鸭疫里默氏菌基因分型

在鸭疫里默氏菌 (RA)血清分型的基础上 ,以提取的 RA基因组 DNA为模板 ,进行 Rep- PCR扩增。根据扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图谱 ,将分属于 8个血清型的 4 0株 RA区分为 12个不同的基因型 ,不同血清型 RA的图谱有明显差异 ,相同血清型 RA的图谱也存在差异。这些结果显示 ,RA基因组中重复的基因外的回文结构可用于区别相同血清型的不同分离株 ;Rep- PCR作为一种实用的分子生物学方法 ,在分子流行病学研究中可对 RA分离株进行基因定型     

鸭疫里默氏菌研究进展

鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏菌引起的一种重要的鸭细菌病。由于该病分布的广泛性以及引起鸭的高死亡率、发育迟缓和淘汰率增加,给养鸭业造成巨大的经济损失。所以,对鸭疫里默氏菌进行深入研究,以便预防和控制、乃至最终消灭本病,有着重要的经济意义。论文从血清型、诊断方法、疫苗等方面概述了近年来鸭疫里默氏菌研究进展。     

鸭疫里默氏菌Ⅰ型整合子与耐药基因盒检测

为了明确整合子结构对鸭疫里默氏菌耐药性产生和传播的影响,根据已知的Ⅰ型整合子序列,应用PCR方法对22株临床分离菌株进行检测并测序分析。结果显示,22株(100%)菌均为Ⅰ型整合酶基因阳性,1株菌(4.5%)捕获了耐药基因盒aadA5,21株菌(95.5%)顺次捕获了耐药基因盒aac6-Ⅱ、catB3和aadA 1,证明了整合子结构是该菌耐药性传播的重要机制之一。     

番鸭源鸭疫里默氏菌大环内脂类药物的耐药基因检测与分析

为了解莆田市番鸭源鸭疫里默氏菌对大环内酯类药物的耐药性和相关耐药基因携带情况,对本实验室分离鉴定的49株番鸭源鸭疫里默氏菌菌株采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,提取菌株基因组DNA,采用PCR方法对大环内酯类药物的ermA、ermB、ermC、ermF、ereD等5种耐药基因进行检测,阳性产物送公司测序并对序列进行分析...     

鸭疫里默氏菌病的诊治

鸭疫里默氏菌病(鸭传染性浆膜炎),是由鸭疫里默氏菌感染引起的一种接触性、急性或慢性传染性疾病,是鸭、鹅、火鸡等多种禽类的常见的传染性疾病之一,规模养殖的禽群一旦染疫发病常以高死亡率给养鸭生产者造成巨大的经济损失;该病已经成为很多地区养鸭业的头号杀手.笔者长期从事养殖生产技术推广,对于规模场鸭疫里氏杆菌病的预防与控制,进行了一些有益的探索与实践.     

鸭疫里默氏菌的药物敏感性检测

小鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏菌引起的危害养鸭业最为严重的传染病之一，主要危害1～5周龄(尤其2～3周龄)的小鸭，该病在我国商品肉鸭场广泛存在，引起商品鸭死亡、消瘦、胴体淘汰、品质下降，死亡率5％～20％，给养鸭业造成了严重的经济损失。我国现阶段很大程度依靠药物对本病进行预防和治疗，     

福建省Ⅱ型鸭疫里默氏菌感染

鸭疫里默氏菌（ＲＡ）,即以前所称的鸭疫巴氏杆菌（ＰＡ）,主要侵害７～３５日龄的各种雏鸭,由该菌引起的鸭疫里默氏菌病已成为危害我省养鸭业的主要细菌性传染病之一,已给我省养鸭业的发展带来障碍。近些年来,从送检病例和现场调查中发现雏鸭病例中以心包炎、肝周炎...     

鸭疫里默氏菌的分离鉴定

采集福州郊区某番鸭场病死鸭的肝、脾、脑、心血,从中分离到1株细菌,经对分离菌进行培养特性、形态观察、生化鉴定及荧光抗体试验,确定为鸭疫里默氏菌。经人工感染试验,表明该菌对雏鸭有较强的致病力,致死率高达47%。     

鸭疫里默氏菌一个可能新型的鉴定

用玻片凝集试验、试管凝集试验和琼脂扩散沉淀试验，对13个鸭疫里默氏菌分离株进行了血清型鉴定。玻片凝集试验中，这些菌株只与8型抗血清发生强凝集反应，试管凝集试验中，其代表菌株C882与8型参考菌株之间仅存在单向低度交叉凝集反应，且与1～19型中的其他18个血清型参考菌株无可见的交叉凝集反应；用C882吸收可消除8型抗血清与C882等菌株之间的交叉凝集反应，但不影响8型抗血清的同源凝集反应和沉淀反应能力。琼扩试验中，C882与1～19型参考菌株之间不产生可见的交叉沉淀反应。沉淀反应模式表明，以C882为代表的13株细菌的热稳定抗原具有同一性。结果表明，13株待检菌株可能属于一个新的血清型。     

鸭疫里默氏菌分子生物学研究进展

鸭疫里默氏菌是造成雏鸭死亡最重要的病原菌之一,主要侵害2~6周龄雏鸭,严重阻碍了养鸭业的发展。作者从全基因组序列、基因分型、毒力因子、蛋白质组学、耐药基因及分子生物学检测等方面概述了鸭疫里默氏菌的分子生物学研究现状,为鸭疫里默氏菌病的防制提供指导和方向。     

鸭疫里默氏菌16S rDNA基因的单链构象多态性分析

鸭疫里默氏菌（Riemerella anatipestifer,RA）可导致较高的死亡率和淘汰率,其流行给我国养鸭业造成了巨大的经济损失.对该病的准确诊断依赖于细菌的分离和鉴定.以往鉴定RA时,常检测其培养特性、形态染色反应、生理生化特征、菌体的某些化学组成等表型指标,但RA常缺乏特定的表型特征,迄今还没有建立起选择性的培养基,不同学者检测RA生化反应的结果也不一致.此外,在表型上RA与某些细菌还很相似,因此,仅依据表型却不足以对RA做出准确鉴定,故建立检测RA的分子生物学方法十分必要.     

鸭疫里默氏菌16S rDNA基因的PCR-RFLP 分析

鸭疫里默氏菌（Riemerella anatipestifer，RA）是危害养鸭业的一个重要细菌。100年来，对该菌的分类和鉴定多依赖于培养特性、形态染色反应、生理生化特征、菌体的某些化学组成等表型指标。但是，RA常缺乏而不是拥有特定的表型特征，如在一些培养基上不生长、不发酵糖类等。不同研究者对RA的生化检测结果不尽一致，基于细胞脂肪酸等化学组成的分类也缺乏统一的判断标准，特别是RA在一些表型特征上与其他一些细菌既相似又不同，致使RA的分类位置长期未能确定，也导致在鉴定分离株时常缺乏足够的指标。     

鸭疫里默氏杆菌OmpA基因的克隆与表达

利用本实验室分离、鉴定并保存的鸭疫里默氏杆菌血清1型湖北云梦分离株（RA-YM）,根据GenBank上的序列设计了1对引物,用PCR方法扩增了RA-YM株的主要外膜蛋白OmpA基因,并克隆到pMD18-T载体,序列测定结果表明OmpA基因全长1152bp,序列同源性分析表明该基因相当保守,与其他不同RA菌株OmpA基因之间的核苷酸序列同源性为93%～97%。用pGEX-KG构建了原核表达载体pKG-OmpA,在大肠杆菌中进行了高效表达,表达蛋白约占菌体总蛋白的30%,主要为包涵体形式。SDS-PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白大小约为68000,Western-blot结果表明该表达蛋白具有抗原性。     

鸡源鸭疫里默杆菌的分离鉴定及ompA基因遗传进化分析

从病死鸡肝脏中分离到8株革兰阴性多形杆菌,对8株分离株进行形态学和16SrDNA基因鉴定并分析ompA基因及其推导的蛋白序列遗传进化特征.16S rDNA进化分析显示,8株鸡源分离株与22株鸭疫里默杆菌(Rieme-rellaanatipestifer,RA)参考株形成一个大的进化分支,与RA模式菌株ATCC11845...     

鸭疫里默氏杆菌菌体蛋白双向电泳技术的建立

为了建立鸭疫里默氏杆菌菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱。利用适当的裂解液处理鸭疫里默氏杆菌,提取全菌蛋白;采用pH值4～7,24cm干胶条,0.8 mg菌体蛋白进行双向电泳;硝酸银染色后获得的双向电泳图谱,并利用I mage MasterTM2D Platinum5.0图象分析软件进行分析,所得的数据用SPSS 15.0软件进行统计分析。结果得到了(800±26)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI值4.13～7.40之间,重复胶的匹配点数为(600±20),匹配率为75.2%。建立了鸭疫里默氏杆菌菌体蛋白双向电泳技术,2-DE图谱中蛋白位点的分辨率和重复性比较高,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础。     

鸭疫里默氏杆菌分子生物学研究进展

鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipcstifcr,RA）是一种革兰氏阴性、无鞭毛、无芽孢的棒状杆菌,瑞氏染色呈两极着色。鸭疫里默氏杆菌所引起的传染病被称为鸭巴氏杆菌病、鸭败血症、鸭疫综合症、鸭疫败血症、新鸭病和鸭传染性浆膜炎。该病呈世界范围分布,现已在几乎所有集约化养鸭生产的国家发现,给养鸭业带来了巨大的经济损失：RA血清型众多且非常复杂,     

1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因(p25)的克隆表达及免疫学活性

为探讨1型鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)p25蛋白的免疫原性,从RA 1型基因组DNA中扩增出p25基因全长ORF,生物信息学分析显示其为含有完整保守结构域PRK00110的一未知功能保守蛋白.p25基因经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a(+)-p25.测序正确后,将重组表达质粒pET-32a(+)-p25转入E.coli Rosetta,并成功进行了诱导表达.SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白与预期大小一致,表达产物主要以可溶性形式存在;Western blotting检测显示,该蛋白具有良好的免疫原性.     

13型鸭疫里默氏菌的分离与鉴定

无菌采集鸭疫里默氏菌病病鸭肝脏分别接种到含血清改良马丁琼脂平板、麦康凯琼脂平板和马丁肉汤中,并将分离菌作生化试验。结果：分离菌的纯培养物能分解葡萄糖、棉子糖、尿素酶和过氧化氢酶。该分离菌株只与13型RA标准阳性血清发生凝集反应。