木霉菌胞外酶及对番茄灰霉病菌作用的研究

研究了木霉菌T21及其4种长势好抗逆性较强的REMI转化体对番茄灰霉病菌抑菌能力,温室防效以及其发酵液中几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶和纤维素酶的活性。结果表明:5株木霉菌株对番茄灰霉病病菌都有不同程度抑制作用,其中Ttrm68抑制效果最好,培养一定时间后,木霉可以把番茄灰霉病菌完全覆盖;温室防效也是Ttrm68的效果最好。胞外酶活性的测定结果表明:对番茄灰霉菌抑制效果好的木霉菌几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶的活性高,而纤维素酶活性则没有明显的规律。     

蔬菜土传病害生防木霉菌株资源的筛选及其防治效果评价

采用平板对峙接种法和温室盆栽试验,测定18种木霉共175个菌株对黄瓜枯萎病菌、辣椒疫霉病菌和番茄青枯病菌3种不同类型的蔬菜土传病害病原菌的防效,筛选生防木霉资源。试验结果表明:拮抗试验中,拮抗黄瓜枯萎病菌的木霉菌株有50株,抑制率达70.0%~86.3%;拮抗辣椒疫霉病菌的木霉菌株43株,抑制率达70.4%~88.7%。盆栽试验中,筛选出番茄青枯病的生防菌株32株,防效达50.0%~92.7%。进一步对在拮抗试验中对黄瓜枯萎病菌抑制率达75%以上的其中13株木霉菌进行盆栽防效评价,获得防效超过60%的高效菌株2株,分别为T52(深绿木霉)和32080(平菇木霉)。     

番茄灰霉病拮抗细菌的筛选与X-75菌株鉴定

采用琼脂平板扩散法筛选对番茄灰霉菌具有拮抗作用的细菌,经过对200株分离自土壤的细菌菌株进行初筛、复筛后,得到了1株具有较高拮抗活性的菌株X-75。对该菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),将其16SrDNA序列与GenBank中已知标准菌株的16SrDNA序列进行比对,并用Neighbor-joining方法构建X-75菌株进化树,结果表明,X-75与标准菌株AB245422 Bacillus velezensis聚于同一分支,同源性最高,达99.93%;利用番茄离体叶片对X-75菌株的防效进行初步检测,结果表明X-75菌株对番茄灰霉病菌具有明显的拮抗作用。     

腐霉利对木霉菌控制草莓灰霉病防治效果的影响

生防菌木霉与灰霉病菌具有较强的拮抗作用,本试验通过盆栽试验和大田试验,研究单独施用木霉菌、化学杀菌剂腐霉利以及二者以不同比例混合配制对草莓灰霉病的防治效果,探究化学杀菌剂腐霉利对生防菌防效的影响。结果表明:盆栽试验中,单独施用木霉菌对灰霉病的防效为81.40%,当木霉菌与腐霉利以质量比8∶1混配时,防效高达88.32%,二者以其他比例混配的防效在65%~80%之间,均高于单独施用腐霉利。木霉菌与腐霉利以8∶1或3∶1的质量比混配,对灰霉病的田间防治效果较好,在80%左右,且对草莓安全、无药害。以一定比例添加化学杀菌剂腐霉利可提高生防菌木霉防效的稳定性,并且可延缓病原菌对化学杀菌剂抗药性的产生。     

果树内生拮抗细菌的筛选鉴定及其生防作用研究

通过组织分离法,在不同健康果树的木质部中分离到235株内生细菌。通过平板对峙法对所得菌株进行了初筛和复筛,得到6株拮抗作用较强的菌株。用过滤和高温灭菌得到的菌株发酵液进行抑菌谱试验,最终获得拮抗作用较强的内生细菌X8。对X8菌株在植物体内定殖、分类鉴定和防治作用的深入研究。结果表明：X8菌株可以在杏、辣椒等植物中定殖。X8菌株发酵液对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）抑制作用最强,达80.3%,对3种链格孢菌（Alternaria）病原菌的抑制作用达到75%以上,对番茄灰霉病和辣椒疫病的防效达到75.4%和79.3%,显著高于50%腐霉利和25%甲霜灵的防效。经16S rDNA序列分析,X8菌株与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的16S rDNA序列的同源性达99%。综合形态特征、生理生化特性,最终将X8鉴定为B. subtilis,在GenBank中序列登录号为HQ647257。     

贝莱斯芽孢杆菌SM2对番茄灰霉病的生防效果

为探寻高效防治番茄灰霉病（Botrytis cinerea）的优良菌株及其防治机制,从番茄根分离获得内生菌SM2,经平板对峙法分析其对B. cinerea的抑菌特性,并通过生理生化特征和16S rDNA测序对其进行鉴定;采用盆栽法和田间试验测定SM2对番茄灰霉病的防效,并测定防病组、致病组和对照组番茄叶片的生理生化指标等。结果表明,菌株SM2可引起B. cinerea菌丝发生畸变,抑菌率达66.67%,被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）;SM2有效降低了番茄灰霉病的发病率和病情指数,盆栽、田间防效分别达到71.73%、65.22%。与对照组相比,防病组和致病组番茄叶片的SOD活性、APX活性、脯氨酸含量和可溶性蛋白含量均显著升高,且防病组显著高于致病组。来自番茄的贝莱斯芽孢杆菌SM2是一株具有生防应用价值的菌株,通过显微拮抗作用和诱导番茄高表达保护酶活性与渗透调节物含量等途径有效防治番茄灰霉病。     

芍药灰霉病拮抗细菌的筛选及生防机制研究

以芍药灰霉病发病典型叶片为试材,采用组织分离法进行病原菌的分离,平板对峙法筛选拮抗芍药灰霉病原菌的内生细菌,结合形态学特征和分子生物学手段进行病原真菌和拮抗细菌菌株的鉴定;采用离体叶片法测定拮抗细菌菌株对芍药灰霉病的防治效果,明确引起洛阳地区芍药灰霉病的病原菌种类,并获得防治芍药灰霉病的内生细菌菌株,以期为芍药灰霉病的防治提供参考依据。结果表明：引起洛阳地区芍药灰霉病的病原菌种类为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea),筛选获得3株对灰葡萄孢菌具有显著拮抗作用的内生细菌菌株SY5、SY15和SY30,其中菌株SY5抑菌效果明显,抑菌率为84.44%。芍药离体叶片防治结果发现,3个菌株均对芍药灰霉病具有良好的防治效果,菌株SY5的防治效果可达67.66%。菌株SY5、SY15和SY30均被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。初步探讨3个菌株的生防机制,结果表明3个菌株均可合成脂肽类物质,且对灰霉病菌菌丝有较强的致畸作用,其中菌株SY5脂肽类物质对灰葡萄孢菌的抑制率最高,为88.89%。     

死亡谷芽孢杆菌NBIF-001防治灰霉病研究

为明确死亡谷芽孢杆菌NBIF-001菌株对灰霉病的防治效果,采用平板对峙结合显微观察确定其对灰霉病菌的抑菌活性,并采用离体组织试验研究其对黄瓜叶部灰霉病及贮藏期番茄果实灰霉病的防治效果。结果表明,在平板对峙条件下NBIF-001对灰葡萄孢具有良好的抑菌活性,显微镜下观察到菌丝发生扭曲、肿胀和变形;离体试验结果表明NBIF-001对灰霉病具有良好的生防效果,对黄瓜叶片灰霉病和番茄果实灰霉病的防效分别达到85.91%和72.52%。     

两种新杀菌剂对番茄灰霉病的作用方式及田间防效

采用离体叶片法测定了2种新杀菌剂42.8%氟吡菌酰胺·肟菌酯悬浮剂(SC)和22.5%啶氧菌酯SC对番茄灰霉病的作用方式及田间防效。结果表明:42.8%氟吡菌酰胺·肟菌酯SC和22.5%啶氧菌酯SC对番茄灰霉病保护作用的EC50值分别为4.04μg·mL~(-1)和10.79μg·mL~(-1),治疗作用的EC50值分别为26.30μg·mL~(-1)和45.93μg·mL~(-1)。田间试验结果表明,两种新药剂在推荐剂量下对番茄灰霉病防效可达80%以上,可用于番茄灰霉病的防治。     

甘蓝霜霉病内生拮抗细菌的筛选鉴定及防效研究

以感染霜霉病和健康的甘蓝叶片为试材,研究筛选了对甘蓝霜霉病菌有拮抗作用的内生细菌。结果表明:从健康的甘蓝幼苗中分离到18株内生细菌;用离体叶法进行测定,发现其中2株内生细菌对甘蓝霜霉病菌有拮抗作用,对其中一拮抗效果较好的菌株AC8进行田间防治试验,其防效达61.4%;通过形态观察、培养特征和生理生化特性鉴定,菌株AC8属于蜡状芽孢杆菌。     

芝麻立枯病拮抗菌的筛选方案优化

通过对峙培养法,利用PDA、KBM和MYG等3种培养基分别测定399株内生细菌对立枯丝核菌的拮抗作用.结果表明:在3种培养基上均表现出一定拮抗作用的菌株95株,拮抗率为23％.温室条件下测定399株内生细菌对芝麻立枯病的生防效果,共筛选到25株茵可有效降低芝麻立枯病发病率和严重度.优化后的筛选方案为:首先利用3种培养基对内生细菌的拮抗性进行体外初筛,选择3种培养基上均有拮抗性的菌株为目标菌株(95株),再将初筛的拮抗性菌株进行体内复筛,选择可有效降低芝麻立枯病发病率和严重度的生防菌株(22株).     

Effects of lentivirus-mediated siRNA targeting IGF-1R on migration and invasion abilities of endometrial carcinoma cells

AIM:To investigate the down-regulation of insulin-like growth factor tgpe 1 receptor(IGF-1R) on the migration and invasion abilities of human endometrial cancer cell HEC-1B. METHODS:The siRNAs targeting IGF-1R gene were synthesized, cloned into a lentivirus expression vector and transfected into endometrial cancer HEC-1B cells(HEC-1B-KD group). The control cells(without virus transfection, HEC-1B-CON group) and negative virus transfection control cells(HEC-1B-NC group) were also set up. The gene silencing effect of siRNA targeting IGF-1R was determined by real-time PCR and Western blotting at mRNA and protein levels,respectively. The proliferation rate was detected by colony formation assay. The cell migration and invasion abilities were determined by Transwell experiment. The mRNA levels of matrix metalloproteinase(MMP)-2 and MMP-9 were measured by real-time PCR. RESULTS:The mRNA and protein levels of IGF-1R in HEC-1B-KD cells were significantly reduced by 81% and 91.5%, respectively(P<0.05). In anchorage-dependent growth by colony formation assay, HEC-1B-KD cells showed much less colonies than HEC-1B-CON cells and HEC-1B-NC cells. Compared with the control cells, knockdown of IGF-1R in HEC-1B cells resulted in significant reduction of cell motility. Down-regulation of IGF-1R in HEC-1B cells also significantly reduced the invasion potential(P<0.05). Down-regulation of IGF-1R substantially reduced the expression of MMP-2 and MMP-9 compared with the control cells. CONCLUSION:Knockdown of IGF-1R reduces the migration and invasion abilities of human endometrial cancer cells in vitro accompanied with a decrease in MMP-2 and MMP-9 expression.     

红蓝绿LED 延时补光对日光温室番茄育苗的影响

以番茄品种辽园多丽为试材,选择白光（W）及红光（R）、蓝光（B）、绿光（G）3 种LED 光源组成6 种不同比例组合光R9B1（9∶1,灯的数量比,下同）、R8B2、R7B3、R9G1、R8B1G1、R7B2G1,研究不同LED 光源延时补光对冬春季日光温室番茄幼苗生长的影响。结果表明：补照LED 光源不同程度地促进了番茄幼苗的生长,其中R7B2G1 的效果最为显著,与不补光对照相比,茎粗增加27.42%,全株鲜质量和干质量分别提高17.84%、30.91%,壮苗指数提高57.61%;幼苗根系活力、叶绿素含量与净光合速率、叶片可溶性糖含量等也显著提高。综上,在红蓝光源的基础上增加一定比例的绿光,能显著促进番茄幼苗生长。     

超声波与保鲜剂对切花月季‘萨蔓莎’水分状况的影响

 研究了超声波(uw)、保鲜剂(Ps)以及超声波与保鲜剂复合(UW+Ps)预处理对切花月季‘萨蔓莎’花枝水分状况的影响。结果表明，与对照相比，3种预处理不同程度地改善了花茎瓶插后短时(6 h内)及瓶插期间的水分状况，提高了花茎不同部位的水势、花枝鲜样质量、相对含水量、吸水量及其与失水量的平衡，保持了较好的水分关系，不同程度延长了切花的瓶插寿命，其中uw +Ps预处理的效果最佳。从空化作用、保水效应等讨论了超声波、保鲜剂以及其复合预处理的可能作用机理。     

镁、钙、硼、钼肥对茄子幼苗生长的影响

以'蓉杂茄8号'茄子为试材,通过叶面喷施稀释倍数为300、500、800倍的镁、钙、硼、钼4种肥料,研究了镁、钙、硼、钼肥料对茄子幼苗生长的影响,以期为生产应用提供参考。结果表明:叶面喷施镁肥有利于茄子幼苗生长,其中稀释800倍的镁肥效果最佳,其整株生物量较对照增加了40.00%。与对照相比,叶面喷施稀释500、800倍的钙肥使茄子幼苗株高增加16.39%、19.45%,根部生物量增加24.19%、29.03%,但却不利于叶片的生长;而稀释300倍的钙肥反而显著抑制了茄子幼苗生长。叶面喷施稀释300倍的硼肥能使茄子幼苗壮苗指数及整株生物量较对照提高20.22%、15.25%,但是稀释500、800倍的硼肥却显著抑制了茄子幼苗生长。叶面喷施钼肥不利于茄子幼苗叶片生长,但稀释500、800倍的钼肥却使茄子幼苗株高、茎粗显著增加,稀释300倍的钼肥则使其生物量增加。综上,镁肥、钙肥以稀释800倍效果最佳,而硼肥、钼肥以稀释300倍效果最佳。不同元素肥料中镁肥效果最佳,因此稀释800倍的镁肥可用于生产中培育茄子壮苗。     

24%螺虫乙酯悬浮剂对烟粉虱成虫的田间药效试验

为明确24%螺虫乙酯悬浮剂对烟粉虱成虫的防治效果,进行了田间药效试验。试验结果表明,24%螺虫乙酯悬浮剂对烟粉虱成虫具有良好的防治效果,药后7 d,24%螺虫乙酯悬浮剂2 000倍液防效最佳,为82.37%,且药后28 d,其仍能保持44.41%的防效,与常规用药40%啶虫脒水分散粒剂3 000倍液相比,其速效性稍弱,但持效性良好。田间应用时,推荐配合啶虫脒使用。     

不同药剂对魔芋软腐病的防治效果

软腐病是魔芋的主要病害，严重制约着石阡山区魔芋的规模化生产，为筛选出防治魔芋软腐病的有效药剂，在果林套种魔芋基地上进行不同药剂对软腐病的防效试验，并采取种芋消毒、出苗后灌根与生长中期喷雾相结合的防治方法。结果表明：最后1次灌根和喷雾防效分别与对照相比，0.5%青枯立克水剂+20%松脂酸铜水乳剂+2%春雷霉素水剂复配液防效均为最高，分别达到93.8%和85.1%;0.3%双攻嘧啶水剂和20%龙克菌悬浮液的防效次之，分别为84.1%、81.2%和72.3%、67.4%;12%克菌康可湿性粉剂和50%灭菌成可溶性粉剂的防效再次之，分别为77.7%、62.8%和72.3%、62.2%;2%春雷霉素水剂、8%宁南霉素水剂、8%乙蒜素乳油的防效最差。不同药剂复配液的综合防效较好，而单一药剂的综合防效一般或较差，建议在生产中可将综合防效极佳的0.5%青枯立克水剂+20%松脂酸铜水乳剂+2%春雷霉素水剂复配液进行推广应用。     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

双孢蘑菇三种类型菌株的RAPD扩增研究

用７２个随机引物,对三种类型双孢蘑菇菌株２７９６（杂交型）,８２１１（优质型）,０１（高产型）等进行了ＲＡＰＤ扩增,发现２６个引物均产生三种不同的带型。用该２６个引物进一步作三种类型９株双孢蘑菇白色菌株的ＲＡＰＤ扩增,发现引物Ｕ１６,Ｕ２０,Ｂ１,Ｈ４,Ｈ５,Ｍ７能很好地区分三类菌株,尤以Ｕ２０和Ｈ５为佳,其产生的三种带型稳定整齐,差异带明显,为双孢蘑菇菌株特性的早期预测提供了ＤＮＡ水平的标记。     

紫穗槐核型分析方法的探讨

采用低温0.1%秋水仙素、0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液,3种预处理方法对紫穗槐的根尖进行处理.结果表明:以0～4℃处理36 h效果最佳.紫稳槐的体细胞染色体数目为2n=40,核型公式K(2n)=2x=40=28m+8sm+2st+2m(SAT),核型分类为"2B"型,不对称系数57.70%,为较对称类型.