湖南小白菜病毒病、病毒种类研究

据国外报道,侵染油菜及十字花科蔬菜的病毒主要是黄瓜花叶病毒(CMV),芜菁花叶病毒(TuMV),花椰菜花叶病毒(CaMV),萝卜花叶病毒(RaMV)及烟草花叶病毒(TMV);国内研究认为危害十字花科蔬菜病毒主要有 TuMV、CMV 和 TMV。在1983—1987年的5年中,采用乳胶凝集和对流免疫电泳方法对湖南小白菜病毒种类     

甘肃省河西地区辣(甜)椒病毒病毒原鉴定

2006～2009年用DAS-ELISA方法对采自甘肃省河西地区辣(甜)椒病毒病病株的27份样本进行了烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草蚀纹病毒(TEV)、辣椒轻微斑驳病毒(PMMoV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、苜蓿花叶病毒(AMV)和蚕豆萎蔫病毒(BBWV)共9种病毒的检测,同时采用反转录聚合酶链式反应对其中20份样本进行了前4种病毒的测定。结果表明,DAS-ELISA方法检测出的病毒种类有TMV、CMV、PMMoV、PVY和TEV,其中TMV和CMV是优势毒原种群,检出率分别为44.4%和33.3%;RT-PCR方法检测出TMV、CMV、TEV和PMMoV;未检出TSWV、PVX、AMV和BBWV。     

番茄黑环病毒液相芯片快速检测方法的建立

为建立番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)的液相芯片检测技术,对GenBank中的TBRV核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与TBRV的RT-PCR产物进行杂交,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果表明:建立的方法具有良好的特异性,能够有效区分侵染马铃薯的TBRV、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、马铃薯A病毒(PVA)及番茄斑萎病毒(TSWV);检测灵敏度约为1pg/μL总RNA,与常规RT-PCR灵敏度相当。实际样品检测结果表明该方法可用于TBRV的日常检测。     

马铃薯5种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

采用多重RT-PCR方法,建立可同时检测马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯M病毒（PVM）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯A病毒（PVA）和马铃薯S病毒（PVS）的方法。根据 GenBank中PVX、PVM、PVY、PVA及PVS（CP）基因序列设计特异引物,对多重RT-PCR退火温度、循环次数、延伸温度、引物组合浓度进行优化,建立了能同时检测5种马铃薯病毒的多重RT-PCR方法。该方法能同时扩增出PVX、PVM、PVY、PVA及PVS特异片段,其大小分别是138、213、369、468和657 bp。测序结果表明,5种病毒的序列与相应参考序列相似性达到97%以上。灵敏度分析结果表明,多重RT-PCR方法能够检测植物组织量为10-3 mg。应用建立的多重RT-PCR检测方法对田间样品和组培苗进行检测,结果显示,该方法可以准确、快速、灵敏地同时检测单一或复合侵染的5种马铃薯病毒。     

中国农业科学院烟草研究所在烟草马铃薯Y病毒抗性基因挖掘方面取得新进展

<正>2016年12月26日,从中国农业科学院烟草研究所获悉,烟草马铃薯Y病毒病抗性基因挖掘研究取得新进展,揭示了烟草响应马铃薯Y病毒的生物学过程,锁定了6个重要抗性基因。烟草马铃薯Y病毒病是由马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)引起的一种烟草系统性侵染病害,该病毒是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的典型成员,在生产中对烟草品质造成严重影响。近年     

番茄病毒病检测技术

上海市郊春番茄病毒病检测结果表明,其毒原种群主要是TMV(烟草花叶病毒)、CMV(黄瓜花叶病毒)。1987年首次检出还有PVY(马铃薯Y病毒)和PVX(马铃薯X病毒)。PVY为害番茄较TMV或CMV轻,但往往与TMV或CMV混合浸染番茄,植株明显黄化矮缩,甚至使果实僵化,失去经济价值。     

马铃薯抗晚疫病基因R8、RB和抗病毒病基因Rx1、Ryadg的多重PCR检测

在218份马铃薯材料中筛查晚疫病持久抗性基因RB和R8标记的基础上,进一步筛查了马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)极端抗性基因Rx1和Ry_adg的标记。利用筛查出的含有Rx1和RB标记的‘德薯3号’和含有Ry_adg和R8标记的P182马铃薯资源材料混合DNA为模板,选择已报道的Rx1和Ry_adg的标记引物,并根据RB和R8序列设计特异引物,同时设计马铃薯GBSS基因特异引物为内参监控PCR反应体系有效扩增,对多重PCR延伸温度、引物组合浓度等进行优化,建立了同时检测4个抗病基因的多重PCR方法。应用该方法对选育品系样品进行筛查,鉴定到聚合上述4个抗性基因的材料4份。本研究中建立的多重PCR检测体系用于分子标记辅助选择,为马铃薯晚疫病和病毒病多抗基因聚合育种提供了简单、高效的技术方法并为多抗性基因聚合新品种选育创制新资源。     

南方冬作区马铃薯新品种‘闽薯2号’

马铃薯‘闽薯2号’是从‘金冠’ב389746.2’的杂交后代中选育出的新品种。株形直立,茎粗。平均单株块茎5个,商品薯率87.15%。薯块短椭圆形,薯皮浅黄色,薯肉浅黄色,芽眼浅。食用品质较好。块茎含干物质17.78%,蛋白质10.6%(干基),全钾2.43%(干基),维生素C 0.28 mg·g~(-1),还原糖5.6 mg·g~(-1)。生育期89 d,中抗马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)和早疫病,中感晚疫病。平均鲜薯产量30 019 kg·hm~(-2),适合南方冬作区种植。     

重庆南瓜病毒病病原ELISA 检测及CMV 变异分析

 利用7 种植物病毒的抗体,对采自重庆7 个区县的67 份南瓜病毒病样品进行了抗原直接包被酶联免疫吸附分析（ACP-ELISA）检测。检测结果表明,在这67 份样品中,至少59 份感染了所要检测病毒,其中,感染黄瓜花叶病毒 (Cucumber mosaic virus, CMV)、烟草花叶病毒 (Tobacco mosaic virus,TMV)、番茄花叶病毒 (Tomato mosaic virus, ToMV)、芜菁花叶病毒 (Turnip mosaic virus, TuMV)、蚕豆萎蔫病毒2 号 (Broad bean wilt virus 2, BBWV-2)、马铃薯Y 病毒 (Potato virus Y, PVY)和马铃薯X 病毒(Potato virus X, PVX) 的样品分别为80.60%、77.61%、74.63%、82.09%、76.12%、83.58%和55.22%。在检测呈阳性的59 份样品中有93.22%的样品受到2 种以上病毒的复合侵染,而受7 种病毒复合侵染的样品高达60.00%,表明在南瓜上病毒复合侵染现象相当严重。进一步对54 份受CMV 侵染的南瓜样品检测发现,CMV 亚组Ⅰ (CMVⅠ) 病毒侵染的样品有49 份,占90.74%,CMV 亚组Ⅱ (CMVⅡ) 病毒侵染的样品为11 份,占20.37%;其中6 份（11.11%）样品检测到CMVⅠ和CMVⅡ的复合侵染。以免疫捕获反转录PCR (IC-RT-PCR) 扩增了一个CMVⅠ分离物 (CMV-CQ) 近全长CP 基因并进行序列分析,结果证实其属于CMV 亚组Ⅰ型,其核苷酸序列与国内CMVⅠ型赤豆分离物 (CMV-RB) 的同源性最高,为98.1%。     

草莓病毒病研究进展

综述了草莓皱缩病毒(SCV)、草莓斑驳病毒(SMV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓轻型黄边伴随病毒(SMYEaV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)等6种主要草莓病毒的分类地位、地理分布、传播途径、理化及分子生物学特性,介绍了23种草莓病毒病检测方法、控制手段。应用指示植物小叶嫁接法检测草莓病毒病仍是特异、灵敏的标准方法,但更快捷、准确、灵敏的血清学检测(ELISA)和分子生物学检测(PCR)近年来取得了很大进展。目前,草莓病毒病的控制方法主要有培育无病毒苗木、选育抗蚜虫、抗病毒品种和应用转基因技术获得抗病毒植株。     

马铃薯脱毒快繁及微型薯生产技术试验研究

马铃薯,俗名土豆、洋芋、山药蛋,是一种无性繁殖作物,传统的种植方式是将前茬生产的薯块留做后茬当种。由于马铃薯在种植过程中易感染病毒病,随着时代的延续,病毒就会在植株体内增殖、运转、积累于所结的薯块中,使病情逐年加重,通常所说的马铃薯退化现象,就是因为病毒的侵染而造成的产量降低、品质下降。如何去除马铃薯所感染的病毒,作者于2000-2004年进行了试验研究,认为解决这一问题的主要途径是对马铃薯进行脱毒、组培快繁,培育脱毒种薯。一、马铃薯的脱毒方法在我国,寄生于马铃薯上的病毒主要有PVX(马铃薯普通花叶病毒)、PVY(马铃薯…     

抗病毒病辣椒的选育(摘译)

病是国际上辣椒生产中的一个问题。美国在五十五年前已有报道。现在南美、印度、欧洲、日本、朝鲜皆有关于辣椒病毒病的报道。 辣椒病毒病约有36种,但尚未全部鉴定。每年能使大多数辣椒产区造成中等到严重损失的病毒病有:黄瓜花叶病毒(CMV),辣椒斑纹病毒(PMV),马铃薯Y病毒(PVY),烟草蚀纹病毒(TEV),烟草花叶病毒(TMV)和烟草环斑病毒(TRSV)。病毒病偶尔使美国西南部的一些重要的辣椒产区没有收成。 真菌和细菌引起的辣椒病害可以用农药防治,可是尚无类似的药物能防治病毒病。有些间接的防治措施,例如防治传毒昆虫,消灭病毒的寄主,改变…     

马铃薯土传病原菌快速检测方法的比较分析及其应用

马铃薯土传病害日益严重,对病原菌进行快速检测是病害早期诊断、预测监控、综合防治的重要基础。本文综合比较了普通PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR、多重PCR和环介导等温扩增技术(LAMP)在灵敏度和特异性等方面的特点,以及在检测马铃薯土传病害时的优缺点;总结了各病害检测报道的引物信息和检测体系的优势。同时,对各技术的应用前景进行展望,旨在对马铃薯土传病害的快速检测方法及其发展趋势有一个全面的了解。     

大蒜花叶病原病毒的鉴定和茎尖脱毒效果

用洋葱黄矮病毒（ＯＹＤＶ）等９种酶标抗体，以常规酶联夹心法检测国内外５７份大蒜品种带病毒状况，同时，以诱捕修饰免疫电镜技术复核酶联法进行检测，结果表明，被检的５７份大蒜品种带有：洋葱黄矮病毒，韭葱黄条病毒（ＬＹＳＶ），亚实基隆葱潜隐病毒（ＳＬＶ），马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ），马铃薯Ａ病毒（ＰＶＡ），马铃薯Ｓ病毒（ＰＶＳ），马铃薯Ｍ病毒（ＰＶＭ），康乃馨潜隐病毒（ＣＬＶ）和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）等９种病毒。 诱捕修饰免疫电镜图象表明，用上述９种病毒包被的电镜载网诱捕到大量的同源病毒粒子，这些病毒粒子又分别被同源抗体分子修饰，形成连续完整的抗体分子外套。用洋葱黄矮病毒等９种酶标抗体检测茎尖组织培养再生的８０株大蒜试管苗看出，完全脱掉９种病毒的试管苗占３０％，完全未脱掉病毒、带９种病毒的试管苗占５％其余的试管苗都程度不同地脱掉了所带的几种病毒。     

马铃薯S病毒PVSO株系RT-LAMP检测方法的建立及应用

为建立一种马铃薯S病毒普通株系PVSO快速、灵敏的RT-LAMP可视化检测方法。根据马铃薯S病毒普通株系的CP核苷酸序列设计4条引物,以感染PVS的马铃薯叶片总RNA为模板,采用一步法RT-LAMP,在62 ℃下反应60 min,扩增产物利用琼脂糖电泳分析和钙黄绿素染料显色判断结果,同时对其特异性和灵敏性进行测定。结果表明,建立的RT-LAMP方法可特异地对PVSO进行检测,检测灵敏度为RT-PCR的100倍。对33份马铃薯样品检测表明,RT-LAMP与RT-PCR方法检测结果基本一致。因此建立的PVSO的 RT-LAMP可视化检测方法简便,特异性强,灵敏度高,适合PVSO的快速检测。     

我国研制出马铃薯纳米抑芽剂

正中科院合肥物质科学研究院技术生物所吴正岩研究员课题组在抑制马铃薯发芽研究方面取得重要进展,相关成果于2018年7月6日发表在美国化学会绿色化学领域核心期刊《ACS可持续化学与工程》上。现有马铃薯抑芽技术包括生物法(品种)、物理法(温度、辐照)和化学法(有机材料),虽然可在一定程度上抑制马铃薯发芽,但具有成本高、稳定性低、易造成二次污染等缺点,成为制约其规模化应用的关键瓶颈,迫切需要发展简便、环保、低成本的抑芽技术。     

马铃薯S病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

 以田间采集的马铃薯病叶中提取的马铃薯病毒s(PVS)总RNA为模板，通过RT—PCR获取长度为890 bp的P 一cp的cDNA，克隆至pGEM—T载体上。酶切回收该基因片段，并构建了该基因的原核表达质粒pBV—pvs。SDS—PAGE凝胶电泳和Western印迹分析表明：P 一印基因在大肠杆菌JM109中可特异地高效表达分子量约33kD的蛋白，且表达蛋白具有良好的抗原活性。利用该表达产物免疫动物家兔，获得的抗血清可用于大田马铃薯s病毒的快速检测。     

三个脱毒马铃薯新品种

1　鲁引1号鲁引1号是山东省农科院培育出的一个早熟脱毒马铃薯。早熟,从出苗至收获60～70天(ｄ),株形直立,植株较矮,约60厘米(ｃｍ),休眠期较短,适于春、秋两季栽培,也适合与玉米、棉花等喜温作物间作套种。茎杆粗壮,分枝少,叶片肥大,叶缘波状,花淡紫色,块茎膨大速度快,结薯集中,产量高,一般亩产2500公斤(ｋｇ)左右,比当地品种增产20%～30%。鲁引一号薯块极大,长椭圆形,芽眼浅,薯皮淡黄色而光滑,薯肉淡黄色。品种和食味好,适合加工及出口创汇,在香港及东南亚各国极为畅销。抗马铃薯Ｙ病毒,对Ａ病毒免疫,抗疮痂病,感环腐病和晚疫病。栽培要点…     

马铃薯主要病虫害及其防治方法

正危害马铃薯的病虫害有300多种,但并不是所有的病虫害都会造成马铃薯严重减产。马铃薯病害主要分为真菌病害、细菌病害和病毒病。其中由真菌引起的马铃薯晚疫病是世界上最主要的马铃薯病害,几乎能在所有的马铃薯种植区发生。通常说的种薯退化即为不同病毒引起的多种病毒病所造成。马铃薯害虫分地上害虫和地下害虫,其中比较主要的有马铃薯块茎蛾、蚜虫等。     

马铃薯Y 病毒河北分离物外壳蛋白基因序列分析和株系鉴定

 对河北张家口感病马铃薯的一个马铃薯Y病毒分离物( PXY-HBEI) 的外壳蛋白基因进行了克隆和序列分析。以提取的RNA为模板, 应用RT-PCR扩增目的基因, 扩增产物克隆到质粒pGEM-T, 上并序列分析。结果表明, 克隆cDNA片段由801个核苷酸组成, 编码267个氨基酸。与基因库中PVY代表株系相比, 它们的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.6%～98.8%和93.3% ～98.5% , 与PVYN 和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93.6%和97.8% , 确定PVY-HBEI归属于普通株系( PVYO株系) , 同时建立了快速、灵敏、简便的PVY RT-PCR检测方法。