鸡新城疫病毒HB92株生物学特性研究(Ⅱ)——对热的稳定性及在鸡群中的自然传播性试验

将 NDVHB92株分别置4℃、20℃、37℃条件下保存,每隔一周测定血凝价(HA)和对鸡胚的感染力(EID_(50)),结果为毒株在37℃保存7d,在20℃至少保存30d。其HA价和EID_(50)保持不变,4℃保存60d效价不变。同时说明了HB92疫苗株血凝特性和感染力存在不一致性。该每株经56℃水浴处理6h,血凝性和对鸡胚的感染力不变。用HB92株对17日龄雏鸡进行滴鼻、拌料及同居感染免疫,3周后NDHI抗体效价达4.5Log2,免疫和同居鸡对强毒攻击能获得良好的保护,说明HB92株在鸡群中的自然传播性较好。     

豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究(摘要)

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗接种豚鼠 ,观察豚鼠对ＰＰＶＮ株弱毒苗的抗体反应。其结果如下 :用 4种不同剂量的ＰＰＶＮ株弱毒苗免疫豚鼠 ,免疫后 14天均产生抗体反应 ,ＰＰＶＨＩ价分别为 :0 1ｍｌ剂量为 1:16～ 1:6 4;0 2ｍｌ为1:8～ 1:32 ;0 5ｍｌ为 1:16～ 1:32 ;1 0ｍｌ为 1:16～ 1:6 4,而对照豚鼠抗体反应为阴性 ,可见仅需 0 1ｍｌＰＰＶＮ株弱毒苗便可引起豚鼠产生抗体反应。同时比较了不同批次的ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠产生抗体反应的情况 ;3批ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠后 14天全部出现抗体反…     

鸡新城疫病毒B_(95)株免疫研究

本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95 株病毒。经对培养的尿囊液病毒价达EID50 107.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求 ,将其选作试验用疫苗进行了试验。结果表明 ,该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为105.75,拌料免疫最小剂量为106.75。以B95 株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡 ,在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力 ,免疫期可达4个月。同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果 ,攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著。拌料免疫效果良好 ,与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著。B95 株苗在0～4℃条件下保存4个月 ,免疫攻毒保护率达80% ;在室温下保存2个月 ,免疫攻毒保护率达100%。     

鸡新城疫病毒B95株免疫研究

本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95株病毒，经对培养的尿囊液病毒价达EID5010^7.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求，将其选作试验用疫苗进行了试验，结果表明，该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为10^5.75，拌料免疫最小剂量为10^6.75，以B95株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡，在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力，免疫期可达4个月，同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果，攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著，拌料免疫效果良好，与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著，B95株苗在0－4℃条件下保存4个月，免疫攻毒保护率达80％，在室温下保存2个月，免疫攻毒保护率达100％。     

鸡新城疫病毒HB92株生物学特性研究（II）：对热的稳定性及在鸡群中的…

将ＮＤＶＨＢ９２株分别置４℃，２０℃，３７℃条件下保存，每隔一周测定血凝价（ＨＡ）和对鸡胚的感染力（ＥＩＤ５０）结果为毒株为３７℃保存７ｄ，在２０℃至少保存３ｄ，其ＨＡ价和ＥＩＤ５０保持不变，４℃保存６０ｄ效价不变，同时说明了ＨＢ９２疫苗株血凝特性和感染力存在不一致性，该毒株经５６℃水浴处理６ｈ，血凝性和对鸡胚的感染力不变，用ＨＢ９２株对１７日龄雏鸡进行滴鼻，拌料及同居感染免疫，３周后ＮＤＨＩ抗体     

猪细小病毒(PPV)_(S-1)A株弱毒疫苗接种豚鼠的抗体反应

三批PPVs-1A弱毒苗接种豚鼠20只,接种后一周开始产生抗体反应,第五周全部出现抗体反应。HI抗体持续时间至少10个月。弱毒苗分A、B两组接种HI阴性豚鼠共8只,接种HI阴性猪共4只。猪在免疫后一周HI全部阳性,一个月平均HI价1024;豚鼠免疫后四周全部阳性,35天平均HI价395,豚鼠与猪阳性率相符。弱毒苗在4℃保存11个月,-20℃14个月后接种豚鼠,全部产生抗体反应。     

猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎弱毒二联疫苗研究

用猪流行性腹泻（PED）弱毒疫苗株PEDV－G1P83和猪传染性胃肠炎（GE）弱毒疫苗株TGEV－AG1制成PED和TGE弱毒二联疫苗,并进行了保存期试验、安全效力、免疫期试验和区域试验。结果表明,试验疫苗在－20℃保存4个月,经4月保存的疫苗免疫效力未见下降。4℃保存48h对疫苗病毒的毒价没有明显影响。用该毒二联疫苗按程序免疫妊娠母猪,对妊娠母猪安全,其仔猪获得了良好的被动免疫。其对PEDV强毒、TGEV强毒和该二种强毒混合功击的免疫效力分别达90．48％、93．75％和87．5％。用二联弱毒疫苗免疫8－10日龄的哺乳仔猪证明安全,28日龄时（25日龄断奶）分别用PEDV、TGEV和两种强毒混合攻毒免疫效力分别为100％、90．9％和100％。8－10日龄免疫仔猪生长到4月龄时用TGEV和PEDV强毒攻击,免疫效力分别为100％和73．3％。结果表明,该弱毒二联疫苗能够安全地对妊娠母猪和哺乳仔猪进行免疫,免疫后能有效地保护初生仔猪、断奶猪和肥育猪抵抗TGEV和PEDV强毒的攻击。该弱毒二联疫苗在区域试验中能显著降低猪病毒性腹泻的发病率和死亡率。取得良好的效果。     

鸡传染性法氏囊病—新城疫二联峰胶灭活苗的研制

用自行分离鉴定的鸡法氏囊病病毒（ＤＦＣ３Ｖ株）与Ｉ型标准毒株（Ｄ７８株）和新城疫病毒（ＬａＳｏｔａ株）联合研制的蜂胶灭活苗,经实验室和田间试验证明,雏鸡肌肉或皮下注射０．５ｍｌ／只,注后７天产生免疫抗体,攻毒后保护率为６０％,注后１４天功玫毒保护率为１００％,免疫后１８０天,攻毒保护率为８０％,本苗与白油佐剂苗免疫效力对比试验结果表明,蜂胶佐剂苗免疫效和产生白油佐剂苗为快而持久,该苗保存于４～８℃     

冻存时间及冻融次数对PRRSV毒价的影响试验

本试验对PRRSV-ShB6(P60)株进行了不同冻存时间和冻融次数对其毒价影响的评估。将病毒在-20℃冻存时间为90天,每隔15天进行毒价测定,结果发现其毒价下降趋势不明显,但病毒连续反复冻融12次,每次取样进行了病毒含量分析,结果发现其毒价整体呈波动性下降,前后变化较明显。结果表明,该毒株在科学合理的条件下保存,避免反复冻融,病毒活力相对稳定。     

传染性法氏囊病流行强毒株与J_4强毒株致病力的比较

用传染性法氏囊病(IBD)流行强毒株“郑毒”株与保存的强毒J_4株人工感染7日龄和45日龄IBD阴性鸡、非免疫鸡胚及鸡胚成纤维细胞。对7日龄雏鸡,“郑毒”株能引起75%发病,23%死亡;J_4株只造成亚临床感染。对45日龄雏,“郑毒”株经40～60小时能引起100%发病,45%死亡,且肌肉、肾、肠、腺胃、法氏囊严重出血,法氏囊萎缩迅速,接毒后3天和8天的囊/体重比值分别为1.7和0.58;J_4株虽也可引起发病,但症状轻微,10%死亡,接寿后3天法氏囊显著肿胀,囊/体重比值为3.9,是“郑毒”株的2.2倍。两毒株虽能在非免疫鸡胚上增殖,并致其死亡,但“郑毒”株引起的死亡率高于J_4株,且病变更严重。在鸡胚成纤维细胞上盲传3代,两毒株都不出现CPE,表明还不适应于细胞上增殖。对接毒后进行LaSota疫苗免疫的7日龄雏鸡,“郑毒”株能产生更大的免疫抑制。据两毒株在致病力上的差异表明,”郑毒”可能是一株毒力更强的血清Ⅰ型亚型株或变异株.     

禽霍乱蜂胶菌苗的研究——Ⅱ.菌苗的免疫期、保存期及免疫强度试验

以禽霍乱蜂胶菌苗免疫2月龄和成年健康鸡,免疫期为6个月.193天保护率仍达50%.菌苗于4～8℃保存15个月,20～30℃保存4个月,免疫效力基本不变.以1.0ml 菌苗免疫2月龄健康鸡,分别功击5、10、20及40MLD强毒,保护率分别为100%、100%、100%和42.86%.     

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究：Ⅲ．马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及

马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于－40℃及冷库保存18个月，其毒价为10^-7/ml，与冻干前温苗的毒价一样，用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。     

豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒N株弱毒苗接种豚鼠，观察豚鼠对PPV N株弱毒苗的抗体反应。结果4种不同剂量和3个不同批次的PPV N株弱毒苗接种豚鼠后第14天均产生抗体反应，其PPV HI效价在1：16－1：64之间，0.1ml和1ml 剂量接种豚鼠产生的PPV HI抗体水平相近，抗体持续长达12个月以上。在4℃保存0天、12个月和－20℃保存2年、3年的PPV N株弱毒苗接种豚鼠，其PPV HI价在1：16－1：32之间，说明该苗在4℃至能保存12个月，－20℃能保存3年以上。比较了不同批次疫苗接种猪和豚鼠所产生的抗体反应，结果两者相似。用3批引起豚鼠产生抗体反应的PPV N株弱毒苗接种768头后备母猪，共产仔7136头，其中健活仔6575头，平均每窝产健活仔8．56头，产死仔仅0．73头。证明豚鼠是监测PPV弱毒苗抗体的首选实验动物。     

抗石门系猪瘟强毒淋巴细胞杂交瘤的研究

用经PEG沉淀及差速离心浓缩、提纯的石门系猪瘟强毒3次免疫BALB/C小鼠。取免疫鼠的脾细胞与SP2/O-Ag-14小鼠骨髓瘤细胞融合,共获41株阳性杂交瘤。选其中3株经克隆化处理后筛选出15株亚克隆。这15株杂交瘤分泌的抗体均识别石门系猪瘟强毒,并与部分不同来源的省瘟兔化弱毒有交叉反应。15株中有2株能识别瘟病毒属的所有被试毒株,有6株只识别猪瘟种的强、弱毒而不与牛瘸毒性腹泻病毒及边界病病毒交叉反应。12株单抗的亚类均为IgG2b。这些杂交瘤株的稳定性良好,经保存2、6个月、一年及二年后,容易复苏并保持分泌高效价的抗体。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.     

鸡传染性法氏囊病-新城疫二联蜂胶灭活苗的研制

用自行分离鉴定的鸡法氏囊病病毒（ＤＦＣ３Ｖ株）与Ⅰ型标准毒株（Ｄ７８株）和新城疫病毒（ＬａＳｏｔａ株）联合研制的蜂胶灭活苗、经实验室和田间试验证明,雏鸡肌肉或皮下注射０．５ｍｌ／只,注后７天产生免疫抗体,攻毒后保护率为６０％;注后１４天攻毒保护率为１００％;免疫后１８０天,攻毒保护率为８０％。本苗与白油佐剂苗免疫效力对比试验结果表明,蜂胶佐剂苗免疫效力产生较白油佐剂苗为快而持久。该苗保存于４～８℃有效期为６个月。本苗无毒、副作用,安全性能良好,易于注射,并具有快速增重,提高产蛋率的作用。应用本苗接种现地多品系鸡２万余只,均获得满意效果。     

新城疫La Sota、V4疫苗免疫鸡和免疫攻毒鸡的特异性IgA抗体动态变化规律比较

应用间接ELISA对新城疫LaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的IgA抗体动态变化进行了测定和比较。试验表明，LaSota和V4免疫鸡泪液中特异性IgA均在免疫后第5天出现，8天开始明显升高，与血清中IgG出现时间相似，免疫后21天达到高峰。LaSota免疫鸡的泪液IgA抗体水平略高于V4免疫鸡；而两免疫组哈德氏腺(HG)中的特异性IgA高峰出现较迟。免疫攻毒鸡泪液中的特异性IgA抗体水平均先呈短暂的升高，之后下降的趋势，而HG中的IgA则首先表现降低，之后很快升高，5天后趋于下降，两攻毒组差异不显著，对IgA回忆应答均不明显。     

猪伪狂犬病不同佐剂灭活疫苗对兔免疫原性初探

采用分离鉴定的猪伪狂犬病毒（HB—J株）以4种佐剂研制成4批灭活疫苗,以研究其对兔的免疫原性。疫苗分别免疫PRV抗体阴性兔后,用乳胶凝集试验法（LAT）和中和试验法（SNT）对试验兔进行血清抗体检测;于免疫后21、28d对试验兔分别进行攻毒,观察兔保护情况。试验结果表明,兔对不同佐剂的猪伪狂犬病疫苗均产生良好的免疫应答反应,且当兔免疫后血清凝集价≥1：32或血清抗体中和指数≥1479或中和价≥1：16时,可以抵抗10LD50剂量强毒的攻击;当兔免疫后血清凝集价≥1：64或血清抗体中和指数≥2187或中和价≥1：32时,可以抵抗100LD50剂量强毒的攻击;4种佐剂灭活疫苗均具有良好的免疫效果。     

NDVLaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒（NDV）特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明，V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前3天左右出现，但除高峰期（1周左右）外，其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota免疫鸡。LaSota疫羁免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgGr抗体高峰较V4免疫鸡提前约2周出现，攻毒后，LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著，而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。     

重组禽流感病毒二价灭活疫苗对H5N1亚型7.2分支病毒的攻毒保护性研究

为有效防控2006年以来出现的H5亚型7.2分支禽流感病毒(AIV)引起的免疫鸡群高致病性禽流感(HPAI)的流行,我们构建了重组AIV Re-4疫苗株,研制出含有重组AIV Re-4株的H5亚型二价系列灭活疫苗,并在我国北方地区使用,有效地控制了其流行。2012年我国北方地区再次出现7.2分支病毒引起的HPAI疫情。为评估现有H5亚型二价系列灭活疫苗对该分支病毒的免疫保护效力,本研究首先通过SPF鸡进行免疫攻毒试验评估。结果表明,分别以每羽份(0.3 mL/只)的Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫3周后针对重组AIV Re-4株的HI抗体均达到8 log2以上;经鼻腔接种7.2分支AIV CK/NX/2/12株(100 LD50)攻毒后,免疫鸡均获得完全保护,即无任何临床症状和排毒现象,而对照组SPF鸡全部发病死亡。此外,以哈尔滨当地养殖场中免疫H5亚型AIV灭活疫苗的48只商品蛋鸡进行攻毒试验,结果显示,商品蛋鸡血清中针对重组AIV Re-4株HI抗体平均滴度为8.3 log2,采用相同方式攻毒后也获得完全保护。本研究结果表明,Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价灭活疫苗均能够对H5亚型7.2分支病毒的攻击提供良好的免疫保护效果。