甘蓝短散布元件对转基因表达效果的研究

为检验甘蓝短散布元件(SINE)对植物转基因表达的影响,采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列(Short Interspersed Nuclear Element,SINE),该SINE具有核基质结合区(matrix attachmentregion,MAR)的结构特征,将其构建到β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)的两侧翼,形成SINE调控的植物表达载体,采用农杆菌介导法,将含SINE序列和不含SINE序列的植物表达载体导入烟草中。对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,SINE表现出类似MAR的功能,可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含SINE的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了2倍,但转基因植株个体间表达水平存在较大的差异。     

一段烟草核基质结合区的分离及对转基因表达的效果

 采用PCR方法，从烟草基因组中分离了一段核基质结合区（matrix attachment region，MAR），将其构建到β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase，GUS）基因（uidA）的两侧翼，形成MARs调控的植物表达载体，将此表达载体与不含MARs序列的植物表达载体通过农杆菌转化烟草。对转基因植株进行GUS活性定量测定，结果表明，MAR可以提高外源uidA基因的表达水平，与不含MAR的转化植株相比，外源基因的平均表达水平提高了1.5倍，最高达6倍，但MAR的引入不能降低转基因植株个体间表达水平的差异。     

甘蓝短散布元件(SINE)对转基因表达效果的研究

采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列(Short Interspersed Nuclear Element,SINE),该SINE具有核基质结合区(matrix attachment region,MAR)的结构特征,将其构建到β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)的两侧翼,形成SINE调控的植物表达载体,采用农杆菌介导法,将含SINE序列和不含SINE序列的植物表达载体导入烟草中.对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,SINE表现出类似MAR的功能,可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含SINE的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了2倍,但转基因植株个体间表达水平存在较大的差异.     

转基因SOD，POD高表达烟草幼苗抗热性研究*

 生理高温（38±1）℃ 处理转基因烟草品系及非转基因品系的幼苗，测定其SOD,丙二醛、可溶性糖含量、电导率和生物量等指标。结果表明，转基因品系SOD的活性更强，丙二醛的含量更低，生物量受到的影响更小。由此认为，转基因烟草品系幼苗比非转基因品系的抗热性更强，其中转基因POD高表达烟草品系的抗热性最强。研究结果表明通过转基因方法提高植物的抗热性是可行的。     

PBI121/GPAT质粒的构建及对非洲菊转化*

 为提高植物抗寒性,本文构建一个植物表达载体,并对非洲菊进行转化。用已克隆的强抗冷植物兵豆的甘油-3-磷酸转酰酶（GPAT）基因构建表达载体,将GPAT插入表达载体pBI121质粒取代该质粒上原有的GUS基因,并用PCR和酶切进行鉴定。用农杆菌介导的方法将该质粒转化到非洲菊中。结果表明该植物表达载体构建成功,同时对非洲菊高效转化体系进行探索,获得卡那霉素抗性苗7苗。     

云南食用百合病毒病的发生与检测*

 通过田间调查、血清学技术、电镜技术、RT PCR技术对侵染云南食用百合的主要病毒进行调查和研究,结果表明,食用百合病毒病的症状类型多为花叶,斑驳或者无症等类型。 病毒种类主要是黄瓜花叶病毒（CMV）,百合无症病毒（LSV）和百合斑驳病毒（LMoV）。 其中通过ELISA检测,CMV的检出率达到53.3%,LSV的检出率达到46.7%;通过RT PCR检测,CMV的检出率达到60%,LSV的检出率达到50%,LMoV的检出率达到30%。     

大理一种烟草叶斑病的病因初步诊断*

 近年来,在大理州局部烟区发生一种尚未明确病因的烟草褐色凹陷状的叶斑性病害,给当地烤烟生产带来较大危害。通过田间调查分析病害症状特点、发病规律及比对文献资料,开展了可能的致病因子——臭氧（O ₃）危害试验。经臭氧处理后的烟株出现褐色不规则凹陷状的斑点与发生在大理的一种烟草叶斑病症状相符,初步认为该叶斑病是由臭氧（O ₃）所致,属烟草气候性斑点病的类型之一。     

粳稻转基因恢复系的研究*

 利用基因枪转化法将抗除草剂的bar基因和抗二化螟的SCK（修饰后的CpTI）基因导入到优质粳稻恢复系超优一号中。经对转基因植株进行分子检测，表明外源基因已整合到水稻基因组中；经田间除草剂抗性检测和二化螟接种鉴定，表明转基因稳定株系直到T6仍表现高抗除草剂且没有分离，说明bar基因能稳定遗传并高效表达；转基因恢复系与非转基因恢复系相比，抗虫性有所提高，但提高程度在株系间有差异。经对转基因恢复系所配杂交组合进行除草剂检测和优势测定，表明转基因杂交稻也高抗除草剂，且F₁全部正常结实，结实率达80%以上，并具很强的杂种优势，说明亲本抗性基因通过制种已转移到F₁中并得到高效表达，同时说明外源基因的导入没有改变原受体的优良性状；经对部分转基因杂交稻进行纯度鉴定，表明秧田喷施除草剂后，本田的不育株率和杂株率明显降低，特别是两系杂交稻效果更明显。     

间作对水稻根系分布特征的影响*

 通过田间试验，研究了两种水稻品种黄壳糯与合系41间作条件下的根系分布特征。结果表明：间作黄壳糯的根深指数显著高于单作，较单作提高49%。合系41第1行的根深指数显著高于第2行和第3行，分别比第2行和第3行高了26.7%和24.9%，且第2行和第3行之间的根深指数无显著差异。间作黄壳糯产量较单作黄壳糯呈增加趋势，但未达显著差异。合系41第1行的产量显著低于第2行、第3行及合系41单作的产量,分别低了23.7%，24.6%和24.6%,但合系41间作第2行、间作第3行与合系41单作之间的产量无显著差异。本试验应用Sufer软件绘制的根系分布图表明：合系41第1行表层根密度较小，下层根密度较大，根系总量显著减少；单作黄壳糯根系呈两边伸展，而间作黄壳糯根系则深层次分布较多。     

烤烟间作草木樨对烟草病害的影响*

 通过田间试验，研究了烤烟与草木樨间作对烟草病害的控制效果。结果表明： 烤烟间作草木樨处理对烟草病毒病有明显的控制效果，普通花叶病的发病率和病情指数极显著下降，防治效果为22.58%～80%。间作能不同程度地减轻烟草真菌类病害的危害，防治效果为44.50%～52.91%。在本试验条件下间作对细菌类病害的控制效果不明显。     

不同烟草品种对云南烟草野火病菌的抗性鉴定*

 采用采自云南省不同地点、不同生理小种的24株烟草野火病菌对24个不同烟草品种及两个野生种黄花烟和长花烟进行抗病性鉴定分析。结果表明,不同抗性品种对不同生理小种的抗性反应差异显著,根据接种后不同烟草品种的形成的病斑直径,将其划分为4个等级：高抗、中抗、中感、高感。辽烟15,G28对于烟草野火病菌0,1号生理小种均表现为高感,而云南省大面积栽培的K326、红花大金元、云烟87等对于两个生理小种均表现为中感,而两个野生种黄花烟和长花烟均表现为高抗,可以作为烟草野火病抗性育种优先利用的种质资源。     

弱光胁迫对不同烤烟品种生理效应的影响*

 利用不同规格（遮光率约35%和65%）生产用遮阳网,以人工控光研究了弱光胁迫对云烟87,K326,红花大金元烤烟生育期生理效应的影响。结果表明：3个品种烤烟在弱光胁迫下,叶绿素含量较对照有明显增加;红大和云烟87丙二醛（MDA）含量较对照有明显减少,成熟期增势缓慢;红大和云烟87在弱光胁迫下脯氨酸（Pro）含量与多酚氧化酶（PPO）活性随处理时间的延长开始显著上升并明显高于对照,并且遮光率越高,上升速度越快。     

球孢白僵菌孢子悬乳剂及其混配剂在甘蓝叶面的残留分析*

 采用生化检测法（酶快速检测）和生物检测法（敏感家蝇检测）检测分析了球孢白僵菌孢子悬乳剂、孢子悬乳剂与1%（W/V）10%吡虫啉可湿性粉剂混配剂（EM1）、孢子悬乳剂与3%（W/V）10%吡虫啉可湿性粉剂混配剂（EM2）、10%吡虫啉可湿性粉剂、2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威在田间甘蓝叶片上的残留。抑制率检测结果表明,纯菌剂处理后的抑制率低于2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威化学农药的抑制率。敏感家蝇法检测结果表明,纯菌剂、混配剂I(EM1)饲喂后家蝇幼虫的累积死亡率之间无显著差异,但2.5％高效氯氟氰菊酯乳油、20%灭多威乳油、50%抗蚜威、3%(W/V)吡虫啉(10%可湿性粉剂)、混配剂II(EM2)饲喂后家蝇的累积死亡率则略高于其纯菌剂。因此,在菌药混用中,低剂量药剂的加入对残留的影响不明显,而高剂量的化学农药的加入则会引起残留的出现。由此表明,球孢白僵菌孢子乳悬剂及其与低剂量的吡虫啉混配剂在蔬菜上无残留现象存在,符合无公害蔬菜生产的要求。     

3种昆虫对蔬菜农药残留的敏感性对比试验*

 试验采用生物检测法,对3种昆虫在生菜中,对3类农药常规用药浓度下的敏感性做了比较和跟踪试验。试验结果表明,不同的昆虫种类对不同农药品种的敏感性不同,并且,综合评价3种昆虫的试验认为,黄粉虫幼虫更适于蔬菜农药残留的检测和上市蔬菜的安全性监督。     

农业有机废弃物对废水中Cr 6+吸附效果的研究*

 针对电镀、皮革等工业造成的重金属Cr ⁶⁺污染,而大量农业有机废弃物（如秸秆等）没有得到充分利用的严峻现实,研究了生物质种类、改性等条件对Cr ⁶⁺吸附效果的影响。结果表明,不同生物质的吸附效果为：花生壳>玉米芯>麦壳>玉米秆;活化后生物质吸附Cr⁶⁺的能力显著提高,其中麦壳的活化效果最好,Cr ⁶⁺脱除率可增加10 %;随着Cr⁶⁺废水溶液pH值的升高,生物质对Cr ⁶⁺的吸附率降低。废水溶液中Cr ⁶⁺浓度对吸附率具有明显的影响,当浓度为30 μg/mL时Cr ⁶⁺吸附率达74 %以上。     

水杨酸对枇杷冷藏效果的影响*

 以“解放钟”枇杷(Eriobotrya japonica Lindl . cv . Jiefangzhong)果实为试材,研究了水杨酸处理对冷藏(1～5℃)枇杷果实品质及腐烂率的影响。结果表明,采用0.3g/L 水杨酸（SA）浸果20min 处理,可延缓可溶性固形物和可滴定酸含量的下降,抑制果心褐变,降低果实腐烂率的发生,从而延长果实贮藏期。而经0.5g/L SA处理后果实可溶性固形物和可滴定酸含量的下降较快且对果实产生伤害,果实腐烂加重。     

4种植物对大灰食蚜蝇生长发育及行为的影响*

 通过以甘蓝、苤兰、青花、油菜植物上的甘蓝蚜喂食大灰食蚜蝇幼虫,研究了这4种十字花科植物次生物质对大灰食蚜蝇生物学习性的影响,结果表明产生的差异是明显的。幼虫历期最短的和最长的是青花与油菜,为9.5d和11.06d。蛹期最短和最长的是甘蓝和油菜,为8.81d和9.68d。蛹重以苤兰的处理最轻,为26.46mg。产卵期以甘蓝和油菜最短,分别为10d和10.5d。产卵量以青花的处理为少,为214.6粒,甘蓝最多,达364.4粒。而成虫寿命、产卵前期、卵孵化率差异都不显著。大灰食蚜蝇幼虫可以取食死亡的甘蓝蚜。对高温致死的取食量是8.3~10.5头,低温致死的是8.3~12.7头,机械致死的为19.7~22.7头。带蚜植物与涂抹蚜虫体液植物均能使其产卵,而无蚜植物则不会产卵。     

二氧化氯对烟草漂浮育苗剪叶刀具的消毒作用研究*

 对二氧化氯在烟草漂浮育苗中剪叶工具的消毒效果进行了研究。结果表明用16%二氧化氯200~1600倍液浸泡污染了TMV的剪刀,均能有效控制TMV的传播;其中16%绿先锋牌二氧化氯800倍液浸泡消毒10s即可有效防止TMV的传播,相对防效可达98%以上。研究结果可供烤烟等漂浮育苗生产中对剪叶工具进行消毒,以防止病毒病的传播蔓延。     

云南贯众提取物驱猪蛔虫效果研究及对猪主要生化指标的影响*

 为猪蛔虫(Ascaris suum)病的防治提供无毒、无残留,对人体无害的高效防治方法,利用云南贯众(Cyrtomium yunnanense)分离得到的化合物山奈酚 3-ａ-L-（4-O-乙酰基）鼠李糖基-7-ａ-L-鼠李糖苷（化合物A）作为试验用药,对感染猪蛔虫的动物进行了药效试验研究。选用15头长白仔猪作为试验对象,试验分A（对照组）,B,C,D,E 5个组,每组3头。根据试验效果可选用0.3mg/kg BW作为化合物A驱除猪蛔虫的推荐使用剂量。试验中通过粪检虫卵计数表明,每克粪便中猪蛔虫虫卵数从用药前的100%下降至35.83%,虫卵数下降了64.17%,每克粪便中虫卵数与用药前相比存在差异显著性（P<0.05）。另外,试验中所检测的血液生化指标在给药前后均没有出现显著性的变化、差异无显著性(P>0.05)。从而可初步推断化合物A对猪的肝脏、肾脏、心脏和肌肉等组织器官没有产生明显的影响。云南贯众提取物化合物A对猪蛔虫病有较好的驱虫效果,且毒副作用小,有望开发成为一种新的驱蛔虫药。     

烤烟调制过程中微波处理对烟草特有亚硝胺含量的影响*

 研究了烤烟调制初期及变黄过程中,微波处理对烟草特有亚硝胺(TSNA)、硝酸盐、亚硝酸盐及其它含氮化合物的影响。结果表明:在烤烟调制初期和变黄过程中用频率为2450MHz的微波对烟叶进行适当处理均能降低TSNA的含量。其中以在烟叶完成变黄后进行微波处理90s最为明显,总体来说,在烟叶变黄后对烟叶进行微波处理效果优于对鲜烟叶进行处理,然而微波处理对总氮、蛋白质等含氮化合物影响不很明显。