1株草甘膦降解菌的分离鉴定及特性

为利用生物降解草甘膦修复污染土壤,以多年施用草甘膦除草剂的农田土壤为材料,采用富集培养及逐级驯化方法,对长期施用草甘膦的农田土壤中分离得到1株草甘膦高效降解菌进行了研究。结果显示:被分离出的菌株HX-5,能以草甘膦为唯一碳源和氮源生长,对草甘膦的最高耐受浓度为4g/L。形态观察及生理生化特征研究,鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)。通过单因素试验确定了HX-5菌株生长的最适温度为30℃、最适pH 7.0及无机盐培养基中添加草甘膦的最适起始浓度为1.2g/L,在此条件下培养6d,草甘膦的降解率达74.83%。     

草甘膦高抗菌株的分离、鉴定及生理生化特性研究

从采自新疆的土壤中分离到一株草甘膦抗性菌株P23,该菌株能够耐受200 mmol/L的草甘膦,可在最高含350 mmol/L草甘膦的培养基中生长。在草甘膦浓度为100～200 mmol/L之间时,菌株生长迅速,最适pH为7.0,最适生长温度为37℃,具有氨苄青霉素、卡那霉素抗性。用16S rDNA通用引物,经PCR扩增、测序得到P23的16S rDNA序列,该序列在GenBank的登录号为FJ374126。在NCBI中经BLAST后发现与苍白杆菌属(Ochrobactrum)的16S rDNA序列相似性达到99%。结合各项生理生化指标鉴定结果将菌株命名为人苍白杆菌P23（Ochrobactrum anthropi P23）。     

异菌脲降解菌YJN1-1的分离、鉴定及生长特性研究

为解决西藏土壤的异菌脲残留问题,本研究从西藏长期施用异菌脲的土壤中分离得到一株异菌脲降解菌株YJN1-1。通过形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列相似性分析,初步鉴定该菌株为苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.)。通过培养条件单因素优化实验发现,该菌生长的最适初始pH值、最适温度和最适摇床转速分别为7.0、37℃和210 rpm。本研究丰富了异菌脲降解菌微生物资源库,为微生物修复异菌脲残留问题提供了技术借鉴。     

松乳菇菌种分离及菌丝生长特性的研究

采用5种培养基配方,对2种不同颜色6个不同来源的松乳菇子实体的不同部位进行组织分离,发现分离松乳菇较好的培养基是PDA培养基,筛选出8株生长较好菌株。对菌株A1进行生长特性研究表明:菌株A1碳源利用范围广,蔗糖最好,葡萄糖次之,果糖最差;对氮源的利用,有机氮单一氮源优于复合氮源,其中尿素不能利用;无机氮源铵态氮优于硝态氮,以硫酸铵效果最好,亚硝酸盐不能利用;对盐浓度适应能力很强,在盐浓度为14g·L-1条件下也具有生长能力,适宜生长的盐浓度范围为0～6g·L-1。生长温度范围为7～37℃,适宜的生长温度是15～30℃,最佳生长温度是27℃。喜中性偏酸性环境,适宜生长的pH值为5～7,最适pH值为6 5。图2表4参7     

植物乳杆菌的分离鉴定及生长特性研究

[目的]对酱腌菜中的植物乳杆菌进行分离鉴定及生长特性研究,为人工接种发酵蔬菜储备优良菌株。[方法]通过溶钙圈试验、乳酸纸层析、API系统鉴定及在白菜汁培养基中培养测定酱腌菜中乳杆菌的生长及产酸情况。[结果]试验共分离9株乳酸杆菌,6株为植物乳杆菌,其中3株植物乳杆菌在白菜汁培养基中生长良好,14 h即达到对数末期,此时乳酸菌数均达到108cfu/ml,pH降到3.50以下。[结论]该研究为蔬菜发酵剂的制备储备了菌株。     

乳酸菌胶囊粪肠球菌的分离鉴定及生长特性观察

对引进的乳酸菌胶囊中球菌进行了分离和纯化，经形态和生理生化检测，鉴定来粪肠球菌。并对该菌的某些生长特性进行了观察，结果表明，其生长的最适培养温度为３７℃，最适ｐＨ范围为７－９，耐牛胆盐浓度为４０％。     

草甘膦抗性菌株的分离鉴定及其抗性基因的克隆

从草甘膦污染土壤中分离获得一株耐受400 mmol/L草甘膦的菌株S1536,该菌株在草甘膦浓度为100～400 mmol/L之间生长迅速,最适pH为6.0,最适生长温度为30℃,具有氨苄青霉素抗性。以S1536基因组DNA为模板,通过通用引物进行扩增、测序获得其16S rDNA序列,在GenBank登录号为MG519831,在NCBI中经BLAST比对与泛菌属（Pantoea sp.）同源性达到99%。用ClustalW对S1536与泛菌属各个种模式菌的 16S rDNA进行多重序列对比,该菌株与Pantoea rodasii同源性最为接近,达到99.2%,故将菌株S1536命名为Pantoea rodasii S1536。该菌株具有较高草甘膦抗性,对温度和pH适应性强,是优良的耐草甘膦菌株,通过全基因组测序及基因注释,获得抗除草剂基因aroA序列,为下一步明确基因功能,挖掘Pantoea rodasii S1536高抗草甘膦的分子机制奠定基础。     

抗草甘膦转基因大豆的田间鉴定

为推广抗草甘膦转基因大豆优良品种,本文对新培育的抗除草剂草甘膦转基因大豆新材料SNT1进行了田间鉴定。田间试验采用随机区组设计方案,结荚期喷施41%农达(草甘膦)除草剂。观察和记载处理组和对照组除草剂处理后,大豆幼苗的枯死率,以及各主要生长发育时期和产量性状的表型。结果表明喷施除草剂后,非转基因对照组大豆(SN99-1)幼苗枯死率达98.86%,而转基因大豆SNT1仅有1.02%幼苗呈现受害症状。SN99-1和SNT1在主要生育期、主茎节数、单株荚数和百粒重等农艺性状上差异不显著。抗草甘膦转基因大豆SNT1在大田条件下能稳定、有效抵抗草甘膦除草剂,且抗草甘膦性状的表达并未影响到其他农艺性状。转基因大豆新材料SNT1可进一步应用于培育综合农艺性状优异且高效抗草甘膦除草剂的大豆新品种。     

土壤中残留草甘膦生物降解菌的分离与鉴定

本试验对陕北地区土壤中可降解残留农药草甘膦的微生物进行了分离、纯化,并采用测定菌体OD600 nm值的方法对所分离的菌株的农药生物降解性能进行了初步分析.结果获得具有生物降解草甘膦能力的菌株2株,分别编号为CGL-1和CGL-4.     

抗草甘膦大豆的遗传研究

以3个大面积推广的春大豆品种（宁镇3号、灰荚2号和日本晴3号）为母本与3个转基因抗草甘膦品种（ARG4、ARG5和ARG6）杂交，对杂交后代F1、F2、F3和BC1的抗除草剂特性进行遗传分析，结果表明大豆对除草剂的抗性受一对显性核基因控制。     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及特性研究

从泡菜中富集培养分离到12株乳酸菌,经测定发酵液pH值筛选到一株产酸性能较好的菌株PS-9,结合菌落形态特征、生理生化特性及菌株特异性序列分析等手段,确定其分类归属,并对其特性进行了研究。结果表明PS-9为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),菌株PS-9在pH值2.0环境中的存活率为85.2%,0.4%胆盐浓度环境中存活率为37.2%,对鸡大肠杆菌O78和金黄色葡萄球菌C56011的抑菌圈直径均超过18 mm。     

1株木霉的分离鉴定及抑菌和植物促生作用

为获得生防木霉,用稀释平板法从益母草(Leonurus japonicus)根际土中分离到木霉Lj,经形态及分子鉴定,确定Lj为毛簇木霉(Trichoderma velutinum)。平板对峙培养时,Lj对杨叶枯病菌(Alternaria alternata)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、杨树烂皮病菌(Cytospora chrysosperma)菌丝生长抑制率为28.4%~60.9%。将Lj固体发酵所产孢子稀释灌土后播种小白菜(Brassica chinensis),孢子浓度为0、109、108、107、106个·mL~(-1),检测时间为播种后15、30、45 d。相比同一时间点对照,处理组叶绿素质量分数明显较高,并随Lj孢子浓度下降而增加,最大值出现在106个·mL~(-1)组。处理组小白菜根长、叶长、鲜质量在15 d和30 d显著高于对照。叶过氧化物酶活性在15d时与对照无显著差异,30 d和45 d时大部分处理组显著高于对照,分别在109、106个·mL~(-1)组最高。Lj菌株具有拮抗真菌和促进小白菜生长的生防功能。     

DDT降解菌2D-1的分离鉴定与降解特性研究

从洪泽湖湿地淤泥中分离得到1株能高效降解DDT的革兰氏阳性细菌2D-1。通过生理生化分析,以及16SrDNA序列同源性比较分析,将2D-1鉴定为蜡状芽抱杆菌（Bacillus cereus）。在基础盐酵母培养基中,接种量5％,摇床转速150r／min,培养温度33℃,pH值6．5的条件下,2D-1菌株在8d内能对总量为53．46mg／L的DDT进行95．64％的降解,对p,p’-DDT、p,p＇-DDE、p,p＇-DDD和o,p＇-DDT的绝对降解浓度分别为5．32、22．98、6．66和16．17mg/L。结果表明,2D-1对4种异构体的适应性不同,p,p＇-DDE是其最适底物,且2D-1瞻解DDT的主娶产物有6种。     

氯霉素降解菌的驯化 筛选及分离鉴定

从鱼塘沉积物中驯化、筛选出能以氯霉素为惟一碳源和能源生长的好氧混合菌CSFO,经过平板分离纯化和进一步筛选得到了对氯霉素有较好降解效果的纯菌株CSFO-3,对其进行了形态特征、生理生化、16S rDNA序列分析和7 d生长及降解效果研究.结果表明,经过10代的驯化,筛选出的好氧混合菌CSFO在底物浓度为100 mg·L^-1时7 d的降解率为28.96%,分离纯化得到的CSFO-3菌株7 d内降解率达30.01%,其菌液在降解4 d时菌密度达最大,该菌株经鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas Migula）,与铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的同源性达99%.     

苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

通过驯化培养,从活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌,命名为菌株AN5.对该菌株进行了鉴定及降解特性研究.结果表明,分离菌株呈革兰氏染色阳性,细胞为球状或短杆状,菌落颜色呈橙红色.菌株AN5除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、萘为惟一碳源生长.它的部分长度16S rDNA序列分析表明,分离菌株AN5与嗜吡啶红球菌(Rhodococeus pyriainivorans)的16S rDNA序列具有99%相似性.实验采用PAUP 4.0软件包最大似然法对该菌株与相关菌进行系统发生分析.菌株AN5耐受苯胺的最高浓度可达5 000 mg·L-1.投加蛋白胨可以加速菌株对苯胺的降解.代谢机理研究证实, 菌株AN5在邻苯二酚-1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺.     

解磷菌YYF-3的分离鉴定及其生长特征

通过富集培养和鉴别培养初筛,从烟草(Nicotiana tabacum L.)根际土壤分离到1株具有较高解磷活性的菌株,编号为YYF-3。菌株YYF-3经过48 h发酵后,培养基上清液中游离态磷含量达到221.7 mg·L~(-1),进一步确定YYF-3均具有较强的解磷能力。形态特征观察、生化特性测定和16S r DNA序列分析的多相分类鉴定结果表明,菌株YYF-3隶属于不动杆菌属Acinetobacter,暂命名为Acinetobacter sp.YYF-3。菌株YYF-3最适生长温度为28~34℃,最适p H值范围是6.0~6.5,对Na Cl反应敏感。菌株YYF-3既可以作为解磷菌微生物诱变育种和全基因组育种的良好材料,也可以作为烤烟专用菌肥复配的备用菌株。     

鹅源副黏病毒的分离鉴定及部分特性研究

采用9日龄鸡胚,从长春某个体养鹅户的病死鹅的肝、脾和肾脏中分离到1株病毒,暂定名为JG04株。经HA和HI试验、电镜观察、常规RT-PCR、NDV荧光RT-PCR检测,证实JG04株为鹅源副黏病毒。与GenBank下载的9株NDV毒株的HN基因作同源性比较,并进一步对JG04株进行耐酸试验、氯仿和乙醚敏感试验、血凝解脱及血凝素热稳定性试验、EID50、ELD50和毒力测定。结果表明:JG04株与江苏近年来分离的鹅源副黏病毒株的HN基因同源性较高,核苷酸同源性高达96.4%,氨基酸同源性高达96.9%;JG04株有良好的血凝性,能凝集人和鸡的红细胞;电镜观察病毒粒子有囊膜,直径约200 nm;对酸、氯仿、乙醚敏感;血凝解脱为快速解脱型,血凝素热稳定性差;EID50、ELD50分别为1.74×109/mL、2.57×109/mL;MDT为54.2 h,ICPI为1.66,IVPI为2.60。上述结果表明,GJ04株与新城疫病毒(NDV)速发型具有类似的毒力,属强毒力毒株。     

产3-羟基丁酮菌株的分离·筛选与鉴定

从土壤中分离获得一株高产3-羟基丁酮的菌株ME-N11。该菌株3-羟基丁酮转化率高,仅产生少量的2,3-丁二醇、乙醇、乙酸等副产物,具有重要开发应用价值。在对其形态特征及生理生化特性分析的基础上,采用PCR扩增了其16S rRNA基因,并进行了测序。基于该菌的生理生化特性与16S rRNA基因的同源性进行比较及系统发育分析,发现该菌株和Bacillus subtilis同源性达99%,命名为Bacillus subtilis ME-N11。     

一株苯并芘高效降解菌的筛选鉴定

为了寻找可降解苯并芘的高效降解菌,从长期受苯并芘污染的焦化厂周边土壤和废水中取样,以苯并芘为唯一碳源反复驯化,分离、筛选出1株高效降解苯并芘的菌株A18。经形态特征和分子生物学分析,初步鉴定为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)。菌株A18在苯并芘溶液浓度为5 mg/L下,28℃振荡培养12 d,苯并芘的降解率达到44.8%。该菌株首次被证实具有降解苯并芘的能力。