乳腺上皮细胞的钙转运研究进展

从参与钙转运的相关分子的角度综述了乳腺上皮细胞钙的跨细胞转运过程,提出了钙转运进入乳汁的模式。     

奶牛乳腺长链脂肪酸转运的研究进展

奶牛乳脂中的长链脂肪酸（LCFA）JL乎全部来源于从消化道吸收并转运人血液的食物外源性LCFA,然后跨膜进入乳腺上皮细胞参与乳脂合成,而参与LCFA跨膜运输的脂肪酸转运蛋白有：脂肪酸转运蛋白家族（Fattyacid transport proteins,FAPTs）、脂肪酸转位酶（Fatty acid translocase,FAT／CD36）、脂肪酸结合蛋白家族（Fattyacid binding proteins,FABPs）和小窝蛋白（Caveolinproteins）。文章在综述LCFA跨膜运输研究的基础上,重点介绍4种LCFA转运蛋白的研究进展,发现在奶牛乳腺中表达的只有FAT／CD36和FABPs,而FATPs和小窝蛋白在奶牛乳腺中是否表达并参与LCFA的转运仍有待进一步研究确定。因此,应利用营养学、分子生物学和细胞生物学等方法,在体内和体外对FAT／CD36、FABPs、FATPs和小窝蛋白在泌乳期奶牛乳腺中的表达规律、作用机理进行深入研究,以探明其在乳腺LCFA转运中的作用及调控机制．并为优化乳脂组成实施的营养调控提供科学依据。     

左归丸对去势大鼠钙转运通路相关蛋白的影响

目的 探讨左归丸去势大鼠骨密度和骨、肾组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法 选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,中药低、高剂量组。除假手术组和正常组,其余组切除大鼠卵巢,造模成功后3个月进行各组干预。3个月后处死大鼠,检测大鼠骨密度（BMD）;Western blotting法检测钙转运通路（肾组织）蛋白表达;免疫组化检测去势大鼠骨组织中新型上皮钙通道5（TRPV5）蛋白的表达。结果 与模型组相比,左归丸高剂量组与西药组大鼠骨密度均有改善（P<0.05）;与假手术组比较,模型组各蛋白表达均有不同程度下降（P<0.01,P<0.05）;尼尔雌醇和左归丸均能不同程度上调去势大鼠肾组织中TRPV5蛋白、钠钙交换器（NCX1）蛋白、钙结合蛋白-D28K（CaBP-D28K）和细胞膜钙汞（PMCA1b）蛋白表达,差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;免疫组化显示模型组较假手术组的TRPV5蛋白表达率增加（P<0.05）,而西药组和中药高、低剂量组较模型组蛋白表达率均下降（P<0.05）。结论 左归丸可通过上调肾钙转运通路中相关蛋白的表达和降低大鼠破骨细胞中TRPV5蛋白的表达,而发挥骨质疏松症治疗作用,肾、骨组织中钙转运过程相关蛋白可能成为骨质疏松症治疗的新方向、新靶点。     

天蚕变态期神经分泌细胞的组织学研究（Ⅰ）：——脑神经分泌细胞

采用ＰＴｈ－Ｐｈ染色法，查明天蚕脑中存在着Ａ、Ｂ两类神经分泌细胞。分布于脑间部的中央群神经分泌细胞，由Ａ、Ｂ两种细胞组成；侧群神经分泌细胞则主要由Ｂ细胞组成。Ａ细胞的轴突有交叉现象。还对变态期间神经分泌细胞的大小，数量变化进行了调查研究。     

铝胁迫下钙对小麦幼苗营养元素吸收和转运的影响

采用元素含量测定和X－射线微区分析方法，比较铝胁迫下外源钙对两个小麦品种幼苗营养元素吸收和分布的影响，提高铝胁迫下营养液中钙浓度，小麦对铝的吸收声速下降，铝从根往叶鞘和叶片的转运增加。根和地上部分铝积累之比下降；钙和磷吸收增加，根、叶鞘和叶片中钙、磷含量上升，品种Scout66比品种Altas66更为明显。铝和钙分布的变化也很明显，增加介质钙浓度后，铝在表皮细胞和皮层细胞中积累明显下降，中柱薄壁细胞没有铝分布，表皮中钙含量增加较明显。     

生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响

将泌乳期大鼠分为对照组、CS组和SS组,利用RT-PCR法对大鼠乳腺组织斯钙素基因进行检测,分析生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响。结果表明:乳腺中有STC1表达,无STC2表达。生长抑素对泌乳期大鼠乳腺斯钙素基因表达起下调作用,半胱胺作用相反。以上结果提示生长抑素和半胱胺可能参与乳腺钙代谢的调节,且通过STC1发挥作用。     

香料烟叶片腺毛及分泌细胞的研究

研究结果表明，香料烟叶片长柄腺毛的分泌细胞数变化较大，短柄腺毛的分泌细胞数比较稳定。随叶位升高，叶片腺毛密度，分泌细胞密度及单根腺毛的分泌细胞数增加，随植株长势变旺，叶片腺毛密度及分泌细胞密度减少。     

甘草次酸在Caco-2细胞模型中的转运机制

采用液相-质谱检测甘草次酸在HBSS磷酸盐缓冲液中的转运量,结果表明:甘草次酸的转运量受时间、浓度以及p-糖蛋白抑制剂维拉帕米和汉防己甲素的影响,表观渗透系数P(appBL-AP)为(17.1±4.2) ×10-6～(54.3±6.3) ×10-6cm·s-1、P(appAP-BL)为(15.6-±3.4) ×10-6...     

柞蚕神经分泌细胞的研究 Ⅰ 脑神经分泌细胞

研究柞蚕(Antheraes pernyi G.)神经分泌细胞及其功能对于阐明柞蚕滞育机理,实现人为控制柞蚕化性具有重要意义。作者发现柞蚕脑内存在A、B两种神经分泌细胞,A细胞有三种类型,分布于脑间部的中央神经分泌细胞群由A、B两种细胞组成,此群细胞又可分为背、中、腹三区。侧群神经分泌细胞的主体在脑的侧背方,绝大多数为B细胞.中央群A细胞和侧群B细胞均发出轴突,前者的轴突在脑间部下方交叉后,分别进入另一个脑半球内;后者的轴突不交叉,直接进入本半球髓质部.自4龄第1天至蛹化第15天,A、B两种细胞大小无差异,但A细胞的染色性随蚕体发育而有一定变化,脑神经分泌细胞的相对数量以蛹化第1～3天为最多。     

小鼠乳腺上皮细胞体外原代培养方法研究进展

综述了有关于小鼠乳腺上皮细胞体外原代培养方法的研究进展,阐述了乳腺细胞培养的意义,介绍了乳腺组织原代培养的过程,并分析了所取得的研究成果。     

空怀期黑白花奶牛乳腺肥大细胞的分布范型

应用改良的甲苯胺蓝染色法观察空怀期黑白花奶牛乳腺内肥大细胞分布,结果显示,乳腺肥大细胞具有明显的区域性差异,分布于小叶间结缔组织中的肥大细胞称为小叶间肥大细胞,分布于小叶内的肥大细胞称小叶内肥大细胞。     

奶牛乳腺成体干细胞的体外分离培养及鉴定试验

[目的]体外分离、培养奶牛乳腺成体干细胞（mammary stem cells,MaSCs）,研究其生物学特性并对其进行扩增和鉴定。[方法]用贴壁筛选法纯化牛MaSCs,传代扩增,测定生长曲线并进行细胞核型分析。[结果]通过体外分离培养获得纯度较高的MaSCs,观察到MaSCs的生物学特性,细胞具有正常核型,分离得到的细胞确实为比较原始的干细胞。[结论]成功地建立了一种分离培养牛MaSCs的方法,分析MaSCs的生物学特性,为进一步深入研究MaSCs的诱导分化及其在乳腺生物反应器中的应用打下基础。     

牛乳腺干细胞的分离和生物学特征

为获得牛乳腺干细胞并对其生物学特征进行研究,通过悬浮培养,从体外培养的乳腺上皮细胞分离得到乳腺干细胞球,并通过RT-PCR、Western-blot、免疫组化染色和流式细胞分析对其表面抗原标记特征和分化特征进行研究。结果表明,牛乳腺干细胞表达CD29和CD49f,可以分化为腺上皮细胞和肌上皮细胞。该分离方法增加了获得牛乳腺干细胞的途径,特异性标记物CD29和CD49f可用于其生物学特征研究。     

人溶菌酶基因真核表达载体构建及其在牛乳腺上皮细胞中的表达

构建真核表达载体pEGFP-C1-hLYZ,并从基因水平研究人溶菌酶基因在体外培养的牛乳腺上皮细胞中的表达,为核移植提供转基因供体细胞.采用PCR的方法从人溶菌酶质粒中扩增854 bp人溶菌酶基因(包括完整的编码框446 bp).并克隆到pMD18-T载体上,用限制性内切酶Hind Ⅲ和BamHⅠ双酶切.将人溶菌酶基因的酶切片段(883 bp)定向克隆到pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组表达质粒pEGFP-hLYZ,并进行Hind Ⅲ和Bam HI双酶切鉴定.转染体外培养的牛乳腺上皮细胞,48 h后观察其表达情况.PCR检测溶菌酶基因的表达.成功构建了人溶菌酶真核表达载体,观察到表达绿色荧光蛋白的牛乳腺上皮细胞,并检测到溶菌酶基因.     

microRNA在调节乳腺发育和乳腺免疫功能中的作用

miRNAs分子是除了激素之外对乳腺发育以及乳腺免疫功能进行调控的重要分子,综述了miRNAs在乳腺发育以及乳腺免疫中的最新研究进展。     

奶牛乳腺先天防御机理的研究进展

综述了近年来奶牛乳腺先天防御机理的研究进展,分析了奶牛的固有防御机理、诱导型防御机理和细胞征募防御机理,对了解和预防奶牛乳腺炎的发生具有一定的参考和应用价值.     

消化法培养山羊乳腺上皮细胞

为了寻找更加有效的山羊乳腺上皮细胞分离纯化方法。用2 g/L胶原酶和0.5 g/L胰蛋白酶相结合的消化法培养山羊乳腺上皮细胞,2~3 d细胞铺满单层,形态如铺路石。所得细胞再经0.5 g/L胰蛋白酶/0.2 g/L EDTA纯化3~4次,得到比较纯净的山羊乳腺上皮细胞。细胞鉴定结果表明,所得到的细胞角蛋白染色呈阳性,阳性率大于90%,波形蛋白染色呈阴性,具有典型的上皮细胞特性。消化法适用于山羊乳腺上皮细胞的体外培养。     

Induced in vitro Expression of Human Lactoferrin in Goat Mammary Gland Epithelial Cell

[Objective]The aim of this study was to explore the technical system of induced expression in vitro of goat mammary gland epithelial cell,and evaluate expression efficiency of mammary gland specific vector and foreign protein at the cell level.[Method]Goat mammary gland epithelial cell transfected by human lactoferrin gene was inducted by culturing in DMEM/F12 medium supplemented with 5 mg/L insulin,5 mg/L prolactin and 1 mg/L hydrocortisone.Supernatant was collected per 6 hours and concentrated.Expression situation of foreign protein were detected by SDS-PAGE and Western blotting.[Result]There was target protein expression in the induced culture medium,which molecular weight was about 42 kD.[Conclusion]The method used in this study can induce goat mammary gland epithelial cell to express foreign gene,it lays a foundation for researching heterologous expression of foreign gene and producing mammary gland bioreactor.