人脂联素基因的克隆及序列比较分析

目的:克隆人脂联素基因,为进一步重组蛋白表达和生物活性等基础研究与临床应用奠定基础。方法:应用RT-PCR法自人大网膜脂肪组织的总RNA中克隆人脂联素全长基因,采用T-A克隆法重组到pMD18-T中,通过菌液PCR鉴定阳性克隆后,测序鉴定。并采用聚类分析等对其序列进行比较分析。结果:克隆人脂联素基因全长为735bp,并登录GenBank(登录号:EU420013);其编码244个氨基酸,理论分子量为26413.64Da,预测的等电点为5.42。邻接法聚类分析表明,人脂联素与已报道的其它哺乳动物的脂联素相似性达83%～96%。结论:成功地克隆了人脂联素基因全长序列,人脂联素与已报道的其它哺乳动物的脂联素序列具有很高的同源性。     

葡萄霜霉病预测模型及预警技术研究进展

霜霉病是危害葡萄最严重的病害之一,目前采用的主要防治手段是喷施化学农药,但其用量过多也带来许多严重问题。若要减轻农药污染,就必须对病害进行精确的预测预报,以便确定最合理的农药使用时机和使用量。在此,从病害流行系统的监测、因子选择、结构及应用等方面综述了利用农业气象模型预测葡萄霜霉病的研究应用进展,并对其存在的问题及发展前景作了讨论。     

不同酿酒葡萄品种对霜霉病的抗性分类

在同一试验园中,于葡萄霜霉病盛发期(7~9月份),对16个不同葡萄品种的抗病性进行了室内离体叶圆片接种鉴定,并将鉴定结果进行聚类分析。结果表明,16个品种可划分为4类。在谱系图上,抗病性相同的品种大致划分在同一个类中,其中第1类为抗性稍强品种,有白比诺、灰比诺和赛美蓉,病指范围为9.31~17.27;第2类为抗性中等品种,由白长相思和神索等8个品种组成,病指在23.87~36.47;第3类是稍感病品种,包括赤霞珠等4个品种,病指在41.74~52.13;第4类是感病品种,只有品丽珠1个,病指高达64.90。     

主要栽培甜瓜品种抗霜霉病试验初报

采集田间自然发病的甜瓜霜霉病病原菌孢子,通过孢子悬浮液喷雾法对海南常用的7个甜瓜品种宝丰黄金、金帝王、新红心脆、金蜜十、金蜜六、金辉一号、黄皮9818苗期进行抗霜霉病鉴定试验。结果表明宝丰黄金、金帝王、金蜜六为中感品种;新红心脆、金蜜十、金辉一号、黄皮9818为中抗品种。平均发病指数最低的是新红心脆．为48．15;平均发病指数最高的是宝丰黄金,为75．88。     

葡萄品种霜霉病抗性的田间自然鉴定

葡萄霜霉病(Downy mildew)是发生最为广泛、危害最为严重的真菌病害之一.于葡萄霜霉病发病盛期,对在陕西省杨凌区新引进栽培的不同葡萄新品种霜霉病抗性进行田间自然鉴定,摸清不同葡萄品种抗病性,为葡萄霜霉病的田间防控和葡萄抗病育种提供理论依据.通过对新引进的38个葡萄品种叶片的田间发病情况统计,并对霜霉病的抗病指数...     

黄瓜霜霉病苗期与成株期抗性相关分析

[目的]为高抗霜霉病黄瓜品系的选育奠定基础。[方法]以自交系S94和S06及其构建的224个F6重组群体为材料,研究黄瓜苗期人工接种病情指数和成株期田间自然发病病情指数的相关性。[结果]苗期出现病斑较多的家系,成株期感病情况更为严重。通过抗性鉴定,获得17份抗病家系和16份感病家系。春、秋季苗期人工接种的病情指数与成株期自然发病的病情指数均达到极显著水平,呈正相关。因此,可利用苗期人工喷雾接种的辅助手段对黄瓜群体进行快速鉴定,评价其霜霉病抗性,筛选出优良的抗性资源,从而缩短育种周期。[结论]适宜条件下,利用苗期人工接种可快速鉴定出黄瓜群体中抗霜霉病的材料。     

山羊SDHD基因cDNA编码序列的克隆与分析

利用NCBI中GenBank里查询到已登录的人、猪、牛和绵羊的SDHD mRNA序列,通过多重同源比较,从而获得高度保守区域序列,设计了同源引物,并首次对山羊SDHD编码序列进行了分子克隆。经过PCR扩增和测序,获得山羊SDHD基因共4段cDNA序列,分别为:451 bp4、20 bp5、29 bp和698 bp。所获得的四段序列测序结果经La-sergene7.0软件SeqMan拼接后,获得一条1238 bp长的cDNA序列。在GenBank数据库中进行BLAST/nr比对,发现其与绵羊、牛、猪和人相应序列相似性分别达98%、97%、85%和81%。用NCBI的ORF Finder软件对已经克隆的山羊SDHD基因cDNA进行开放阅读框分析,发现该序列包含一个480 bp的开放阅读框,编码159个氨基酸残基,计算机分析表明(Compute pI/Mw tool),该蛋白的分子量约为17 224.11 Da,等电点为8.92。通过DNAMAN软件分析发现,山羊SDHD蛋白保守性很高,其与绵羊、牛、猪和人SDHD蛋白在氨基酸序列上的相似性分别达到97%、96%、87%和85%。此山羊SDHD基因cDNA序列和SDHD蛋白质序列已于2010年1月31日登录在NCBI的GenBank上,登录号为GU338978和ADB92501。本项研究为进一步研究山羊的SDHD基因作为山羊肉品质性状候选基因,提供了相应的序列信息。     

黄瓜霜霉病及其分子标记辅助育种研究

综述黄瓜霜霉菌特征特性、生理小种、霜霉病菌种的保存方法以及黄瓜霜霉病抗性遗传规律、抗病育种等方面的研究进展,并分析了当前生产和研究中存在的问题,提出了今后研究方向。     

黄瓜基因组中抗霜霉病候选基因的生物信息学及其表达特异性

【目的】寻找黄瓜抗霜霉病基因,研究黄瓜抗霜霉病机制。【方法】利用拟南芥和甜瓜抗霜霉病蛋白质序列,搜索黄瓜基因组数据库;通过生物信息学分析候选基因特征,以黄瓜抗霜霉病自交系M801-3-1为试材,分析候选基因在叶片组织中的表达状态。【结果】共获得187个黄瓜抗霜霉病候选基因;确定了候选基因染色体位置和排列特点、序列相似性特征以及系统进化关系;大部分黄瓜R基因在未接种霜霉病菌的抗病自交系和感病叶片组织中都有一定的表达量,在接种霜霉病菌后在抗病自交系M801-3-1中Csa001907和Csa002921表达量下调,感病自交系M302-3 中Csa001907和Csa002921变化不明显。【结论】在黄瓜基因组中存在185个与拟南芥抗霜霉病基因同源的R基因,2个与甜瓜的抗霜霉病基因At1和At2同源的eR基因,通过聚类分析这些基因可以分为6类,初步认定Csa001907和Csa002921为黄瓜抗霜霉病的R基因,这2个基因在叶片组织中有一定表达量,其表达量减少可诱发抗病黄瓜品种的抗病反应。     

苜蓿霜霉病病原及其生物学特性研究

[目的]对天水地区苜蓿霜霉病病原及生物学特性进行较为系统的研究。[方法]在苜蓿生长季节,观察和描述症状。采用悬滴法,研究温度、pH值和营养液对孢子囊萌发的影响,采用硫酸法控制小容器相对湿度测定湿度对孢子囊萌发的影响。[结果]经鉴定,苜蓿霜霉病病原为Peronospora aestivalis Syd,孢子囊萌发的适宜温度为15—21℃,最适温度为18℃;孢子囊在相对湿度100％时的萌发率为5．56％,相对湿度低于95％时不能萌发;孢子囊萌发的适宜pH值为6．15～7．69,最适pH值为6．91;1：5的苜蓿叶片汁液对孢子囊的萌发有较强的刺激作用。[结论]该研究为苜蓿霜霉病的防治提供理论依据。     

环境因素对谷子白发病的影响相关性研究

通过对近5 a榆林地区不同县区谷子种植出苗期(5月份)降雨量、5 cm平均地温、茬口等条件下白发病发病率进行统计分析,研究结果表明,谷子白发病与5月份降雨、地温相关性显著,随着雨温系数降低,谷子白发病发病率均明显增加,三地中雨温系数最高2.57降为0.51时,白发病发病率由4%增长至28%。正茬田块白发病发病率明显低于重茬田、迎茬田的白发病发病率,仅为0～6%,重茬田高达51.95%。     

水稻霜霉病的发生与防治

水稻霜霉病的发生与环境因素、栽培情况等有关。在秧田后期和本田前期发病重,大田病株多从秧田传入;秧田水淹、暴雨或连阴雨发病严重,淹水后15～20 d发生,低温有利于发病。农业防治措施包括选择地势较高地块作为秧田,建好排水沟;发现病株即时拔除,集中作堆肥或烧毁;增施有机肥,并做到平衡施肥,防止偏施氮肥;水旱轮作;避免秧田及本田灌深水或淹水传病。化学防治措施包括用0.1%硫酸铜溶液浸种6～8 h ;播种后,用硫酸铜1 g/m^2的稀释液浇施于秧田土面;并在发病早期喷药保护。     

萝卜STP13.2基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术克隆了萝卜（Raphanus sativus L.）STP13.2基因CDS序列,并对其进行测序和生物信息学分析。结果表明：RsSTP13.2 CDS序列全长1599 bp,编码532个氨基酸残基,分子式为C2678H4191N685O713S21。相对分子量为58.1 kD,理论等电点为9.29,脂肪指数为108.12,是稳定蛋白。RsSTP13.2蛋白包含12个跨膜结构,预测其可能定位于细胞膜;系统进化分析表明其与白芥、甘蓝型油菜和白菜等多个不同物种具有较高的同源相似性。本研究为下一步STP13.2基因的功能和表达调控机制研究奠定了基础。     

马铃薯StKN1基因的cDNA克隆与分析

植物同源异型枢基因(Homeobox gene,HBG)广泛存在,是一类重要的转录因子编码基因,在生物进化中具有很强的保守性。利用GenBank登录的拟南芥、苜蓿、豌豆、烟草、番茄等同源异型枢基因保守区序列设计简并引物,通过RT-PCR技术,从马铃薯萌动的幼芽中获得了一个homeobox的cDNA基因,命名为StKN1,GenBank登录号为DQ494855.1。该基因片段长971 bp,经序列分析比对,与其他植物的HBG具有很高的序列相似性。系统进化分析将StKN1基因归入homeobox KNOX基因家族。     

防治葡萄霜霉病的药剂筛选试验

比较了几种药剂(剂量)对葡萄霜霉病的防治效果。结果表明:72.2%宝力克800倍液,18%安克锰锌1 000倍液,72%杜邦克露600倍液,72%霜疫克星750倍液、72%甲霜灵锰锌600倍液对葡萄霜霉病的防治效果良好,显著优于传统药剂25%甲霜灵500倍液。其中72.2%宝力克800倍液效果尤佳。     

棚栽黄瓜霜霉病的发病特点及其化学防治措施

试验结果表明:黄瓜霜霉病在田间随着时间的推移,病株率逐渐增加,病株率增加与调查的日期值呈显著性线性相关,相关式为y=0.9722x-38081;病叶率与调查的日期值也有显著性线性相关,相关式为y=1.209x-47370,病株率与病叶率同步性增加。霜霉病的病情指数随着时间的推移而有所增加,但与当时的气候状况密切相关。     

Cloning and Sequence Analysis of cDNA Encoding MRJP3 of Apis cerana cerana

By screening the worker （Apis cerana cerana） heads cDNA library using a fragment of the mrjp3 gene of Apis cerana as probe, 120 positive clones were obtained. The clone containing A. cerana cerana MRJP3 （AccMRJP3） cDNA was selected. Based on the sequencing of the inserts of the positive clone, a sequence of AccMRJP3 cDNA which is 1 887 bp long including a poly （A） tail was obtained. The AccMRJP3 cDNA encompassed an open-reading frame （ORF） with 1 779 bp encoding 593 amino acids. The un-translated regions （UTR） of the 5′ end and 3′end are 46 bp and 160 bp in length, respectively. Similar to AmMRJP3 and AdMRJP3, the putative AccMRJP3 also has a repetitive region. The comparison of the repetitive region of AccMRJP3, AmMRJP3 and AdMRJP3 shows some differences between them.     

中华蜜蜂mrjp3基因cDNA的克隆及序列分析

 以东方蜜蜂（Apis cerana）mrjp3基因部分片段为探针筛选中华蜜蜂（Apis cerana cerana，简称中蜂）8日龄工蜂头部cDNA文库，得到120个阳性克隆。对这些阳性克隆进行进一步的筛选和序列测定，获得含有中蜂MRJP3 (AccMRJP3)cDNA的阳性克隆，对阳性克隆的插入片段进行测序，得到AccMRJP3的cDNA序列全长。中蜂MRJP3的cDNA全长为1 987 bp（包括10 bp长的poly A尾巴），包含一个长1 779 bp，编码593个氨基酸的ORF，在5'端和3'端各有一个长46 bp和160 bp的非编码区。类似于西方蜜蜂（Apis mellifera）和大蜜蜂（Apis dorsata），由AccMRJP3 cDNA编码的氨基酸序列也存在一个长片段重复区。但比较结果显示中蜂、西方蜜蜂、大蜜蜂MRJP3重复区之间存在一定差异。     

不同整形方式对赤霞珠霜霉病和炭疽病的影响

为了探索胶东半岛地区葡萄病害与葡萄整形方式和架式的关系,对酿酒葡萄赤霞珠进行4种架式改造:A为"V"型架,干高50 cm,结果部位约集中在60 cm;B为"V"型架,干高80 cm,结果部位约集中在90 cm;C为单篱架,干高50 cm,结果部位约集中在60 cm;D为单篱架,干高80 cm,结果部位约集中在90 cm;以多主蔓扇形为对照。结果表明,与对照相比,A、B、C、D 4种整形改造架式对减轻或控制霜霉病有一定的作用;随着葡萄浆果成熟度增大,4种整形改造处理区和对照区果实炭疽病病害都在加重,但加重的程度不同;在浆果成熟后期,炭疽病的严重程度依次为BACCKD,D架式对减缓该地区炭疽病有一定作用。     

竹醋液对黄瓜霜霉病防治效果的研究

以“津优30”黄瓜为供试作物,主要通过室内抑菌试验与田间防治试验相结合的方法,探讨竹醋液对黄瓜霜霉病的抑制作用。结果表明,100倍竹醋液可以有效地抑制黄瓜霜霉病孢子的萌发,防治田间黄瓜霜霉病,其抑菌及防治效果与72%克露600倍相当。