辅酶Q10产生菌的筛选及产物的定量检测

为了从实验室保存的酵母菌株中筛选产生辅酶Q10的菌株,采用麦芽汁培养酵母菌,皂化法萃取菌体中的辅酶Q10,可见光比色法和高压液相色谱法测定酵母菌中的辅酶Q10的含量。结果表明:筛选出2株较高产量的辅酶Q10产生菌,热带假丝酵母(C.tropicalis(cast).Berkhout)B021产量为7.420 mg/L、粟酒酵母(Schizosaccheromyces pombe Lindner)B147产量为7.488 mg/L。     

根癌农杆菌发酵生产辅酶Q10的培养条件优化

选用根癌农杆菌作为出发菌株,通过对其培养基优化来提高辅酶Q10产量。确定最佳培养基组成为：蔗糖35g/L,玉米浆50g/L,NaH2PO40.5%,Na2HPO40.5%,KNO30.5%。当发酵液初始pH值为7.5、接种量为12.5%,经32℃培养72h后辅酶Q10产量达到8.1mg/L,比最初条件增加了69.5%。     

粘杆菌素高产菌株的选育

以多粘芽胞杆菌BT-163为出发菌株,采用诱变与定向筛选相结合的方式,即根据粘杆菌素生物合成途径的调控机制和本身的分子结构特点,选用重金属离子和氨基酸结构类似物进行筛选,获得高产突变株.这些突变株比原菌株生产能力高出60%以上,并应用在大规模发酵生产中.平均效价从430 000 u/mL,提高到630 000 u/mL.     

根癌土壤杆菌DK-24生产辅酶Q10发酵培养基的优化

【目的】对根癌土壤杆菌(Agrobacterium tume faciens)DK-24发酵生产辅酶Q10的培养基进行优化,为辅酶Q10的生产提供技术支持。【方法】用Plackett-Burman设计法(Plackett-Burman design,P-B)筛选对辅酶Q10产量影响较大的主要因子,采用最陡爬坡试验逼近主要因子的最优水平,通过Box-Behnken设计,利用Design-Expert软件进行回归分析,优化确定各主要因子的最佳质量浓度。【结果】根癌土壤杆菌生产辅酶Q10的4个主要影响因子为蔗糖、玉米浆干粉(CSP)、酵母膏和对羟基苯甲酸(PHB);最陡爬坡试验、Box-Behnken设计及响应面分析表明,根癌土壤杆菌DK-24发酵生产辅酶Q10的发酵培养基中,蔗糖、CSP、酵母膏和PHB的最优质量浓度分别为46.56,22.30,13.46g/L和52.38mg/L。【结论】在优化培养基条件下,辅酶Q10产量可达24.97mg/L,较优化前提高了76.18%。     

辅酶Q10产生菌的原生质体制备与再生条件研究

【目的】选用辅酶Q10产生菌深红红螺菌和根癌土壤杆菌为出发菌株,系统研究其原生质体制备和再生条件,为辅酶Q10的工业化生产提供技术支持。【方法】从菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间、酶解温度、高渗溶液的选择等,对深红红螺菌和根癌土壤杆菌2株菌进行了原生质体制备和再生条件的研究。【结果】①根癌土壤杆菌原生质体制备和再生的适宜条件为:菌龄13.5 h,高渗溶液为0.8 mol/L NaCl,溶菌酶质量浓度为0.2 mg/mL,酶解时间75 min,酶解温度35℃;②深红红螺菌原生质体制备和再生的适宜条件为:菌龄45 h,高渗溶液为0.5 mol/L蔗糖+0.02 mol/L的MgCl2.6H2O,溶菌酶质量浓度为3 mg/L,酶解时间60 min,酶解温度37℃。【结论】得到了根癌土壤杆菌AT-N10和深红红螺菌Rh1.5005适宜的原生质体制备和再生条件。     

枯草芽胞杆菌α-淀粉酶高产菌株的选育

以Ｂａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１４１４０为出发菌株，经亚硝基胍反复多次处理和筛选，该菌α－淀粉酶酶活从８０００Ｕ／ｍｌ提高到３４２００Ｕ／ｍｌ，并探讨了一种高效的α－淀粉酶选育方法．另外在摇瓶培养过程中，探讨了培养基碳源、氮源对该菌株产酶特性的影响．     

猪心中提取和纯化辅酶Q10（联产CytC）

辅酶Ｑ１０和细胞以素Ｃ是促生物氧化酶类生化药物,本试验从猪心中提了和纯化辅酶Ｑ１０,并联产细胞以素Ｃ。猪心以酸性水液粗提,细胞色素Ｃ经人造沸石吸附,洗脱,盐析,三氯乙酸沉淀,弱酸性阳离子吸附,真空干燥得２２５ｍｇＣｙｔＣ／ｋｇ猪心,纯度７９％,提取后的猪心渣,用醇皂化法,经硅胶桂层板,无水乙醇结晶,重结晶,每千克猪心中撮辅酶Ｑ１０７５ｍｇ,含量为９５．３％。     

牛心肌中辅酶Q10的提取及测定

辅酶Q10是一种很好的生化药物,具有重要的生理作用,是细胞自身产生的天然抗氧化剂和激活细胞呼吸的细胞代谢激活剂。笔者研究了从提取细胞色素C后的牛心残渣中分离纯化辅酶Q10的工艺。采用醇碱皂化法,经石油醚萃取、硅胶柱层析,无水乙醇结晶、重结晶得到辅酶Q10。经标准曲线法测定在最佳条件下,分离得到的辅酶Q10纯度较高,达91.2%。     

碱蓬中辅酶Q10的提取分离

[目的]为碱蓬中辅酶Q10的提取分离和工业化生产提供科学依据。[方法]用10%KOH-甲醇的醇碱皂化法从碱蓬中提取辅酶Q10,并用硅胶柱层析,经无水乙醇重结晶后,得黄色结晶。用熔点测定法和薄层层析法对黄色结晶进行定性鉴定,用HPLC法和Craven氏颜色试验法对其进行定量测定。[结果]无水乙醇重结晶后得到的晶体,其熔点为48.6~50.3℃,在碱性条件下,加入氰基乙酸乙脂后,生成了蓝色化合物,证明该结晶是辅酶Q10。用Craven氏颜色试验法测得碱蓬干粉中辅酶Q10的含量约为63.3μg/g,精制辅酶Q10结晶的纯度为93.2%。用HPLC法测得的辅酶Q10含量约为63.1μg/g。两种定量分析方法存在良好的线性关系。[结论]碱蓬是获取辅酶Q10的良好材料,有很好的开发前景。     

光合细菌产辅酶Q10培养条件的优化

[目的]为了对光合细菌培养条件进行优化。[方法]通过单因素试验方法。[结果]在实验室条件下,光照强度为60W,接种量为10%,培养基初始pH6.5,培养温度32℃,培养时间为72h。优化后,辅酶Q10产量达到112.7mg/L,比优化前增加提高了63.57%。[结论]按照优化之后的培养条件进行发酵,辅酶Q10的产量得到大幅提高。     

辅酶Q10应用的研究进展

辅酶Q10是一种脂溶性醌类化合物,在人体呼吸链中参与电子传递,具有促进细胞新陈代谢的功能。基于辅酶Q10的特点和作用,为进一步开发辅酶Q10,并对其进行有效的利用,以发挥其重要的价值,综述了辅酶Q10在医药卫生和美容护肤等领域中的应用及研究状况,并分析了辅酶Q10与其它药物之间的互作关系,并对其开发前景进行了展望。     

高效木质素降解菌的复合诱变选育

从实验室保存的9株白腐真菌中筛选出1株降解玉米秸秆木质素性能优良的菌株YJ-9-1,在第14天时,其木质素降解率为41.74％.经ITS-5.8S rDNA序列同源性及系统发育树分析,初步鉴定该菌为变色栓菌(Trametes versicolor).对YJ-9-1进行紫外微波复合诱变,获得1株高效木质素降解菌株3-8,并利用其对玉米秸秆中的木质素进行降解.结果表明,在第14天时,菌株3-8对玉米秸秆木质素的降解率为48.43％,比出发菌株提高了16.03％.     

几个烟草品种辅酶Q10含量的比较

研究了6个烟草品种(中烟98、中烟99、中烟100、心叶烟、NC89、K326)的叶片和根系中的辅酶Q10含量.结果表明:在烟草幼苗叶片中,以中烟98辅酶Q10含量最高,NC89 次之,心叶烟最低;在烟草幼苗根系中,以中烟99辅酶Q10含量最高,NC89和心叶烟次之,K326最低;中烟99、中烟100、K326、NC89、心叶烟等5个品种的根系辅酶Q10 含量均明显高于其叶片中辅酶Q10的含量.     

插入T-DNA片段构建部分水稻突变体株系

 通过农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导,将T-DNA片段高效插入水稻中花11的基因组DNA中。利用二次枝梗种子和未成熟种子的盾片愈伤组织作为转化起始物,探索并优化了影响愈伤组织诱导率、再生率和转化率的试验条件,得到近10 000株转化植株。经PCR分析和Southern 杂交证明已将外源基因整合到水稻基因组中。当代转基因植株可抗0.2%的除草剂Basta。200余棵T0代转化株系出现白化苗、宽叶、狭叶、黄叶、高秆、矮化并杂草化、不育、白化穗、皱穗和抽穗延迟等突变表型,结实率普遍较低