黄芪多糖分级组分的提取及其对鸡疫苗免疫效果的影响

提取分离3个黄芪多糖分级组分,并探讨其对禽流感-新城疫重组二联活疫苗免疫效果的影响.采用3个乙醇浓度沉淀得到3个黄芪多糖分级组分:A1、A2、A3;将320只鸡随机分为8组,分别皮下注射A1、A2、A3、A1+A2,A1+A3、A2+A3、A1+A2+A3和蒸馏水,首免后每隔7d采血检测疫苗抗体效价.结果表明,A1、A2、A3得率分别为1.37%、3.87%、0.59%,多糖含量分别为30.42%、35.65%、25.88%;A2、A3能显著提高疫苗抗体效价.黄芪多糖免疫功能的有效部位为A2、A3,尤以A2作用显著.     

物理条件对黄芪多糖提取的影响

[目的]探讨物理因素对黄芪多糖提取的影响。[方法]以黄芪多糖的提取率为考察指标,采用正交试验,研究黄芪多糖的超声辅助提取工艺。[结果]确定的优化条件为：固液比30∶1,超声波强度120W提取时间1h,其最佳工艺的提取率达到92.1%。[结论]与直接加热提取法相比,微波提取省时、节能,提取率高。     

黄芪多糖提取工艺研究

为黄芪多糖的进一步开发利用打下基础,选取黄芪多糖的提取时间、提取温度和料液比3个因素进行了单因素试验。结果表明:温度、提取时间和料液比3个单因素的最佳条件分别为90℃、60 min和1∶8。其温度、提取时间和料液体积的最佳组合条件有待进一步研究。     

黄芪多糖微波提取工艺研究进展

通过综述黄芪多糖的传统提取方法、微波提取法的优点、微波提取法的原理、微波提取法的单独应用、微波提取法与其他方法的联合以及微波提取法的优化方案,阐述微波提取法在黄芪多糖提取工艺中的重要性。     

黄芪多糖提取及对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响

[目的]研究黄芪多糖最佳提取工艺,及其对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响.[方法]运用水煎法提取黄芪多糖,采用固液比、提取溶剂、提取温度和提取时间4个试验条件,进行单因素试验,并利用正交试验设计对提取工艺进行优化,所得黄芪多糖处理小叶杨幼苗,探究黄芪多糖对其叶绿素含量的影响.[结果]单因素试验最终获得最佳提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶15,提取温度为60℃,提取1.5h.正交试验得出优化提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶10,提取温度为60℃,提取1.0h.10 mg/ml的黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素a和总叶绿素的含量,而0.1 mg/ml黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素b的含量.[结论]黄芪多糖能够提高植物叶绿素含量,进而促进植物的生长发育.     

黄芪多糖脂质体对鸡淋巴细胞增殖的影响

为了观察黄芪多糖(APS)被制备成黄芪多糖脂质体后是否能够提高其生物活性,用MTT法测定了其对鸡T、B淋巴细胞增殖的影响,以APS溶液和空白脂质体作为对照。结果显示:APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同植物血凝素(PHA)作用均能显著促进鸡T淋巴细胞的增殖,并且在125～31.25μg.mL-1时,效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05);APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同脂多糖(LPS)作用均能显著促进鸡B淋巴细胞的增殖,并且在31.25μg.mL-1的效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05)。表明:APS脂质体能够提高APS促进鸡淋巴细胞增殖的能力,因此,脂质体作为APS的载体是切实可行的。     

黄芪多糖的提取分离与光谱分析

对黄芪饮片中的黄芪多糖(APS)采用水提醇沉法粗提,三氯乙酸法除蛋白,活性炭脱色,并用紫外分光光度计、红外光谱仪对所得黄芪多糖进行初步的结构分析。结果表明,APS的收率为3.63%,总糖含量为90.89%。紫外扫描结果显示样品不含核酸和蛋白质。红外光谱显示样品有多糖的一般特征吸收峰,且与标准黄芪多糖的红外谱图一致。     

真姬菇多糖的提取和组分研究

研究了真姬菇多糖的提取工艺和多糖组分。结果表明,真姬菇多糖的最佳提取工艺为：浸提比1：15,浸提时间1h,浸提温度100℃;真姬菇多糖的组分为半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖。     

黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究

[目的]研究黄芪根中多糖的含量。[方法]采用分光光度法测定膜荚黄芪中多糖的含量,以葡萄糖为对照品,以苯酚-浓硫酸为显色剂,在波长486 nm处测定样品溶液的吸光度。[结果]标准曲线为A=51.654C＋0.0372,r=0.9998,RSD1为1.28%,RSD2为1.50%。[结论]该方法操作简单,灵敏度高。     

黄芪多糖的提取及在保健饮品中的应用

黄芪多糖具有提高免疫力、抑菌、抗衰老、抗病毒等多种生理功能,应用前景广阔。查阅相关文献,总结了黄芪多糖传统及现代的提取方法,分析了各种提取方法的优缺点以及研究应用情况,并对黄芪多糖在保健饮料、保健酸奶、保健茶、保健酒等饮品中的应用进行了综述,旨在为黄芪多糖的大规模工业化生产提供指导,为黄芪多糖及其相关产品在保健饮品中的开发与应用提供借鉴。     

鸡白细胞介素-2基因的克隆与酵母表达质粒的构建

从经ConA活化的4周龄岭南黄鸡脾脏淋巴细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡白细胞介素-2(1L-2)cDNA片断,PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体,重组质粒命名为IL-2-T,经菌落PCR与限制酶切鉴定,然后测序,结果表明克隆片断长度为432bp,与预期大小一致,为鸡IL-2基因的编码区全长,将IL-2-T克隆重组质粒进行双酶切(Cla I与Xba I),回收IL-2片断插入同样酶切的毕赤酵母表达质粒pPiCZa-C,构建重组IL-2-C表达质粒,为鸡IL-2在毕赤酵母中的表达奠定基础。     

猪白细胞介素-2基因的克隆与表达

根据GenBank上发表的猪白细胞介素-2（Interleukin．2,IL-2）基因序列,设计1对引物。采用RT-PCR技术,以ConA刺激的猪外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出484bp的特异性片段,将其克隆入pGEM-Teasy载体。序列测定表明;扩增片段为猪IL-2基因,该基因与GenBank上发表的猪IL-2基因的核苷酸序列同源性达99．8％。将其定向克隆至原核表达载体pET32a,构建了表达重组猪IL-2的基因工程菌株,经IPTG诱导表达和层析纯化,获得了纯化的重组猪IL-2蛋白。     

复方中药成分与IL-2的免疫协同作用及对鸡细胞因子表达的影响

以淫羊藿多糖加蜂胶黄酮（方1）、人参皂苷加黄芪多糖（方2）组成2个复方，各加IL-2配合新城疫苗免疫雏鸡，分别于免疫后第7、14、21和28d用微量法检测血清抗体效价的动态变化；同时将2个复方各分3种剂量加入到培养的鸡外周血T淋巴细胞中，分别培养7和24h后用半定量RT-PCR方法检测淋巴细胞IL-2和IFN-γ的mRNA表达的变化。结果表明，2个复方单用或与IL-2合用均能显著提高抗体效价，而复方与IL-2的免疫协同作用不明显；方1的3个剂量和方2的高剂量能显著促进IL-2的基因表达，而2个复方的3个剂量能显著促进IFN-γ的基因表达，解释了复方中药成分与IL-2免疫协同作用不明显的原因。     

茯苓多糖对鸡免疫功能的影响

为探讨茯苓多糖对海兰褐公雏鸡体内外免疫活性的影响,将120羽1日龄海兰褐公雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、模型组、免疫对照组(1 kg饲料添加0.2 g盐酸左旋咪唑)、茯苓多糖高剂量组(1 kg饲料添加2.0 g茯苓多糖)、茯苓多糖中剂量组(1 kg饲料添加1.0 g茯苓多糖)、茯苓多糖低剂量组(1 kg饲料添加0.5 g茯苓多糖),用MTT法检测不同浓度茯苓多糖对鸡外周血淋巴细胞、脾脏细胞增殖的影响,ELISA法测定血清中细胞因子IL-2和IFN-γ含量,屠杀、称重、计算各组鸡脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数。结果表明,茯苓多糖对鸡外周血淋巴细胞、脾脏细胞增殖具有刺激作用,浓度越高,刺激作用越强,呈现剂量依赖性;茯苓多糖高、中、低剂量组鸡血清中IL-2和IFN-γ均高于模型组,茯苓多糖各组免疫器官指数高于模型组。这表明茯苓多糖能提高海兰褐公雏鸡的免疫功能。     

荷叶多糖提取及其抗氧化作用研究

[目的]优化提取荷叶多糖的最佳工艺参数及研究其抗氧化作用,为荷叶多糖的提取和利用提供技术参考.[方法]以荷叶为原料,采用单因素试验及正交试验设计,从提取时间、提取温度、料液比等方面,对荷叶多糖的提取工艺进行优化;并研究荷叶多糖对羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用.[结果]热水浸提荷叶多糖的最佳工艺条件为:浸提时间2.0 h,浸提温度75℃,固液比1∶30.荷叶多糖对·OH和O2-·均有明显的清除作用,且清除率随多糖浓度增加而增大,其最高清除率分别为51.6%和23.1%.[结论]在最佳提取工艺条件下,荷叶多糖的提取率为9.95%;荷叶多糖抗氧化作用明显.     

几种中药成分与IL-2免疫协同作用的比较

将420羽罗曼雏鸡随机均分为14组,14日龄时用新城疫Ⅳ系苗免疫,并分别肌肉注射当归多糖（CAPS）、黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、淫羊藿多糖（EPS）、蜂胶黄酮（PF）和人参皂苷（GS）6种中药成分加白介素2（IL-2）,每天1次,连用3d。分别在不同时间点检测新城疫病毒HI（NDV-HI）抗体效价,并计算免疫器官指数。结果表明,APS、IRPS、EPS、PF和GS加IL-2在免疫后7～14d都能显著提高抗体效价,APS、IRPS和EPS加IL-2在免疫后4周显著促进免疫器官发育。提示,中药成分与IL-2合用有一定的免疫协同作用。     

9例囊虫病患者治疗前后TNFα、IL-6、IL-8和sIL-2R血清水平的观察

目的 :检测囊虫病患者血清肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素 - 6(IL - 6)、白细胞介素 - 8(IL - 8)和血清可溶性白细胞介素 2受体 (s IL - 2 R)治疗前后的变化。方法 :用酶联免疫法测定囊虫病 9例治疗前后的血清 TNFα、IL - 6、IL - 8和 s IL - 2 R的含量 ,并进行统计学分析。结果 :经 5个疗程治疗 ,9例治疗后的血清 TNFα(0 .2 3± 0 .35) μg· L- 1、IL- 6(0 .0 7± 0 .0 9) μg· L- 1、IL- 8(0 .1 0± 0 .0 1 ) μg· L- 1和 s IL- 2R(1 52 .62± 56.34) U/ m L的水平与治疗前比呈显著下降 (P<0 .0 5)。结论 :囊虫病患者血清 TNFα、IL- 6、IL - 8和 s IL- 2 R水平的变化与囊虫病患者体内囊虫的多少存在有一定关系     

鸡白细胞介素-2的研究进展及应用前景

鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用。近年来,随着鸡的IL-2基因克隆成功,使鸡的IL-2研究及应用得到了一定的发展,同时作为免疫增强剂和构建新型基因工程疫苗呈现出一定的应用前景。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2 mRNA表达的影响

目的探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2mRNA表达及分布的影响。方法在成功造模60只去卵巢青年大鼠的基础上,分别皮下注射补充大豆异黄酮高、中、低剂量(1.5、1.0、0.5mg·kg-1BW)和溶媒剂,补充至第2、4和6周时每组各宰杀5只,运用原位组织杂交方法,对大鼠脾脏IL-2mRNA的表达和分布变化进行观察。结果IL-2mRNA主要分布于被膜下方的红髓区,在白髓区的脾小结外周、边缘区、动脉周围淋巴鞘外层等处也有分布。大鼠去卵巢后脾脏中IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目均显著下降,并且随着去除卵巢时间的延长更趋明显;而补充大豆异黄酮高、中、低剂量后,各组IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目随着时间的延长均呈上升趋势,表现时间依赖性。在同一时间段内,随着补充大豆异黄酮剂量的升高,IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目也均呈上升趋势,表现为剂量依赖性。结论大豆异黄酮对脾脏内IL-2mRNA的表达具有上调作用,并存在剂量和时间依赖性。     

黄芪多糖和香菇多糖对雏鸡IL-2活性和淋巴细胞增殖反应的影响

以ＡＡ肉用雏鸡为试验动物,对雏鸡注射黄芪多糖和香菇多糖,检测脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２诱生活性和淋巴细胞增殖反应。结果表明,黄芪多糖和香菇多糖注射组雏鸡,ＩＬ－２诱生活性和淋巴细胞增殖反应均高于或显著高于对照组雏鸡。