一株鸡大肠杆菌1型及P型菌毛蛋白结构基因的克隆

据国外发表的人病性大肠杆菌１型及Ｐ型菌毛蛋白结构基因（ｐｉｌＡ、ｐａ;ｐＡ）＿序列,设计并合成 于ＰｉｏＡ及ｐａｐＡ保守区的２对引物。经ＰＣＲ从１株带有甘露糖敏感血凝特性（ＭＳＨＡ）及甘露９糖抵抗血凝特性（ＭＲＨＡ）的鸡致病性大肠杆菌（ＨＪ２０ｅ）染色体中扩增到大小分别在６５７ｂｐ、５４ｌｂｐ的２种阳性产物。通过核酸序列测定分别确证所扩增的ＤＮＡ片段分别为ｐｉｌＡ、ｐａｐＡ基因。经酶切、连接、转化     

地高辛标记P菌毛基因检测探针鸡大肠杆菌

用地高辛标记鸡大肠杆菌Ｐ型菌毛结构基因（ｐａｐＡ）制成核酸探针,作斑点杂交试验,检测２８个血清型鸡大肠杆菌５０个菌株与该探针的同源性。结果表明有５个菌株被检测为阳性,阳性率为１０％。     

蛋鸡鸡毒支原体与大肠杆菌混合感染的诊断及对产蛋率影响的分析

对湖北省某鸡场１１０只蛋进行了鸡毒支原体（ＭＧ）、滑液支原体（ＭＳ）血清平板凝集试验（ＳＰＡ）具有明显临床症状的鸡（眶下窦炎，呼吸困难，罗音等）均为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（５４／５４）同舍６０只无症状鸡中有４６只为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（７６．６％）对４只病鸡及４只ＭＧ－ＳＰＡ阴性健康鸡进行了支原体及细菌的分离鉴定。结果从３只病鸡中分离到鸡毒支原体，从２只病鸡分离到大肠杆菌Ｏ２血清型，证明为鸡毒支原体与大肠杆     

蛋鸡鸡毒支原体与大肠杆菌混合感染的诊断及对产蛋率影响的分析

对湖北省某鸡场１１０只蛋进行了鸡毒支原体（ＭＧ）、滑液支原体（ＭＳ）血清平板凝集试验（ＳＰＡ）。具有明显临床症状的鸡（眶下窦炎、呼吸困难、口罗音等）均为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（５４／５４），同舍６０只无症状鸡中有４６只为ＭＧ－ＳＰＡ阳性（７６．６％）。对４只病鸡及４只ＭＧ－ＳＰＡ阴性健康鸡进行了支原体及细菌的分离鉴定。结果从３只病鸡中分离到鸡毒支原体，从２只病鸡分离到大肠杆菌Ｏ２血清型，证明为鸡毒支原体与大肠杆菌的混合感染。在同等饲养条件下，对检测的病鸡、外表健康阳性鸡、健康阴性鸡分开饲养，并记录１８天的产蛋情况。结果，病鸡组产蛋率为１４．１１％，健康阳性鸡为５３．３５％，健康阴性鸡为７０．１７％，三组差异极显著。健康阴性鸡组产蛋率明显高于健康阳性鸡组和病鸡组。说明在隐性感染鸡群，即使未发病，也会给生产带来不可忽视的损失。     

用双抗体夹心ELISA法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究

应用鸡病毒性关节炎病毒Ｕ．ＣｏｎｎＳ１１３３株，建立了检测鸡病毒性关节炎病毒抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。用该法检测三组接毒鸡的关节液，接毒后３天即可检出阳性，阳性率为５８．３％；发病严重的４～１１天阳性检出率达９５７％，１４天阳性率为５０％；１７天阳性率为３１．３％；２０天以后则全部为阴性。用该法对大肠杆菌（Ｅ．ＣｏＬｉ）、葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、败血支原体（ＭＧ）、滑膜支原体（ＭＳ）、新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、传染性脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）进行检测，结果均为阴性。试验表明，我们建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，能早期、特异、敏感地检出鸡病毒性关节炎病毒抗原，从而解决了对该病早期诊断及类症鉴别带来的困难。     

肉鸡大肠杆菌病药物治疗比较试验

选用氟哌酸（ＦＰＡ）、氯霉素（ＣＭＴ）、强力霉素（ＤＯＣ）、庆大霉素（ＧＥＮ）、卡那霉素（ＫＡＮ）、呋喃唑酮（ＦＵＲ）、磺胺甲基异恶唑（ＳＭＺ）等７种药物，对肉鸡大肠杆菌病进行分组治疗，试验鸡数５７００只，分１９组。试验结果表明：肉鸡大肠杆菌病的临诊治疗效果与药敏试验结果基本一致；内服用药的疗效与其吸收性相关；ＦＰＡ、ＣＭＴ、ＤＯＣ的适宜治疗剂量分别为５０ｐｐｍ、７５０ｐｐｍ、７５ｐｐｍ。     

产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA探针的制备及应用研究

用纯化的产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６）病毒（Ｈ９１毒株）悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现１条分子量较大、背景清晰的核酸带。用ＢａｍＨＩ酶消化产生４个片段，大小分别为１７ｋｂ、１０ｋｂ、４．０ｋｂ和２．０ｋｂ。将其中的２．０ｋｂ片段克隆进ｐＵＣ１８ＤＮＡ载体中，重组质粒ＤＮＡ用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，在ｄｏｔｂｌｏｔ中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ、鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）ＤＮＡ、ＳＰＦ鸡基因组ＤＮＡ等核酸反应，只与３株ＥＤＳ病毒（ＥＤＳ标准毒株ＡＶ－１２７、ＥＤＳＨ９１毒株和从健康鹅体中分离的ＥＤＳＹ８１毒株）ＤＮＡ呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后２４ｈ即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出ＥＤＳ病毒ＤＮＡ，在感染后３５ｈ仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用ＳＰＦ鸡胚分离病毒，并用ＨＡ和ＨＩ试验检测分离病毒的特异性；在感染过程中，同时检测了血清中ＨＩ抗体的消长情况。结果表明，人工感染鸡排毒至少可以维持２个月左右，而且血清中ＨＩ抗体即使很高，也不能阻止感染鸡的排毒。     

Bio—MOS复合剂对仔猪大肠杆菌性下痢的防治

为了探索Ｂｉｏ－ＭＯＳ复合制（内含Ｂｉｏ－ＭＯＳ、氟哌酸或柠檬酸）对仔猪大肠杆菌性下痢的防治效果，进行了初生仔杜♂」１２０头（选自１５窝），随机分成４组。其中１个空白组３个处理组。各处理组分别口服ＭＯＳ商品制剂Ｂｉｓ－ＭＯＳ（美国Ａｌｌｔｅｃｈ公司生产），Ｂｉｏ－ＭＯＳ＋氟哌酸，Ｂｉｏ－ＭＯＳ＋５％柠檬酸，空白组则口服同体积的蒸馏水，试验期２８ｄ。结果表明，初生仔猪添加Ｂｉｏ－ＭＯＳ，可明显提高仔猪的日增重（Ｐ〈０．０５），降低腹泻发生率（Ｐ〈０．０５），而且Ｂｉｏ－ＭＯＳ与氟哌酸或柠檬酸配合使用对哺乳仔猪大肠杆菌性下痢的防治作用更佳。     

双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病

作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１～７天，２２～２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＴ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＦＰＡ、ＣＭＴ－ＣＭＴ各试验组的存活率分别为９２．８％、８７．６％、９７．２％、９６．４％、９５．８％、８９．６％、９４．６％、９６．２％、８８．４％。对照组的存活率７９．４％。     

动物类人乙型肝炎的调查

作者采用人的乙型肝炎ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒检测动物的乙型肝炎。结果ＨＢｓＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．３％（１／４３）；肝浸液４３份，阳性率为２７．９％（１２／４３）；肌浸液４３份，阳性率为９．３％（３／４３）；鸡血清７２份，阳性率为１２．５％（９／７２）；牛奶３７份，阳性率为１０．８％．ＨＢｅＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．８％（２／７２）。其结果表明黄牛，鸡，奶牛均感染类人乙型肝炎病毒     

云南省楚雄彝族自治州鸡主要传染病的调查

对采自云南省楚雄彝族自治州楚雄，双柏，婉安，元谋４县（市）的３８７份鸡血清进行新城疫（ＮＤ），禽霍乱（ＦＣ）、鸡白痢（ＳＰ）、鸡马立克氏病（ＭＤ）鸡痘（ＦＰ），鸡腺病毒病（ＣＥＬＤ），鸡白血病（ＡＬＤ），鸡传染性支气管炎（ＩＢ）、鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）、鸡传染性鼻炎（ＩＣ）、禽脑脊髓炎（ＡＥ）共１１种病的血清学调查，查出除ＡＬＤ外的１０种病，其阳性率分别为３７．２１％、９．８３％、１０．３４％     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

地高辛标记大肠杆菌1型菌毛结构基因核酸探针对鸡大肠杆菌分离株的检测

将PCR扩增的鸡大肠杆菌 1型菌毛蛋白结构基因 (pilA)用地高辛标记成核酸探针与分属 2 8个血清型的 50个鸡大肠杆菌分离株进行斑点杂交 ,阳性率达 84% ,用甘露糖敏感血凝试验 (MSHA)检测阳性率为 72 % ,表明核酸杂交比MSHA法更敏感。     

荒漠猫血液蛋白质和酶多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对５只荒漠猫（Ｆｅｌｉｓｂｉｅｔｉ）血液中的血红蛋白（ＨＢ），运铁蛋白（ＴＦ），亲血色蛋白（Ｈｐ）以及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），淀粉酶（ＡＭＹ），酯酶（ＥＳ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的多态性进行了研究。结果发现，被检荒漠猫的ＴＦ，Ｈｐ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｓ－ＥＳ和Ｓ－ＡＬＰ共５个基因座存在多态性，ＨＢ，ＲＢＣ－ＡＭＹ，Ｓ－ＡＭＹ，Ｓ－ＬＤＨ，ＲＢＣ－ＥＳ和ＲＢＣ－ＡＬＰ共６个基因座为单态，表明荒漠猫的血液蛋白质和酶具有颇大的遗传变异性     

双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病

作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１￣７天，２２￣２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＶ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－Ｄ     

MD疫苗免疫雏鸡vMDV攻击后体液免疫球蛋白含量的变化

本实验以马立克氏病（ＭＤ）三价苗（ＳＢ＿１＋８１４＋ＨＶＴ）和ＨＶＴ疫苗免疫１日龄肉用雏鸡，１５日龄时腹腔注射马立克氏病强毒（ｖＤＭＶ）进行攻击，在攻毒后５、２５、４５和７５天用间接ＥＬＩＳＡ法测定实验雏鸡血清、泪液、气管液、胆汁和肠液ＩｇＧ、ＩｇＭ和ｌｇＡ含量的动态变化，结果发现免疫雏鸡强毒攻击后，其血清、泪液和气管液的ＩｇＧ、ｌｇＭ和ＩｇＡ含量显著高于感染对照鸡，胆汁和肠液中ＩｇＡ以及ＩｇＧ、ＩｇＭ显著高于感染对照鸡，其中三价菌免疫鸡的３种免疫球蛋白含量明显高于ＨＶＴ免疫鸡；表明ＭＤ强毒攻击后，免疫雏鸡全身和消化道、呼吸道局部的体液免疫应答显著增强，三价苗免疫鸡的体液免疫反应明显高于ＨＶＴ免疫鸡，并与其较高的免疫保护率相关。     

鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定

１９份鸡传染性支气管炎（ＩＢ）可疑病料通过ＳＰＦ鸡和鸡胚感染试验、血凝（ＨＡ）试验、气管环培养（ＴＯＣ）感染试验、单克隆抗体（Ｍａｂ）ＥＬＩＳＡ和电镜形态学观察，初步证明其中１３份病料含ＩＳ病毒（ＩＢＶ）．在用其中９份接种８～９周龄ＳＰＰ鸡进行的发病试验中，全部呈现临床症状，其中３份引起病死亡率（６０～８０％），接种后５周从存活鸡采血作ＩＢＶ血凝抑制（ＨＩ）试验，结果均为阳性．     

用鸡气管上皮细胞粘附─间接ELISA评价鸡源大肠杆菌致病性

用鸡气管上皮细胞粘附＿间接ＥＬＩＳＡ评价鸡源大肠杆菌致病性恽时锋（南京军区南京总医院动物实验科２１００２）郑明球蔡宝祥（南京农业大学动物医学院）采用１日龄鸡气管上皮细胞作为抗原包被ＥＬＩＳＡ板，分别用大肠埃希氏菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）单因子血清与鸡源Ｅ．ｃ...     

棘球蚴囊液抗原A和B在酶联免疫吸附试验中的应用比较

用醋酸缓冲液和４０％饱和硫酸铵边续沉淀法从绵羊棘球囊液（ＳＨＣＦ）中得到部分纯化抗原（ＳＰＰＣＦ），并从中分离了抗原Ａ和抗原Ｂ，分别用单克隆抗体反向间接血凝试验（Ｍ－ＲＰＨＡ）、单克隆抗体双扩散试验（Ｍ－ＤＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）进行了鉴别，表明自制的三株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）均识别ＳＨＣＦ、ＳＨＣＦ、ＳＰＰＣＦ及抗原Ｂ，而不识别抗原Ａ；用ＥＬＩＳＡ对阳、阴性血清检测，ＳＰＰＣＦ、抗原     

应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验快速检测鸭肝炎病毒的研究

用提纯的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）免疫家兔制备高免血清，常规方法提取ＩｇＧ，与１％葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）阳性菌悬液混合，以ＰＨ７．２０．２ｍｏｌ／ＬＰＢＳ作缓冲液，制成鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）ＳＰＡ协同凝集试验（ＳＰＡ－ＣｏＡ）诊断试剂，同时制备阴性对照试剂。用ＳＰＡ－ＣｏＡ检测人工感染致死的雏鸭肝脏、含ＤＨＶ强毒的鸭胚液、适应鸡胚的疫苗毒鸡胚尿囊毒的检出率均为１００％。用ＳＰＡ－ＣｏＡ检测强毒时，样品