Al_2O_3-脱乙酰几丁质作为酶固定化载体的研究

Al2O3作核心的脱乙酰几丁质颗粒可用作酶固定化的载体。观察了脱乙酰几丁质的浓度、脱乙酰度和分子量对酶的固定化的影响。发现以浓度为2．0％、脱乙酰度为85．0％、分子量为1．34×106d的脱乙酰几丁质制得的载体用于固定化酶效果最好。所得固定化GOD具有较高的固定化酶活力、热稳定性和工作稳定性。     

哺乳动物几丁质酶的研究进展

几丁质是一种在自然界广泛存在的天然多糖,是许多动物、真菌和微生物的重要组成成分。当含有几丁质成分的病原体进入动物体内,会刺激动物产生几丁质酶来清除病原体。通过动物机体内几丁质酶的生理生化反应将几丁质水解为N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）低聚物,甚至单体N-乙酰葡糖胺,失去致病性。该文主要介绍几丁质进入哺乳动物体内的方式及哺乳动物几丁质酶的作用,为防治含有几丁质成分的病原体侵袭哺乳动物产生的疾病研究提供思路及方向。     

新型饲料添加剂-壳聚糖

壳聚糖 (Ｃｈｉｔｏｓａｎ)又名可溶性甲壳素、甲壳胺 ,是甲壳素有效成分之一 ,该物质是甲壳素脱乙酰后的产物 ,化学名称是 β (1,4 ) 2 脱氧 Ｄ 葡萄糖。甲壳素 (Ｃｈｉｔｉｎ) ,亦称几丁质、甲壳质、壳多糖 ,于 1881年由法国学者布拉克诺发现 ,是自然界中产量仅次于纤维     

几丁质、几丁聚糖与肿瘤

甲壳质、甲壳素ｃｈｉｔｉｎ，又名几丁质，化学成分为乙酰基葡萄糖胺，是六碳糖聚合体，聚合量１０００～３０００个，相对分子量Ｍｒ１００万以上。几丁聚糖（ｃｈｉｔｏｓａｎ）是甲壳质在８０～１２０℃温度下经强碱长时间作用，脱去乙酰基，由乙酰葡萄糖胺转变为葡萄...     

壳聚糖抗微生物活性的影响因素及其作用机制

壳聚糖是几丁质的脱乙酰化形式,是一种可从甲壳纲、昆虫和真菌中获得的生物聚合物,具有良好的物理化学特性以及众多的生物活性,并显示出对不同真菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗菌活性。壳聚糖与微生物表面阴离子之间的静电相互作用是决定壳聚糖抗真菌和细菌微生物活性的重要因素,但是受微生物类型、壳聚糖的分子质量和脱乙酰度等影响。根据抗真菌和细菌的特性,将壳聚糖通过饲料添加剂或凝胶注射等方式用于动物生产,其在提高动物生产性能和免疫性能以及在疾病治疗等方面都有很大应用潜力。本文主要综述了壳聚糖最新的抗微生物活性作用机制和影响因素,为壳聚糖在动物生产上的应用提供理论基础。     

绿色饲料添加剂——壳聚糖

壳聚糖(Chitosan)又称可溶性甲壳素、甲壳胺，该物质是甲壳素的有效成分之一，是甲壳素脱乙酰后的产物。甲壳素(Chitin)又名甲壳质、几丁质、壳多糖、明角质，于1881年法国学者布拉克诺首次从菌类提取出来，是自然界产量仅次于纤维素的天然产物，广泛存在于低等动物尤其是节肢动物(如真菌、     

绿色饲料添加剂——壳聚糖

壳聚糖(Chitosan)又称可溶性甲壳素、甲壳胺,该物质是甲壳素的有效成分之一,是甲壳素脱乙酰后的产物。甲壳素(Chitin)又名甲壳质、几丁质、壳多糖、明角质,于1881年法国学者布拉克诺首次从菌类提取出来,是自然界产量仅次于纤维素的天然产物,广泛存在于低等动物尤其是节肢动物(如真菌、藻类等)的细胞壁中。甲壳素属于氨基多糖,化学名称是1,4-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖,化学结构与纤维素相似,其部分或全部脱乙酰基产物成为壳聚糖,是天然多糖中少见的带正电荷的高分子物质。由于它具有特殊的理化性质和生物活性,对其研究及开发已涉及到…     

不同脱乙酰度壳聚糖对肉仔鸡生长性能与免疫功能的影响

通过在日粮中添加不同脱乙酰度壳聚糖研究其对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响。试验结果表明:1～21日龄,添加壳聚糖各组对肉仔鸡日增重均有不同程度的抑制作用,但差异不显著;22～49日龄中添加脱乙酰度95.3%壳聚糖,具有一定的促生长作用。在肉仔鸡生长全期添加不同脱乙酰度的壳聚糖对肉仔鸡生长性能无显著影响。21日龄时脱乙酰度86.2%壳聚糖组T淋巴细胞比率显著高于对照组,而其他壳聚糖组与对照组相比,差异不显著;添加壳聚糖有助于提高肉仔鸡新城疫HI抗体水平的趋势,但差异不显著。     

鱼康素在水产养殖中的应用

鱼康素主要成分是 N－脱乙酰－ D－聚糖胺，它利用高新技术手段从动物中提取的甲壳素 (几丁质， Chitin)经活性化处理后与稀土元素的复合物。甲壳素是天然多糖类高分子化合物，其化学结构与纤维素相似，结晶性强，溶解性很差，化学性质不活泼，经脱乙酰处理后产生大量活性基团，其溶解和反应性能都大为改善。甲壳素在自然界中分布甚广，存在于虾、蟹的外壳，蚕蛹表皮以及真菌细胞壁中，在地球上作为天然有机高聚物其蕴藏量仅次于纤维素。自本世纪 60年代以来，人们对甲壳素进行了深入研究，已广泛应用于癌症、心脑血管疾病、人造皮肤等的…     

壳聚糖--新型饲料添加剂

壳聚糖又名可溶性甲壳素、甲壳胺,是甲壳素有效成份之一,该物质是甲壳素脱乙酰后的产物,化学名称是β-(1,4)-2-脱氧-D-葡萄糖。甲壳素,亦称几丁质、甲壳质、壳多糖。于1881年被法国学者布拉克发现,是自然界中产量仅次于纤维素的天然产物,广泛存在于昆虫、甲壳类动物虾、蟹等外壳及真菌细胞壁中。甲壳     

表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌微胶囊制备工艺的优化

为使重组乳酸乳球菌在发酵生产后便于存储、运输,本试验利用可表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌pAMJ399-LFBA/MG1363制备微胶囊,优化微胶囊的制备工艺条件,并对胶囊化后重组菌的相关生物学特性进行检测。通过对不同壁材及壁材浓度进行控制单一变量试验,测定其包埋量,以筛选出最佳壁材及浓度。通过模拟胃肠液环境试验,比较微胶囊释放率,并对不同壁材进行保存期试验,比较最低活菌数,利用响应面试验确定最佳工艺条件,使用最佳工艺条件制备微胶囊后进行验证。优化后的结果为:选取海藻酸钠和壳聚糖作为壁材,在海藻酸钠浓度为2.49%,壳聚糖浓度为0.96%,CaCl₂浓度为6.67%,凝固时间为57 min的条件下微胶囊效果最佳,预测包埋量为7.85×10⁸ CFU/g。微胶囊在模拟胃液中稳定存在,在模拟肠液中可完全破裂,能释放出微胶囊内95%以上的乳酸乳球菌。海藻酸钠-壳聚糖微胶囊在4 ℃保存3周后,微胶囊中活菌数为1.41×10⁷ CFU/g。对微胶囊的最佳工艺条件验证结果为微胶囊的包埋量为8.08×10⁸ CFU/g;常温保存2周后,活菌数仍可达到3.89×10⁶ CFU/g;ELISA方法检测微胶囊内重组乳酸乳球菌可见表达的牛乳铁蛋白肽,抑菌试验可见微胶囊内重组乳酸乳球菌表达的牛乳铁蛋白肽对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌仍具有明显的抑制作用。以上结果表明,表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌可制备成为低成本、保存期长、耐胃液的微胶囊,为重组乳酸菌在生产中的进一步应用奠定基础。     

海藻酸钠/壳聚糖双层合生元微胶囊制备及储藏稳定性和控制性释放

以海藻酸钠和壳聚糖为包埋剂,在其中加入低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS),对嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)进行包埋,制备海藻酸钠/壳聚糖双层合生元微胶囊,并对其制备工艺、控制性释放和储藏稳定性进行研究.结果表明:当海藻酸钠的质量浓度为2g/100mL时,微胶囊的外观、粒径和包埋率均较好;在对得到的双层微胶囊进行人工胃肠道抗逆实验,发现双层包埋的微胶囊在人工胃液中比较稳定,S.thermophilus 基本不被释放,而当双层微胶囊在人工肠液液中到150min后微胶囊已经完全崩解,乳酸菌释放完毕.通过对游离状态和双层包埋微胶囊菌体存活率进行计算,游离状态的S.thermophilus菌悬液经过冷藏,菌体存活率下降十分明显,未添加GOS的菌悬液在第13天菌体存活率仅有0.32％,而添加GOS的菌悬液活菌存活率相对较高,可以达到14.64％;但双层微胶囊在添加和未添加GOS时,菌体存活率在整个储藏期内下降幅度均较小,在第17天时,菌体存活率依然能够达到93.64％和87.98％.     

Mechanism of macrophage activation by chitin derivatives

In order to analyze the detailed mechanisms responsible for macrophage activation by chitin derivatives, resident peritoneal macrophages were prepared and stimulated with chitin, chitosan and low-molecular weight chitosan. Our findings were as follows: (i) chitosan induced apoptosis of peritoneal macrophages, but this did not occur when chitin or water soluble low-molecular weight chitosan were used; (ii) chitosan treatment induced activation markers, such as the major histocompatibility complex (MHC) class I, class II, Fc receptors, transferrin receptor, mannose receptor, Fas, and macrophage inflammatory protein (MIP)-2, whereas chitin and low molecular weight soluble chitosan induced only the expression of MHC class I and II molecules; (iii) apoptosis induced by chitosan was mediated by the Fas signaling pathway, in response to phagocytosis via the mannose receptor. We conclude that since chitosan activates macrophages, this may be the mechanism by which it accelerates wound healing.     

姬松茸多糖-嗜酸乳杆菌合生元微胶囊的研制

研究旨在制作一种可以通过单胃动物胃液的酸性环境并在肠液中释放的姬松茸多糖-嗜酸乳杆菌合生元.试验采用微胶囊法,以海藻酸钠和姬松茸多糖作为复合壁材包裹嗜酸乳杆菌,使用壳聚糖进行2次包被,测定微胶囊的包埋率、在人工胃液中的保护性及在人工肠液中的释放性,评估微胶囊的效果;使用牛津杯法测定合生元的抑菌效果.结果 显示,当海藻酸...     

壳聚糖-海藻酸钠载药微球制备工艺研究

为研究制备壳聚糖-海藻酸钠载药微球的新方法,研究采用D相乳化法,结合微乳及胶体制备技术,以硫酸小檗碱为模型药物,以药物包封率为评价指标,应用单因素试验考察了氯化钙溶液浓度、海藻酸钠溶液浓度、壳聚糖溶液浓度,以及初次凝胶时间对微球性能的影响。应用响应面法筛选优化了载药微球的制备工艺。结果表明,在微球制备及药物包封率的影响因素中,海藻酸钠溶液浓度、氯化钙溶液浓度对评价指标的影响最大,其次是壳聚糖溶液浓度和初次凝胶时间,筛选优化的载药微球生产工艺条件为海藻酸钠溶液浓度1.57%,氯化钙溶液浓度2.13%,壳聚糖溶液浓度0.86%,初次凝胶时间30.71min,该条件下制备微球的平均粒径为329nm,药物包封率94.09%。验证试验证实,本工艺可制备优良的硫酸小檗碱壳聚糖-海藻酸钠微球,且制备工艺简便,生产效率高,本技术为微球制剂的产业化生产奠定了一定基础。     

植物乳杆菌-泰山松花粉多糖微胶囊对小鼠生长和肠道环境的影响

植物乳杆菌作为微生态饲料添加剂饲喂后易受消化道胃酸、胆汁酸和消化酶等不利因素的影响。泰山松花粉多糖(TPPPS)作为一种水溶性植物多糖也易受到胃酸和酶的破坏。为了保护植物乳杆菌和TPPPS的生物活性,并探索二者之间是否存在协同作用。本研究以植物乳杆菌和TPPPS为芯材制备微胶囊,通过正交试验对包埋工艺进行优化,并对最佳条件下制备的微胶囊进行性能检测。选取体重20 g左右无特定病原体(SPF)小鼠48只,随机分为4组,每组12只。4组小鼠每天分别口服饲喂1 m L的植物乳杆菌、植物乳杆菌+0.5%TPPPS、微胶囊、磷酸盐缓冲液(PBS)。饲养试验42 d。每隔1周各组随机取3只小鼠称重记录,剖检后无菌采集肠道组织,测定小肠绒毛和隐窝发育差异及乳酸菌和大肠杆菌定植情况。结果显示:1)微胶囊包埋率达81.6%,粒径为84.3μm。在模拟胃液中处理120 min植物乳杆菌存活率为62.36%,37℃条件下存储120 d存活率达45.9%。2)与PBS组相比,植物乳杆菌、植物乳杆菌+0.5%TPPPS、微胶囊均能不同程度促进小鼠体重增加,提高小肠中乳酸菌数量,降低大肠杆菌数量,改善小肠绒毛和隐窝发育,微胶囊效果最优。结果提示,植物乳杆菌协同TPPPS使用的益生效果显著优于单独的植物乳杆菌,二者制备的微胶囊能够进一步提高其益生效果。     

苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

本试验采用苦马豆素（swainsonine,SW）人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1：25 600,诱生腹水效价为1：80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和力解离常数为1.14×10¹⁰,腹水抗体纯化后纯度可达98%,回收率80%,SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50 ku,Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128 μg/mL（R²=0.9969）,与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。     

Preparation and Identification of Monoclonal Antibody Against Swainsonine

In this test,BALB/c mice were immunized by SW-OVA for the preparation of monoclonal antibody against swainsonine (SW). Hybridoma cells that could secrete specific antibody against SW were prepared by hybridoma technique,and then the strain that secreted monoclonal antibody against SW designated 1F10 was prepared,and the chromosome average number of 1F10 cell was 45 to 50 couples. The ELISA titers of cell supernatant were 1:25 600, and that of ascites were 1:80 000.The subclasses of monoclonal antibody was IgG1,and the affinity constant was 1.14×10¹⁰,the purity of ascites antibodies was up to 98%,and the recovery rate was 80%.The result of sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis proved that purified antibody had been obtained that the molecular weight of H-chain and L-chain of antibody was about 50 and 25 ku. The monoclonal antibody against SW specifically bound to SW determined by Western blotting. The linear range was 4 to 128 μg/mL (R²=0.9969) and no cross-reactivity was detected with BSA,gelatin,polylysine,me-Gal,etc. The result laid the foundation for immunodetection on SW and immunological prevention of animal toxic disease.     

羊和猪胎盘肽的提取

利用超滤法从羊和猪的胎盘中提取胎盘肽,用改良的加脲Tricine-SDS-PAGE电泳法对其进行初步定性鉴定。成功分离显示出了羊的胎盘肽,其分子质量小于5 ku,与人胎盘肽的分子质量范围完全符合。猪的6 ku的蛋白带很明显,但低于5 ku的蛋白带不是很明显。     

Preparation of Pectin/Chitosan Synbiotic Microcapsules and Its Study on Simulated Gastrointestinal Environments and Storage Stability

Pediococcus acidilactici and inulin were used as wall cores,with pectin and chitosan as the shell material.The conditions of microencapsulation were optimized by analyzing the embedding rate,particle morphology,the mechanical strength,gastrointestinal tolerance in vitro and storage performance.The experimental group was divided into three groups:Free Pediococcus acidilactici group (PA),microcapsule group made by embedding Pediococcus acidilactici alone (PC(PA)MCs),synbiotic microcapsule group made by embedding inulin and Pediococcus acidilactici (PC(PA-I)MCs).The results showed that the appearance,particle size,mechanical strength and embedding rate of microcapsules were better when the mass concentration of pectin was 5 g/100 mL,the content of inulin was 25 mg/mL and the mass concentration of chitosan was 0.8 g/100 mL.Through the gastrointestinal tolerance test in vitro, it was found that PC(PA-I)MCs group was relatively stable in the artificial gastric juice in vitro (P<0.05).At the same time,it began to release rapidly in the artificial intestinal fluid in vitro at 30 min and it was almost completely disintegrated after 2 h.It was found that the cell survival rate of PA group decreased significantly at cold and room temperature through the storage test for 4 weeks.While the cell survival rate of PC(PA-I)MCs group decreased slightly.And the cell survival rate of PC(PA-I)MCs group was higher than that of PC(PA)MCs group (P>0.05).At room temperature,the cell survival rate of PC(PA-I)MCs group was higher than that of PC(PA)MCs group (P>0.05).In summary,pectin/chitosan microcapsules with inulin as probiotics had a better embedding effect on Pediococcus acidilactici.