高效液相色谱法(HPLC)双柱串联方式测定饲料中维生素A和维生素D3

本文采用高效液相色法、Resolbe C18(150mm×3.9mm,5μm)与Novapak C18(150mm×3.9mm,4μm)双柱串联方式测定饲料中的维生素A和维生素D3.以甲醇/水(95/5)为流动相,检测波长设定维生素A在325mm、维生素D3在265mm.本方法维生素A和维生素D3精密度的变异系数均小于7.0%,回收率在90%～110%之间.因维生素A和维生素D3同属脂溶性维生素,所以二者前处理的原理和步骤基本一致.维生素A较好分离,一般采用单柱分离即可.维生素D3的检测灵敏度低,经皂化提取后,提取液中的干扰物也较多,故维生素D3较难分离.为了达到分离度好的效果,一般采用先纯化后分离的方法,测定步骤较为繁杂.所以测定样品中二者的含量通常需进样2～3次.本文由于采用了双柱串联的方式,提高了柱效,省略了纯化维生素D3的步骤,一次进样就使得二者都能得到较好的分离,也使得饲料分析工作者可以较省时省力地快速测定多个饲料样品成为可能.但同时由于双柱串联增加了死体积,分析时间加长,泵的工作压力也大.因此在使用本文方法时应综合考虑实际因素,以达到成本、工作量以及分离效果之间的适当组合.     

HPLC测定维生素ADE注射液中三种维生素的含量

采用HPLC建立了兽药维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的含量检测。采用C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相A、乙腈-乙醇-水(60∶25∶5)为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.5 m L/min,检测波长为265 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果表明,在此色谱条件下,维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的分离度良好,分别在60.96~1219.20μg/m L、2.56~51.20μg/m L和300.23~6004.60μg/m L范围内线性关系良好(r20.999)。按外标法以峰面积计算进行检测,维生素A、维生素D3和维生素E的平均回收率分别为99.6%、101.1%和99.0%,RSD均小于1.0%;平均重复性分别为105.7%、106.8%和102.3%,RSD均小于1.0%;中间精密度的RSD均小于0.5%;稳定性的RSD均小于1.0%;耐用性中选择流动相A与B变化为17∶83、流速为1.5 m L/min时,在一定范围内三种组分的含量基本稳定;柱温为25℃时,可避免维生素降解。说明该方法简单、快速,适用于维生素ADE注射液中三种维生素含量的测定,具有分离效果好、回收率高和稳定性好的特点。     

高效液相色谱法测定鱼样中的维生素A、维生素D3和维生素E

本研究旨在探讨采用一次进样同时检测鱼体组织中的维生素A、维生素D3和维生素E的方法。以石油醚提取鱼体组织中的脂溶性维生素,用VARIAN Res Elut 5μCl8 90A色谱柱,流动相为甲醇-水,流速为1.0 mL/min,对提取物中的3种脂溶性维生素进行了良好分离。结果表明,在292 nm波长下,维生素A、维生素D3和维生素E分别在0~15、0~10和0~20μg/mL范围内的进样量与峰面积的线性关系良好。各维生素的检测限:维生素A为0.8×10-3ng,维生素D3为0.06×10-3ng,维生素E为9.0×10-3ng。以石油醚提取鱼体组织中的脂溶性维生素,采用反相高效液相色谱仪在波长292 nm处可同时对鱼体组织中维生素A、维生素D3和维生素E进行较好的分离和测定。     

利用酶解法测定复合维生素溶液中维生素D_3含量的研究

建立碱性蛋白酶-高效液相色谱法测定复合维生素溶液中维生素D3的含量。利用碱性蛋白酶的方法处理样品,并采用EcoSic HPLC CoumwODS,C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm)分离,检测波长280 nm,流动相为甲醇-水(95∶5)等高效液相色谱条件检测样品中维生素D3的含量。结果:样品中维生素D3与其他组分分离良好,维生素D3质量浓度在500～5 000 U/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程A=52.59C-3.28,r=0.999 8(n=6);平均回收率为99.9%,RSD=0.97%(n=5)。研究表明本试验建立的方法简便、快捷,结果准确、可靠、重现性好,可作为企业控制生产过程中液体复合维生素质量控制的方法之一。     

利用酶解法测定复合维生素溶液中维生素A含量的研究

建立碱性蛋白酶-高效液相色谱法测定复合维生素溶液中维生素A的含量。利用碱性蛋白酶的方法处理样品,并采用EcoSic HPLC Coumw-ODS,C18柱(4.6mm×200mm,5μm)分离,检测波长为326nm,流动相为甲醇+水(95+5)等高效液相色谱条件检测样品中维生素A的含量。结果显示,样品中维生素A与其他组分分离良好,维生素A浓度在120～600IU/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率在99.9%(n=5),RSD为1.0%。本方法简便、快捷,结果准确、可靠、重现性好,可作为企业控制生产过程中复合维生素溶液质量的方法之一。     

UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素的含量

建立了UPLC-MS/MS同时测定配合饲料中6种水溶性维生素(VB1、VB2、VB3、VB6、VB7、VB12)的方法。饲料样品中水溶性维生素用乙酸铵水溶液(p H=4.0)超声提取,吸取上清液过膜后,供UPLC-MS/MS检测。各待测物用Capcell PAK ADME(2.1 mm I.D×150 mm,3 um)色谱柱进行分离,采用50 mmol乙酸铵-甲醇作流动相,梯度洗脱,串联质谱采用电喷雾离子源正模式,在多反应监测(MRM)模式下对6种水溶性维生素进行测定。结果表明,6种维生素在1~20μg/l范围内线性关系良好,相关系数为0.996~0.999。空白加标浓度为10~1 000μg/kg,这6种水溶性维生素的加标回收率为83.5%~106.4%,相对标准偏差(n=6)为3.5%~9.1%,上述饲料中6种维生素的检出限为0.05~1.97μg/kg,定量下限为0.16~6.5μg/kg。方法快速准确、经济实用,符合法规要求,可满足日常检测的需要。     

高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素D3微粒含量

本试验介绍了用正相高效液相色谱法快速测定维生素D3微粒含量的方法。采用AlltimaSilica4.6mm×150mm色谱柱分离,正己烷99.6%和正戊醇0.4%作流动相,在紫外265nm处检测,外标法定量。结果表明,该方法回收率在99%左右,变异系数在1.3%以内。     

高效液相色谱法测定维生素E粉含量

用高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量。采用EclipseXDBC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(98∶2,V∶V)为流动相,流速为1.2mL/min,检测波长为285nm,柱温为25℃。在此色谱条件下,维生素E在0.104￣0.602mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,平均回收率为100.3%,RSD为0.72%。本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E粉中维生素E含量测定。     

正相液相色谱法测定饲料添加剂天然维生素E中的生育酚和生育三烯酚的含量

天然维生素E因具有促进动物生长、提高肉品质等功能,已被逐步用于宠物及畜禽饲养,但行业中尚无规范该类饲料及饲料添加剂产品的标准及检测方法。本研究旨在建立采用正相液相色谱-紫外检测器(NPLC-UV)测定饲料添加剂中8种天然维生素E含量的分析方法。样品经甲醇浸润后,以乙酸乙酯/正己烷(3∶97,V/V)为提取溶剂在室温下进行超声浸提。使用Kromasil 60-5 diol(4.6 mm×150 mm)色谱柱进行分离,正庚烷/四氢呋喃(100∶4,V/V)等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,紫外检测波长为292 nm。结果表明:生育酚和生育三烯酚含量在0.2～50.0μg/mL时线性关系良好(R2≥0.999 0),方法定量限为0.01%,加样平均回收率为81.3%～109.8%,相对标准偏差(RSD)小于7.9%。通过对实际样品测定,该方法操作简单,结果准确可靠,有助于规范天然维生素E饲料产品市场。     

反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯的含量

建立了反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯含量的方法.色谱柱为C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇;检测波长326 nm.维生素A乙酸酯浓度在0.05～100 IU/mL范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9.2个不同浓度的添加回收率分别为93.6%和98.3%.     

高效液相色谱法测定饲料添加剂25-羟基维生素D_3含量的方法研究

本研究旨在建立用高效液相色谱法测定饲料添加剂25-羟基维生素D3含量的分析方法。样品加水超声处理,将25-羟基维生素D3从包埋的基质中释放出来,用甲醇溶解后,提取液经液相色谱分离,在265 nm处检测,用外标法定量25-羟基维生素D3和预25-羟基维生素D3的量。该方法操作简单,结果准确可靠,可用于饲料添加剂25-羟基维生素D3含量的测定。     

高效液相色谱法快速测定甘加藏羊肉中VA含量的研究

建立了用高效液相色谱法测定甘加羊肉中维生素A含量的方法,肉中的脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离,经乙醚萃取后,采用ODS-C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,流动相为甲醇(100%),流速0.8 ml/min,柱温25℃,用紫外检测器在波长290 nm下定量测定。结果表明:甘加羊肉中维生素A的平均检出含量为11.690 6μg/100g,平均回收率为89.99%(RSD=0.06%),含量高于土种羊肉。     

意蜂雄蜂前蛹和蛹维生素A和D3含量的比较

采用高效液相色谱法测定了意蜂雄蜂前蛹（卵起第11日）和蛹（卵起第22日）的维生素A和D3含量。结果显示：意蜂雄蜂前蛹和蛹的维生素A含量分别为44.536μg/g和43.106μg/g;维生素D3含量分别为139.9056μg/g和132.0613μg/g;雄蜂前蛹和蛹维生素A和D3的含量差异均不显著（P〉0.05）。     

测定饲料中维生素A和维生素E含量方法的研究

本文旨在建立一种能同时准确测定饲料中维生素A和维生素E含量的方法,试验将样品在碱性条件下65℃水浴超声皂化提取,冰乙酸调pH至中性,乙醇稀释后直接用高效液相色谱法(HPLC)进行测定。结果表明:维生素A在0.036~108IU/mL线性关系良好,相关系数为1.00000,检出限1000IU/kg,方法回收率为95.8%~98.8%,RSD为0.8%~4.4%(n=5);维生素E在0.6~125μg/mL线性关系良好,相关系数为0.99998,检出限15mg/kg,方法回收率为95.3%~102.2%,RSD为0.8%~4.2%(n=5)。本方法快速简便,适用于配合料、浓缩料、维生素预混料和复合预混料中同时准确测定维生素A和维生素E的含量,相对于国标法节省了大量的时间和试剂,可应用于日常大批量饲料检测中。     

用反相分配色谱法测定饲料预混剂中维生素K_3方法研究

维生素K_3,又称甲萘醌,参与动物肝内凝血酶原的合成,是防止缺乏凝血酶原症的特效营养成分。饲料中维生素K_3的检测尚无国家标准。国外有关高效液相色谱法测定维生素K_3在食品中含量,采用ODS作固定相,甲醇:醋酸:水为流动相,pH=3.0,测定结果色谱峰较宽,且ODS寿命缩短。我们改用甲醇:异丙醇:IM醋酸盐缓冲液作流动相(pH=6.0),收到了较好的分离效果。 1 仪器及材料 Waters HPLC M209型(日本产)、M510泵2台、M680自动梯度控制仪、U6K自动进样器、M490紫外可见检测器、M740数据处理机、ODS柱(3.9mm×300mm,5μm)、FOXY-200型HPLC制备仪(美国产)、DEEFAPAKC_(18)-100A(Waters产HPLC制备柱19mm×300mm)、旋转蒸馏器(上海产)。     

高效液相色谱法同时测定预混合饲料中维生素C、维生素B2及其磷酸盐

本研究建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定预混合饲料中维生素C、维生素B2及其磷酸盐形式维生素C-2-磷酸酯(VCP)、维生素B2-5-磷酸钠(VB2P)的方法。预混合饲料用1.5 mmol/L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液提取后,进行HPLC检测。采用Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以1.5 mmol/L四丁基硫酸氢铵缓冲溶液(p H=3.0)与甲醇作为流动相,梯度淋洗。在此色谱条件下,维生素C、维生素B2、VCP和VB2P的线性关系良好,检出浓度分别为3、1、1、3 mg/kg,定量限为10、5、5、10 mg/kg。应用该法测定了预混合饲料中维生素C、维生素B2、VCP和VB2P,平均回收率为81.5%~106%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。     

测定饲料添加剂中维生素A、D3、E含量的新方法

提出用充入氮气和放置皂化过夜的方法同时测定饲料添加剂中维生素A、D3、E的含量。在试样中加入抗氧化剂焦性没食子酸、乙醇和氢氧化钾溶液后充入氮气,在密封和避光的条件下放置24小时,使样品充分皂化。维生素经萃取和提纯后,用高效液相色谱仪进行分析。     

间接火焰原子吸收光谱法测定维生素B12粉含量

用火焰原子吸收光谱法间接测定饲料添加剂维生素B12粉中维生素B12的含量。该方法通过测定样品中的钴离子浓度计算维生素B12的含量。经试验,该方法在0.20～2.00μg/mL线性关系良好,r=0.9992;有机载体和无机载体中的维生素B12平均回收率分别为99.21%和98.98%,方法的检出限为0.061μg/mL。本法操作简便易行,适用于饲料添加剂维生素B12粉中维生素B12含量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中维生素D3

为建立一种快速测定饲料中维生素D3的超高效液相色谱-串联质谱检测方法,本研究优化了皂化和提取过程,增加了固相萃取柱净化,采用内标定量,旨在解决饲料中维生素D3检测过程中干扰严重无法准确定量、检测效率低和不适用饲料原料的问题.结果 表明:本方法回收率为70.1％～93.6％,批内相对标准偏差为3.8％～8.3％,定量限为...     

毛细管气相色谱法测定维生素E原料含量

用毛细管气相色谱法测定饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量.以正三十二烷为内标物,采用DB-1毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25um),FID检测器;氮气为载气;柱温为280～290℃,检测器温度为290～300℃;进样口温度为290-300℃;无分流进样.在此色谱条件下,维生素E和内标物正三十二烷分离良好,在0.994～4.013 mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9998,经方法评估函数的评价表明,方法不存在恒定系统误差和相关性系统误差,方法准确性较好.本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量测定.