关于提高“氯霉素注射液”微生物检定法中抑菌圈边缘清晰度的探讨

以藤黄八叠球菌（２８００１）为试验菌，在原菌层培养基配方中增加０．０５％ＶＢ_１或１％葡萄糖，ｐＨ６．５－６．６，可获得边缘清晰的抑菌圈；另改用短小芽胞杆菌（６３２０２）为试验菌、培养基Ⅱ、ｐＨ７．８－８．０或用藤黄八叠球菌诱变后的菌株为试验菌，均可获得无双圈的抑菌圈，所得测定结果在统计学上无显著差异。     

酒石酸泰乐菌素效价测定方法的探讨

酒石酸泰乐菌素是一种用途广泛的大环内酯类兽用抗生素,主要用于防治畜禽细菌和支原体感染。其含量测定方法《农业部兽药质量标准》规定为微生物效价测定法,使用藤黄八叠球菌（28001）菌种、培养基1（PH6．0～6．5）、PH6．0磷酸盐缓冲液为稀释液。此法结果导致抑菌圈边缘不清晰,含量测定误差较大。本文采用培养基E（pH7．8～8．0）、pH7·8磷酸盐缓冲液为稀释液,收到较满意的结果。仪器：ZY—300A型抑菌圈电脑测量分析仪、钢管放置器、恒温培养箱、玻璃双碟、牛津杯、A—2005电子天平等。试药：泰乐菌素标准品（中国兽药监察所提…     

抗生素效价测定中最佳菌液浓度的选择

抗生素效价测定——管碟法是我国兽药典规定的方法，也是国际通用方法。管碟法是利用抗生素在摊布特定试验菌的琼脂培养基内进行球型立体扩散，抑制了试验菌的繁殖，通过半透明的琼脂培养基，可观察到清晰的抑菌圈。依据药典，从抑菌圈直径的大小可直接计算出抗生素的准确浓度。所以，抗生素效价测定时一定要选择适宜的苗液浓度使抑菌目的大小在药典规定的范围内，这样便需做一个预测试验，具体方法如下：1取事选制备好的试验菌悬液的一部分，用液体培养基稀释成各种不同稀释度（可按原菌液的浓度而定）：2取装有20ml苗层培养基的试管几支在…     

磷霉素钙生物效价检定法的改进

磷霉素钙生物效价测定，原标准以藤黄微球菌[CMCC（B）28001]为实验检定菌，测定时抑菌圈边缘不清晰，影响含量测定，改用大肠杆菌[CMCC（B）44103]为实验菌，经试验证明效果比较理想。     

鸡血藤不同极性段提取物制备及体外抑菌作用初步研究

采用水、丙酮和乙醇等不同极性溶剂对鸡血藤有效成分进行提取,测定了鸡血藤不同极性段提取物对鸡大肠埃希菌、鸭大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌等常见病原菌的体外抑菌效果。结果表明,鸡血藤的各种提取物对鸡大肠埃希菌的抑菌圈直径均小于13 mm,属低度敏感;对鸭大肠埃希菌有较好的抑制作用,属中度敏感,其抑菌圈直径大于13 mm,小于19 mm;对金黄色葡萄球菌为高度敏感,其抑菌圈直径在19 mm以上。鸡血藤微波提取物对鸡大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,700 mL/L乙醇提取物对鸭大肠埃希菌的抑菌作用最强,最小抑菌浓度均为15.63 mg/mL。     

活体动物中大环内脂类残留检测微生物抑制法的建立

[目的]建立活体动物中大环内酯类残留的检测方法。[方法]采用微生物抑制方法,对藤黄微球菌CMCC 28001的选择性和特异性、样品提取方法、平板制备条件、方法检出限等技术参数进行研究。[结果]建立的方法可用于活体动物中红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、林可霉素、吉他霉素和克林霉素等6种大环内脂类药物的残留检测。当菌悬液添加浓度为10~(-3)倍稀释液(5.5×106CFU/m L)以及培养基PH值为7.5且培养温度为30℃时,可产生直径最大,边缘光滑、完整、清晰的抑菌圈。[结论]该方法具有良好的敏感性和重复性,成本低,操作简便,是色谱分析、免疫分析等其它方法的有益补充。     

鼠李糖乳杆菌对三种细菌生长的抑制作用

为了研究鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的抑菌作用,试验采用牛津杯法检测了鼠李糖乳杆菌与三种细菌共培养的细菌数、抑菌圈直径,并测定了细菌生长曲线。结果表明:共培养后三种细菌的数量均显著低于对照组(P0.05);鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液与三种细菌共培养后,细菌对数生长期明显滞后或未出现对数生长期;鼠李糖乳杆菌发酵上清液和全菌裂解液对三种细菌的抑菌圈直径均显著大于对照组(P0.05),全菌裂解液对大肠杆菌和产气荚膜梭菌的抑菌圈直径显著大于上清液(P0.05)。说明鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌的生长具有明显的抑制作用,其中对产气荚膜梭菌的抑制效果最强,全菌裂解液的抑菌效果优于上清液。     

防霉剂杀菌效力的判定及其综合评价

为保证饲料厂家用好优质饲料防霉剂,以减少饲料发霉,本文着重阐述了优选防霉剂的方法、优缺点和应该注意的问题,为饲料厂家科学运用防霉剂提供参考。1　杯碟法———测定最大抑菌圈直径本法采用杯碟中加入一定剂量防霉剂液,在琼脂平板上扩散,根据抑菌圈直径大小来定量测定其防霉效果。方法是将一定规格的不锈钢牛津杯(10×10ｃｍ、08×10ｃｍ),轻轻垂直置于上层带定量规定试验菌琼脂平板上,杯中加入一定剂量的被测防霉剂配制液,小心平置于培养箱(28±1℃)中培养2～3ｄ,在菌体生长的同时,防霉剂液均匀扩散到琼脂平板上,抑制杯周围的菌孢子生…     

恩拉霉素微生物检定法的研究

以枯草芽孢杆菌为检定菌,检定培养基Ⅰ号为试验用培养基,采用双碟法进行恩拉霉素样品测定。通过浸提溶液组成、浸提时间、检定菌浓度考察,优化了检定条件。在此基础上,确立了恩拉霉素浓度的对数值与抑菌圈直径的线性范围,并对所建立的微生物检定法进行准确度、最小检出限等考察。结果表明,采用丙酮浸提液B、浸提恩拉霉素样品80 min,恩拉霉素浸提较完全。在检定菌浓度10⁶ 个/mL的条件下,恩拉霉素浓度在0.56~35.79 U/mL之间,其浓度的对数值与相应的抑菌圈直径呈直线相关,相关系数r为0.9960。将建立的恩拉霉素微生物检定法用于恩拉霉素样品测定,回收率为95.90%,相对标准偏差(RSD)为1.95%。本方法可用于含恩拉霉素的样品测定。     

饲料防霉剂杀菌效力的判定及其综合评价

１杯碟法———测定最大抑菌圈直径该方法采用杯碟中加入一定剂量防霉剂液在琼脂平板上扩散，根据抑菌圈直径大小来定量测定其防霉效果。先将一定规格的不锈钢牛津杯（１０ｃｍ×１０ｃｍ，０．８ｃｍ×１．０ｃｍ）轻轻垂直置于上层带定量规定试验菌琼脂平板上，杯中...     

不同中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌试验

为研究中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的抑制效果,采用纸片法对自拟的6个中药复方进行敏感性试验,并用试管二倍法测定中药复方的最小抑菌浓度。结果表明,6个中药复方均具有不同程度的抑菌作用,其中复方4对大肠杆菌的抑菌效果较好,平均抑菌圈直径为21.2 mm,平均MIC值为62.5 mg/mL;复方1对沙门氏菌效果较好,平均抑菌圈直径为19.8 mm,平均MIC值为41.7 mg/mL;复方3对多杀性巴氏杆菌效果较好,平均抑菌圈直径为23.3 mm,平均MIC值为3.92 mg/mL,3个复方均呈高度敏感。表明中药复方可以用于鸡细菌性腹泻的防治。     

盐酸头孢噻呋乳房注入剂无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋乳房注入剂的无菌检查方法,本试验按照《中华人民共和国兽药典》2015年版一部附录1101无菌检查法中方法适用性试验的有关要求,对取样量、稀释液种类、冲洗方式、加酶量等进行了考察。取供试品置于无菌分液漏斗中,加300 mL无菌十四烷酸异丙酯,摇匀,再加200 mL含1%聚山梨酯80的0.1%无菌蛋白胨溶液,充分振摇,静置,取水层,按照薄膜过滤法处理,用pH 7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液为冲洗液,每张滤膜每次冲洗量为100 mL,冲洗4次,每管培养基中加入600万单位的青霉素酶溶液。结果显示,方法适用性试验中,供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,供试品组、阴性对照组均无菌生长,说明供试品的检验量在该检验条件下已消除其抑菌作用。盐酸头孢噻呋具有较强的抑菌活性,本试验采用薄膜过滤法,建立了合理的无菌检查方法,能有效去除盐酸头孢噻呋乳房注入剂中的抑菌成分,使检验结果更准确、可靠,可作为该制剂的常规无菌检查方法。     

鸡源致病性大肠杆菌药物耐受性与药物剂量相关性的研究

利用从山东省15个地区分离纯化并鉴定了的47株对庆大霉素、硫酸丁胺卡那霉素、氯霉素等药物中的一种或几种耐药的大肠杆菌菌株,进行了对这几种药物不同剂量耐药性的研究,以探讨大肠杆菌的药物耐受性与药物剂量的相关性,结果表明大多数没有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度呈正相关;大部分已有耐药性的菌株,抑菌圈直径与药物浓度无相关性。     

武夷岩茶茶多酚抑菌作用的研究

用纸片法测定了1.0、2.5、5.0、10mg/mL 4种浓度的武夷岩茶茶多酚对大肠杆菌、致病性大肠杆菌、李斯特氏沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等4种菌的抑菌效果。实验结果表明,茶多酚对4种菌均有明显的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（P〈0.01）,4种浓度的抑菌圈分别为1.82±0.44～3.34±0.18（cm）;对李斯特氏沙门氏菌、大肠杆菌、致病性大肠杆菌的抑菌作用次之,抑菌圈分别为1.73±0.18～2.05±0.14（cm）;1.46±0.33～1.85±0.32（cm）;1.1±0.14～1.61±0.25（cm）。1mg/mL的茶多酚对4种菌的抑菌作用均小于同剂量的青霉素和庆大霉素（P〈0.01）。     

壳聚糖对5种细菌体外的抑制试验

为开发利用壳聚糖,选择两种不同性质壳聚糖进行体外抑菌试验。将白色壳聚糖(Ⅰ组)和褐色壳聚糖(Ⅱ组)的乙酸溶液、褐色壳聚糖水溶液(Ⅲ组)用无菌蒸馏水分别稀释至10,5,2.5,1.25 g/L和0.625 g/L,用相应稀释度乙酸溶液(Ⅳ组)作对照组。对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、绿脓杆菌、鸡伤寒沙门菌进行体外抑菌试验。结果表明,在体外,壳聚糖对上述5种细菌的生长均有不同程度的抑制作用,不同性质的壳聚糖和同一性质不同浓度的壳聚糖抑菌效果不同。     

盐酸头孢噻呋无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋无菌原料的无菌检查方法，本试验按照方法适用性试验的有关要求，对前处理、冲洗总量等进行了考察。取供试品500mg，加10mL2.6%无菌碳酸钠溶液使溶解，再转移至490mL0.85%无菌氯化钠溶液中，作为供试液按照薄膜过滤法处理，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液为冲洗液，每张滤膜每次冲洗量为100mL，冲洗5次。结果显示，方法适用性试验中，供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好，供试品组、阴性对照组均无菌生长，说明供试品在该条件下已消除其抑菌作用，方法合理，结果准确、可靠，可作常规无菌检查法。     

鲤鱼源粪肠球菌的体外抑菌试验研究

为证明益生菌候选菌株具有益生特性,将筛选的鲤鱼源粪肠球菌YL-1进行体外抑菌试验。结果发现,YL-1对病原菌嗜水气单胞菌有较强的抑菌作用;通过对YL-1上清液进行热处理,蛋白酶处理,中和酸等方式分析发现,其抑菌物质主要是对有机酸和胰蛋白酶敏感的一类物质。     

Predictive model for the detection of pulmonary hypertension in dogs with myxomatous mitral valve disease

Pulmonary hypertension (PH) often occurs due to a left heart disease, such as myxomatous mitral valve disease (MMVD), in dogs and is diagnosed using Doppler echocardiography and estimated pulmonary arterial pressure. Diagnosis of PH in dogs requires expertise in echocardiography: however, the examination for PH is difficult to perform in a clinical setting. Thus, simple and reliable methods are required for the diagnosis of PH in dogs. The purpose of this study was to develop models using multiple logistic regression analysis to detect PH due to left heart disease in dogs with MMVD without echocardiography. The medical records of dogs with MMVD were retrospectively reviewed, and 81 dogs were included in this study and classified into PH and non-PH groups. Bivariate analysis was performed to compare all parameters between the groups, and variables with P values of <0.25 in bivariate analysis were included in multiple logistic regression analysis to develop models for the detection of PH. In multiple logistic regression analysis, the model included a vertebral heart scale short axis of >5.2 v, and a length of sternal contact of >3.3 v was considered suitable for the detection of PH. The predictive accuracy of this model (85.9%) was judged statistically adequate, and therefore, this model may be useful to screen for PH due to left heart disease in dogs with MMVD without echocardiography.     

猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测

随机选取本实验室内的8名化验员,分别测定猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留量,通过对结果数据的分析,得出本实验室测定结果的准确程度。通过磷酸盐缓冲溶液提取猪肉组织中的氟喹诺酮类药物残留,经C18柱净化后,用高效液相色谱法测定含量。环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的平均回收率（%）分别为：95.6、86.9、89.3和95.6,批内变异系数均≤14%,批间变异系数均≤6%。结果数据满足标准要求,证明本实验室能准确开展此项检测活动。     

恩拉霉素生物检测方法的改进

试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×10⁷个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。