正交试验优化银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累

采用正交试验研究了基本培养基、NAA、6-BA、植酸(PA)4因素各3水平对银杏胚愈伤组织继代培养及黄酮积累的影响,并测定了愈伤组织生长曲线.结果表明:银杏胚愈伤组织继代培养的最佳组合是N6+NAA 3.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+0.1%PA,各因子影响程度为基本培养基＞NAA＞6-BA＞PA;愈伤组织黄酮积累量最佳组合是B5+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5mg/L+0.05%PA,各因子影响程度为NAA＞PA＞6-BA＞基本培养基.愈伤组织生长曲线基本呈"S"型,黄酮积累的适宜培养周期为40～50 d.     

银杏成熟胚乳愈伤组织的诱导研究

以银杏成熟胚乳为外植体,在附加不同激素的的培养基上进行愈伤组织的诱导,筛选出诱导愈伤组织的最佳激素组合培养基,即MS+2 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,获得绿色、紧密的愈伤组织.     

影响洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的因素研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为外植体,研究了蔗糖浓度、暗处理及取材时间对洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响,以期优化胚性愈伤组织的形成条件,为转基因提供良好受体并为建立高频再生体系奠定基础.结果表明:40 g/L蔗糖及光培养最适合愈伤组织的诱导;50 g/L蔗糖及暗培养最适合胚性愈伤组织的诱导,最适宜的取材时间为45 d.     

不同培养基及糖浓度对丰花月季叶愈伤组织诱导的影响

以丰花月季叶片为材料,在MS,B5,White,WPM4种基本培养基和在合不同糖浓度为0、30、60、90g/L的MS培养基上,进行愈伤组织的诱导.结果表明:4种培养基中,MS培养基的诱导率最高,4种糖浓度中,以糖浓度为30g/L的诱导率最高.最佳培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA 0.1 m/L+糖30g/L+琼脂7.5 g/L.     

培养基成分对葡萄愈伤组织生长和白藜芦醇含量的影响

以巨峰葡萄果皮愈伤组织为试材,利用不同成分的B5继代培养基对其进行诱导,测定愈伤组织生长量及白藜芦醇含量。结果表明:5%蔗糖有利于愈伤组织的生长及白藜芦醇含量的积累;NO3-/NH4+比例过高或过低均不利于愈伤组织的生长及白藜芦醇含量的积累,二者比例为2∶1时效果最佳;添加5 mg/L NAA与0.7 mg/L6-BA有利于愈伤组织的生长及白藜芦醇含量的积累。在最适宜培养基条件下,愈伤组织的生长量为56.12 g/L,白藜芦醇为464.520μg/g,白藜芦醇总含量为23.312 mg/L。白藜芦醇的含量和产量分别是对照的2.6倍和2.9倍。     

西洋胚轴愈伤组织诱导培养条件研究

以汉中西洋参萌胚种子为试材,研究了不同培养条件对西洋参胚轴外植体脱分化愈伤诱导的效果.结果表明:不同培养条件下西洋参胚轴外植体脱分化启动与愈伤组织诱导效果存在明显差异(P＜0.01);西洋参胚轴外植体的愈伤组织诱导存在“集体式”快速脱分化与“个体式”逐步积累脱分化2种基本方式.当培养条件为MS+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 2.0mg/L+6-BA1.0 mg/L,西洋参胚轴外植体脱分化诱导愈伤组织效果相对最佳.     

南方红豆杉愈伤组织的诱导、生长及培养条件的研究

在以2,4-D 0～8 mg/L、KT浓度为0～2 mg/L的不同激素组合的MS培养基上培养南方红豆杉的茎外植体,发现随2,4-D浓度的升高,愈伤组织的诱导率升高;随KT浓度的增加,诱导率升高,但超过一定浓度便会抑制生长。愈伤组织诱导的最佳激素组合为2,4-D 8 mg/L+KT 1 mg/L。试验还研究不同外植体、不同采集时间、不同年龄外植体的愈伤组织的诱导率,得出5月份采材最好,嫩茎比老茎好,从年龄大的植株上取材好。     

胡萝卜愈伤组织诱导培养的研究

以胡萝卜"七寸人参"为试材,探讨了不同外植体、激素、培养基、光照对胡萝卜愈伤组织诱导的影响。结果表明:胡萝卜愈伤组织的诱导以下胚轴为外植体为宜;在添加2,4-D1.0mg/L和KT 0.5mg/L的MS培养基上愈伤组织的诱导频率为100%,且愈伤组织生长良好,增殖快速;光照对愈伤组织的诱导没有影响,但却进一步阻碍了愈伤组织的增殖生长。     

桔梗胚珠培养中愈伤组织诱导培养基的优化

以桔梗未受精胚珠为试材,研究比较了不同生长素和细胞分裂素组合对其愈伤组织诱导及鲜重大小的影响,以筛选最佳诱导培养基。结果表明:诱导桔梗未受精胚珠愈伤组织形成的比较理想的培养基组合有2个,一是N6+1.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L KT,其诱导率最高,达到了100%,同时愈伤组织平均鲜重较大;二是N6+0.5mg/L NAA+0.1mg/L KT,其诱导率较高为90%,愈伤组织平均鲜重最大。     

银杏类黄酮O–甲基转移酶基因的克隆与表达分析

 采集扬州大学银杏种质资源圃不同发育时期的银杏叶片提取RNA,经简并引物PCR和5′ RACE扩增,得到了5′端包含起始密码子在内的长为876 bp的银杏类黄酮O–甲基转移酶（flavonoid O-methyl-transferase,FOMT）基因cDNA片段,命名为GbFOMT-13,其在GenBank数据库注册号为JN711433。对所得核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行BLAST比对分析和进化树分析,结果证实了GbFOMT-13为银杏的FOMT部分序列。半定量RT-PCR结果表明,GbFOMT-13表达水平在银杏叶片的不同发育时期差异很大,其表达模式表现为春季幼叶＞秋季老叶＞夏季成熟叶,与类黄酮总量增长速率变化趋势相似。     

银杏组织培养及其利用研究进展

从银杏组织培养外植体入手,重点综述了银杏茎段培养、配子体培养、胚培养、愈伤组织诱导的影响因素以及银杏组织培养中抑制褐化问题等方面的进展,对利用组织培养、遗传转化获得银杏黄酮和银杏内酯等方面也做了系统的总结,并且对进一步的工作重点提出了建议。     

提高银杏悬浮培养细胞内酯合成的研究

 对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行银杏内酯含量测定, 发现不同基因型的银杏内酯含量存在较大差异: 圆铃和金坠两个品种含量最高, 分别达0. 43%和0. 41%; 七星果品种含量最低, 为0. 13%; 金坠品种幼叶愈伤组织中银杏内酯含量最高, 为0. 0334%; 有3 个品种的幼叶愈伤组织未检测到银杏内酯。选取银杏内酯含量高、生长旺盛的愈伤组织在B5 液体培养基中进行了细胞悬浮培养,研究多种生长因子对细胞生长和银杏内酯合成的影响。结果表明, 在150 mL 培养瓶中装50 mL 培养液, 接种量为30~ 40 g/ L, 培养液初始pH 为5. 8, 3 000~ 4 000 lx 的强光照, 以30 g / L 蔗糖和15 g/ L 葡萄糖为碳源最有利于细胞生长和银杏内酯的合成。用高效液相色谱检测结果显示, 银杏圆铃品种的悬浮培养细胞中银杏内酯B 最高含量可达细胞干样质量的0. 0758%。     

银杏叶或银杏叶提取物药理作用机制的研究进展

银杏是我国传统中药,具有重要的药用价值。现对银杏叶或银杏叶提取物在心血管系统、脑及中枢神经系统、抗肿瘤方面的药理作用机制的研究进行了综述。     

银杏苗根生垂乳分泌腔的解剖结构与组织化学研究

以银杏苗木根生垂乳为试材,通过树脂半薄切片技术观察分泌腔的发生发育过程,运用组织化学方法初步研究分泌腔分泌物的主要成分。结果表明：银杏苗根生垂乳中,分泌腔主要分布在皮层中,由一层分泌细胞围绕一个圆形或椭圆形的腔道和2 ~ 3层鞘细胞构成,分泌腔直径平均为566.7 μm。分泌腔由原始细胞团细胞裂溶生而形成,原始细胞团细胞较小,细胞核大,细胞质浓。随分泌腔发育,原始细胞团中央细胞胞间层膨胀、溶解,形成胞间隙,胞间隙扩大到一定程度,中央细胞开始溶解。分泌腔随中央细胞不断溶解而扩大直至分泌细胞停止溶解,分泌腔成熟。根生垂乳顶端皮层及不定芽分生组织中有大量发育程度不同的分泌腔。根生垂乳原始细胞团具有较强的嗜锇性,核蛋白丰富,但淀粉粒较少。中央细胞溶解阶段,分泌细胞及空腔中均有嗜锇物质,空腔中还有大量蛋白质类物质及少量较小的淀粉粒。分泌腔成熟后,分泌腔中基本无蛋白质及淀粉粒,但分泌细胞与鞘细胞均呈现较强的嗜锇性。     

银杏新品种--恩银1号

‘恩银1号’是从佛手类银杏变种中经单株选择并人工授粉育成的早熟品种，种仁甜糯而香，种实椭圆形，平均10．9g，种核平均3．13g，出仁率高，抗茎腐病。     

银杏幼胚离体培养再生植株的研究

 以佛手银杏幼胚为外植体, 研究了不同大小幼胚在不同培养条件下, 愈伤组织和胚状体的诱导发育情况。结果表明: 大于3 mm的幼胚, 在MK +NAA 1.0 mg·L ^{- 1} +BA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基上胚状体诱导率最高, 达到53.6% , 最多的一块愈伤组织形成多达38个胚状体。暗培养不利于胚状体的发生。在MK培养基上添加10%椰汁对胚状体的生长发育有很好的促进作用, 有34.5%生长成苗。     

银杏实生树与嫁接树光合特性的比较

 对银杏实生树与嫁接树的光合特性及日变化进行了比较研究。结果表明：实生苗嫁接树和二次嫁接树的最大净光合速率、光饱和点和日光合产物积累量均显著高于实生树，这与嫁接提早银杏结果密切相关。嫁接后光合能力的提高与其比叶面积低，单位面积氮含量高有关；但其光合氮利用效率显著低于实生树。实生树与嫁接树光合速率和气孔导度日变化均呈“双峰”型。光合速率的“午休”与强光、高温和低湿度有关，实生树“午休”的原因主要是非气孔限制，两种嫁接树主要是气孔限制。     

银杏种实生长发育过程中胚乳淀粉体发育观察

对银杏胚乳发育过程进行连续2年的观察结果表明:1)发育成熟的银杏胚乳包括糊粉层与内胚乳2个部分,淀粉体主要积累在内胚乳细胞中,均为单粒淀粉,发育成熟的淀粉体可分为大粒和小粒2种;2)根据淀粉体的形状、大小和发育程度大致可分为淀粉体发生期、淀粉体体积与数量快速增长期、淀粉体发育成熟期3个时期;3)胚乳淀粉体的发生时期及充实部位表现出很大差异,合点端胚乳细胞中的淀粉体发生早,充实快,而珠孔端胚乳细胞中的淀粉体发生迟,充实速度慢;内胚乳外围细胞中淀粉体的充实要高于内部;颈卵器周围的胚乳细胞淀粉体的充实差。