粉得到种子，再经播种繁殖获得种苗至少需要约1年的时间，自然状态下仅种子萌发就要3个月以上的时间，而且萌发率较低，很难获得整齐一致的种苗，胚珠及幼胚离休培养可使牡丹种胚快速萌发成苗，提高其种子萌发率，缩短萌发时间，加速育种进程。