茉莉花中β-D-葡萄糖苷酶活性测定条件的探讨

单萜烯醇类化合物是茉莉花及茶叶中的重要香气成份，它们主要以键合态的前体形式存在于植物组织中，并在β－D－葡萄糖苷酶（〔EC3，2，1，21〕）的水解作用下形成游离香气成份[1，2]。因此，β－D－葡萄糖苷酶活性的强弱在一定程度上影响单循烯醇类化合物的释放。利用对一硝基苯酚的生成比色法来测定β－D－葡萄糖苷酶活性，既简便又灵敏，具有较强的实用性。茉莉是主要的茶用香花，其主要香气成份中的芳樟醇及其氧化物等都可以由p－D一葡萄糖甘醇催化生成。因此，有关口一D一葡萄糖着酶活性的研究，无疑对其香气特征和香气形成机理等领…     

茉莉花香气释放酶的研究

茉莉花开放过程中 ,以PNPG为底物的 β_葡萄糖苷酶活性没有明显变化 ,同样丙酮粉中参与键合态芳樟醇释放的有关酶活性变化也不显著 ,但与键合态苯甲醇释放有关的酶活性却在离体后 6小时 ( 2 3∶0 0 )有一明显活性高峰 ,这一变化与游离态的苯甲醇变化规律相吻合 ;苯丙氨酸解氨酶在花初开时 ( 2 0∶0 0 )活性有所提高 ;非特异性酯酶同工酶谱带显示酯酶与香气释放有关 ;乙醇脱氢酶活性始终高于甲醇脱氢酶 ,而两种酶活性变化不大 ,前者在花前 ( 17∶0 0 )和花盛开时 ( 2∶0 0 )略有提     

茶叶β-葡萄糖苷酶亲和层析纯化与性质研究

以化学合成的β-葡萄糖苷酶的抑制剂β-葡萄糖脒为配体,通过N-糖苷键交联到支持物上,使糖脒N-糖苷键一侧的氨基保持带正电荷的活化状态,合成了一种β-葡萄糖苷酶的亲和层析树脂。这种合成的亲和层析树脂在弱酸条件下非常稳定,能选择性地吸附β-葡萄糖苷酶,并能多次重复使用。利用这种亲和层析树脂,在pH6和pH5条件下,从薮北种茶树叶片中纯化出两种分子量分别为63和75kDa的β-葡萄糖苷酶单体酶。以对硝基苯酚β-葡萄糖苷为底物,研究了两种酶的性质。TLC分析结果表明,这两种β-葡萄糖苷酶都能水解(Z)-3-己烯醇、苯甲醇和苯乙腈的β-D-葡萄糖苷。     

茶用香花香气形成机理研究报告（2）：茉莉花中β—D—葡萄糖苷酶活性的差异

茉莉花因其独特的浓烈香气而被大量应用于音制茉莉花茶。探明其香气特点及其形成机理,在栽培育种、香精提取、及客茶时品质控制等方面均有意义。β－D－葡萄糖若是茉莉花醇系香气的一类前体物质,在β－D－葡萄糖音酶作用下可释放出香气成分[1]。本研究对茉莉花中的β－D－葡萄着酶活性变化作了比较。1材料与方法1．1材料双瓣茉莉鲜花及其丙酮粉1．2酶粗提冰浴研磨匀浆法1·3酶活性测定对一硝基苯酚法[2]2结果与分析2．1茉莉花开放过程中的酶活性变化分别选择1．青蕾、2．白蕾、3．初开花、4．半开花、5全开花五种不同开放程度的鲜花为材…     

麦麸酯酶的分离纯化及酶学性质研究

为了能更好地将麦麸酯酶用于检测食品中的农药残留,采用硫酸铵分段沉淀、透析、SephadexG-200凝胶层析、超滤浓缩等方法对麦麸中提取的酯酶粗液进行了分离和纯化,并对其酶学性质进行了研究。结果表明,得到的麦麸酯酶比活力为289.14U·mg~(-1),回收率为47.7%,纯化倍数为16.17。麦麸酯酶的分子量约为26.0kDa,最大紫外吸收峰为224nm和280nm,最适反应温度为30℃,稳定范围为25~40℃;最适pH为8.0,pH稳定范围为4.0~8.0。Cu~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)、Al~(3+)、柠檬酸钠、四硼酸钠均对麦麸酯酶有抑制作用,而Fe~(2+)、Mn~(2+)、柠檬酸、硫酸铝钾对该酶有促进作用;以α-乙酸萘酯为底物的动力学参数K_m和V_(max)值分别为0.85mg·mL~(-1)和0.93mg·mL~(-1)·min~(-1)。4℃时,麦麸酯酶半衰期为10.4d,而25℃时,酯酶半衰期为8.6d。本研究结果对麦麸酯酶的应用具有一定参考价值。     

小麦叶片谷氨酰胺合成酶的分离纯化及鉴定

为了解谷氨酰胺合成酶（Glutamine synthetase,GS）同工酶在小麦中的种类、活性及亚基组成状况,利用盐析、凝胶过滤、阴离子交换层析等技术对小麦苗期叶片中的GS同工酶进行了分离纯化及鉴定。通过测定GS活性跟踪GS的纯化过程,利用NativePAGE结合活性染色技术检测GS的纯化效果,利用SDSPAGE鉴定GS的亚基组成。结果表明,在小麦幼苗叶片中检测到3种GS同工酶GS1、GS2和GSx,其中Gsx含量少,但活性高。从小麦幼苗叶片中纯化得到2个GS同工酶即GS1和GS2。GS1由39 kD的亚基组成,GS2由45 kD的亚基组成,没有纯化得到GSx。     

茶树叶绿素酶提取、分离纯化与性质的初步研究

在优化茶树叶绿素酶提取及活性分析条件的基础上,对茶树叶绿素酶的分离纯化及其性质进行了研究,结果表明:加入与鲜叶等量PVP,用pH7.5的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液提取的叶绿素酶活性最高,叶绿素酶的活性分析最佳条件为在45℃条件下反应15min;经过分离纯化后,叶绿素酶的纯度提高了55.96倍,酶的得率为9.45%,SDS-PAGE结果显示有一条蛋白质的条带,酶的亚基分子量为37.2kD;对纯化后的叶绿素酶的性质研究表明,该酶最适pH为7.5,45℃时候反应活性最高,在4℃保存条件下,随着存放时间的延长,酶活性逐渐下降,保存一个月后叶绿素酶活性剩余45%,用2mmol/L和7mmol/L的金属离子(Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe3+)、EDTA处理,都对叶绿素酶活性有不同程度的促进作用。     

化学调控对茉莉花产量与品质的研究

茉莉从春到秋要多次孕蕾开花。花前花后，影响茉莉营养生长与生殖生长的各种内源激素都要进行相应的调整。实践证明，提高茉莉花产量，除必须切实加强水肥运筹外，采用科学的化控技术，改善株形结构，促进物质与能量的有效转化，提高花芽形成的内源激素的比值水平，不失为当今茉莉花增产的一项适用而有效的新技术。为了摸索茉莉化控高产栽培技术，我们在完成茉莉花生物学特性观察、周年茉莉花植株养分变化测定以及对茉莉花产量要素分析基础上，对化控增产效应及其机制做了比较研究。一、化学调控的增花效应荣莉花每期花讯单位产量高低，取决…     

杨梅花色苷分离纯化制备矢车菊素-3-葡萄糖苷的研究

以杨梅汁为原料,分别选用95％pH3.0的盐酸乙醇和含体积分数为0.5％ HC1的甲醇溶液作为大孔树脂和葡聚糖凝胶的洗脱液,分离制备矢车菊素-3-葡萄糖苷.通过HPLC检测和标准品对照,经大孔树脂和葡聚糖凝胶纯化后,其纯度分别为29.05％和90.35％.     

茉莉花的香气成分研究进展

概述了茉莉花的主要香气成分、不同产地茉莉花香气成分的差异、香气成分分析方法、香气释放机理、香气释放与呼吸作用的关系和茉莉花开放释香与环境的关系。     

甜菜叶绿体DNA分离纯化方法

通过研究建立了适宜甜菜ctDNA的分离纯化方法，应用该方法可以获得高纯度、高得率的甜菜ctDNA。且产物可直接用于限制性内切酶酶切分析。     

利用流式细胞术鉴定茉莉花基因组大小和染色体倍性

以收集的16份茉莉花资源及50份实生种质为材料,以玉米B73为内参,采用流式细胞术估测茉莉花基因组大小,并以二倍体品种为对照,计算茉莉花染色体倍性。结果表明:内参与待测样品峰值能完全分开,无重叠峰,峰型清晰集中,可对茉莉花基因组大小进行有效估测;供试材料中有56份二倍体,基因组大小为0.54～0.63 Gb,有7份三倍体,基因组大小为0.79～0.96 Gb,有3份四倍体,基因组大小为1.04～1.12 Gb;从收集的资源中鉴定出二倍体和三倍体,未见四倍体,而从实生种质中鉴定出3个四倍体、2个三倍体,表明实生选种是茉莉花种质创新的一条有效途径;在已明确花冠类型的材料中,三倍体及四倍体均为单瓣型茉莉。该研究结果为茉莉花倍性育种及实生选种提供科学依据。     

茉莉花香气相关基因JsTPS启动子的克隆与活性分析

以茉莉(Jasminum sambac)的花苞为材料,采用染色体步移技术,分离出JsTPS基因的5'端调控序列,对该启动子序列进行顺式作用元件预测.根据茉莉花TPS基因启动子的顺式作用元件分布,扩增出5个不同片段长度的启动子,分别命名为JsTPS-1(494 bp)、JsTPS-2(689 bp)、JsTPS-3(10...     

小麦品种“陕253”PDI基因的克隆、原核表达及蛋白纯化

为进一步研究控制小麦蛋白二硫键形成的关键蛋白即蛋白质二硫键异构酶（PDI）,运用RT-PCR方法克隆出小麦品种＂陕253＂PDI基因的cDNA序列,基因登陆号为HQ911363。序列分析表明,HQ911363全长为1 539 bp,编码512个氨基酸,含有PDI典型的异构酶活性的催化位点-CGHC-和内质网驻留信号肽-KDEL-。构建该基因的原核表达载体,在宿主菌E.coliBL21（DE3）中经IPTG诱导表达融合蛋白,并对表达蛋白进行了纯化。SDS-PAGE及Western-blot检测证实融合蛋白诱导表达并纯化成功。     

茉莉花JsMYB108和JsMYB305基因的克隆及其对TPS基因的激活作用

基于茉莉花叶转录组(GenBank登录号为GHOY00000000)筛选了2个在花瓣中及夜间优势表达,且与其他物种中香气调控转录因子同源度高的MYB基因进行克隆并分析了它们在花朵开放中的表达模式.2个MYB基因编码序列长度分别为864 bp和588 bp,编码287 aa和195 aa个氨基酸残基.分别与拟南芥AtMY...     

茉莉花白绢病露天接种技术及盆栽抗病性鉴定

为了鉴定茉莉花资源对白绢病的抗性,从主产区广西横县的病株分离白绢病菌株,以横县双瓣茉莉花为材料,对露天条件下茉莉花白绢病接种方法进行了研究,并对盆栽的不同茉莉花品种(系)进行接种,采用相对抗病程度评价法鉴定供试材料的抗病性.结果表明:(1)在5种接种方法中,带菌燕麦粒埋土法的病情指数、发病率最高,分别为47.93％、8...     

烤烟成熟期叶片蛋白酶的初步纯化及其性质研究

通过硫酸铵沉淀,低温透析,初步纯化了烤烟成熟期叶片中的蛋白酶,并对其主要性质进行了研究.结果表明:以酪蛋白为底物,其最适pH值为5.0,最适温度为50 ℃;酶的热稳定性随着温度的升高而迅速降低,酶的pH稳定性随着保存时间的延长先增大后降低,保存40min时活性最大.研究还发现低浓度的K ,Cu2 ,Mg2 ,Fe2 ,Al3 ,Fe3 对蛋白酶有抑制作用,Ca2 ,Zn2 ,DTT对蛋白酶有激活作用.随着DTT,巯基乙醇,Ca2 浓度升高,对蛋白酶的激活作用增强.     

大孔树脂纯化山竹壳原花青素的研究

研究比较了10种大孔吸附树脂对山竹壳原花青素的吸附和解吸性能,筛选出最适的大孔吸附树脂,并对该树脂的静态和动态吸附条件进行研究.结果表明,大孔吸附树脂XDA-7对山竹壳原花青素有很好的吸附和解吸性能,最佳吸附和解吸条件为:吸附流速为2 BV/h,解吸液乙醇浓度为60％,解吸流速为2 BV/h,解吸液体积为6 BV.得到纯化的原花青素纯度为66.20％.     

茶树蛋白质提取及双向电泳的改良方法

研究了茶树芽叶蛋白质提取纯化及双向电泳技术,在样品制备、电泳及染色等方面进行了技术改进,解决了茶树芽叶中富含色素、多酚类化合物及其氧化产物等对双向电泳严重干扰的问题,探索出一种可获得重复性好,清晰度高的蛋白质双向电泳图谱技术;同时发现一种辨别茶树蛋白质样品质量好坏的简便方法。电泳图谱可分辨出茶树芽叶蛋白质斑点数500个左右,蛋白质相对分子量约在14.0 kD～100.0 kD范围内,主要分布在14.0 kD～67.0 kD之间;等电点约在4～9.5范围内,主要分布在4～6.5。     

大豆卵磷脂分离纯化工艺的研究进展

大豆卵磷脂是以大豆油脚为原料提炼的卵磷脂,含有胆碱、维生素、矿物质、亚麻酸及次亚麻酸等成分,具有多种生理功能,并在许多领域内得到了广泛的应用。然而由于技术原因,高纯度卵磷脂的生产仍存在一定的技术障碍,阻碍了其在医药等领域的推广应用。为此,对近年来大豆卵磷脂分离纯化工艺的研究进展做一简要综述和分析,以期为高纯度大豆卵磷脂的研究与应用提供参考。