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相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 171 毫秒
1.
高质量的基因组DNA的获取是芋螺毒素基因克隆及基因组文库构建的关键。笔者采用4种方法提取信号芋螺(Conus litteratus)的不同组织器官的DNA,并综合比较了各组DNA的浓度和纯度、DNA片段的大小和完整性。结果表明,由改良的DNA快速提取试剂盒法提取的DNA纯度和浓度较好;4种组织器官中,腹足纯度较高,是更合适的提取组织;肝胰脏和毒管获取的DNA产率最高,但片段完整性差,污染严重;PCR反应获得了跟预期大小一致的特异扩增产物。因此,信号芋螺基因组DNA的提取最佳方法为改良的DNA快速提取试剂盒法,提取部位为腹足组织,可以获得高质量的基因组DNA,且符合后续实验要求。  相似文献   

2.
红皮云杉胚乳中提取DNA的最佳时段   总被引:3,自引:1,他引:2  
以来自不同地点的红皮云杉胚乳为材料提取DNA,研究了DNA提取的最佳时段,从而为构建红皮云杉的遗传图谱做准备,结果表明:提取DNA样品的最佳时段是在种子生根的晚期,即根长到4cm以后,提取的DNA样品纯度和浓度都较高:单一胚乳中DNA量完全能够满足大量PCR扩增的需要。  相似文献   

3.
中国李基因组DNA提取方法的优化   总被引:10,自引:0,他引:10  
3种常用的植物基因组DNA提取方法在中国李上的实验,结果表明:改良陈大明法提取的DNA纯度高,产率高。为满足植物样品较少时提取DNA的需要,将该法进一步优化的结果表明,不使用液氮研磨而是在低温条件下将组织捣碎的微量法同样提取出了产率高、纯度高的DNA,完全满足RAPD扩增的需要。裂解缓冲液中NaCl的浓度以1.1mol/L提取DNA的产率最高,且DNA的质量与其他浓度之间没有明显差异。  相似文献   

4.
石榴DNA提取方法的比较及抗氧化剂对DNA质量的影响*   总被引:8,自引:1,他引:8  
 比较了SDS-CTAB微量提取法和改进的SDS微量提取法提取的石榴叶片DNA质量,结果认为两种方法提取的DNA均可用于RAPD分析,但SDS微量提取法较适合于石榴叶片DNA的提取。试验中还研究了抗氧化剂PVP,α-巯基乙醇和抗坏血酸3种试剂单独使用及PVP与α-巯基乙醇混合使用对SDS-CTAB微量提取法的影响,发现与对照相比,单独加抗坏血酸及PVP与α-巯基乙醇混合使用能很好地防止DNA在提取过程中的褐化。  相似文献   

5.
苦瓜基因组DNA提取和RAPD分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
采用4种CTAB法和改良SDS法对苦瓜的基因组DNA进行了提取,结果表明,改良SDS法提取的DAN质量较差,主要表现在多糖类物质去除不彻底;4种CTAB法都适合苦瓜DNA的提取,提取的DNA均适于RAPD分析,尤以改良CTAB法最为简单,快速。  相似文献   

6.
一种快速提取野生稻总DNA的方法   总被引:6,自引:0,他引:6  
在常规CTAB的基础上建立一种快速提取纯化野生稻总DNA的方法,这种快速提取法能在短时间内处理大批量的材料,具有简便、快速、经济、稳定等优点。用这种方法提取的DNA作为模板进行PCR扩增,和用常规的CTAB法提取的DNA作为模板结果一致。因此,用这种方法提取的DNA质量完全可以满足植物分子标记分析的需要。  相似文献   

7.
一种快速的植物DNA制备方法   总被引:9,自引:0,他引:9  
介绍一种DNA提取方法,该方法具有快速,简便,高效的优点,可在60 min内提取出纯净无RNA的DNA,获得的DNA纯度高,DNA质量可满足酶切及PCR等分子生物学实验要求。  相似文献   

8.
茶树基因组DNA的高效提取方法   总被引:37,自引:4,他引:37  
为了从富含多酚和多糖等多种次生代谢物质的茶树叶片中分离出高质量的基因组DNA,对4种植物DNA提取方法进行改良后,以茶树春梢为材料,对提取效果进行了比较,并首次采用CTAB区室法提取茶树基因组DNA。结果表明,用该4种方法提取的DNA,其OD260/OD280都在1.8以上,相对分子质量均大于21kb,能完全被EcoRI酶切消化,也能获得清晰的PCR扩增图谱。因此,只要操作合理,4种方法均能提取出高质量的DNA。  相似文献   

9.
一种提取粘菌DNA的新方法   总被引:4,自引:3,他引:4  
介绍了提取粘菌DNA的新方法-玻片压碎法,即在两硅化的载玻片间压碎于孢子,提取粘菌的DNA。结果表明:用该法提取的粘菌DNA十分有效、可行,适用于多种分子生物学分析,如RAPD分析、PCR扩增等。  相似文献   

10.
水稻玉米基因组DNA提取方法的改进   总被引:9,自引:2,他引:9  
以水稻、玉米为材料,对其基N组DNA的提取方法进行改进,通过减少饱和酚和氯仿等有机试剂处理次数,适当延长有机试剂的抽提时间,提高提取DNA的得率和纯度,并且能更有效地避免干扰物质的污染,得到均一的大片段的DNA,检测结果表明,该方法普遍适合玉米、水稻作物材料的DNA提取,所得DNA能够达到进一步研究要求。  相似文献   

11.
三种试剂盒提取粪便隐孢子虫微量DNA的效果比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
赵梅珍  刘晖  贺莉芳  马元芬 《安徽农业科学》2011,39(26):16130-16131
[目的]筛选一种高效、简单、快速、价格合理的粪便微量DNA提取试剂盒。[方法]用3种不同的试剂盒提取粪便DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率及巢式PCR产物等评价提取效果。[结果]Genmed试剂盒提取的DNA浓度最高、PCR产物条带最亮,但提取时间相对较长,成本相对较高。天根试剂盒提取的DNA纯度最高,DNA浓度适中,成本适中,提取时间最短。碧云天试剂盒提取的DNA纯度、浓度均不高且提取时间最长,但成本最低。[结论]Genmed试剂盒提取粪便微量DNA最灵敏。天根试剂盒提取DNA适于DNA纯度要求较高的分子生物学研究。  相似文献   

12.
比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法.结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差异,其中化学裂解与酶裂解相结合法提取DNA的产量最高,而新型植物基因组DNA提取试剂盒提取培养料DNA的产量最低,分别为(2372.72...  相似文献   

13.
几种提取乌苏里貉毛囊核酸方法的比较(英文)   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]该研究旨在探讨提取乌苏里貉毛囊核酸的可靠方法。[方法]本实验分别利用改进的有机酚法,chelex-100法,PCR缓冲液法和试剂盒法,从乌苏里貉毛发中提取核酸DNA,对所提核酸进行PCR扩增及电泳分析,并且对四种方法进行比较。[结果]经分光光度计测定和凝胶电泳检测,本实验研究结果表明chelex-100提取的核酸有蛋白质等杂质,PCR缓冲液法提取核酸浓度低有机酚法和试剂盒法提取的DNA浓度高,且没有杂带。[结论]本研究为进一步探索高效,简便的提取乌苏里貉毛囊核酸DNA提供了有力的科学理论基础。  相似文献   

14.
[目的]寻找一种有效的磁铁矿尾矿宏基因组DNA的提取方法。[方法]分别采用直接提取法和SDS高-盐法提取邯邢矿区磁铁矿尾矿宏基因组DNA,比较2种方法的提取效果。[结果]直接提取法的提取效果较差,基本上没有提出DNA,SDS高-盐法的提取效果较好,DNA得率较高;23 S rDNA特异序列扩增结果显示,所提DNA能够满足PCR扩增的需要。[结论]所取尾矿样品中含有大量的金属离子,这些金属离子不但影响溶菌酶的活性,而且影响后续PCR扩增效率,所以提取DNA前需对样品进行高浓度TE处理。  相似文献   

15.
新疆泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法研究(摘要)   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]寻找一种有效的泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法。[方法]分别采用CTAB法、SDS加酶法、实验室改进法、试剂盒法提取泥火山土壤宏基因组,比较4种方法的提取效果。[结果]试剂盒法的提取效率最高、纯度最好;实验室改进法次之;SDS加酶法提取量最多。实验室改进法获得的DNA,稀释10倍可直接用于PCR扩增。[结论]从经济和DNA质量的角度考虑,实验室改进法可作为新疆泥火山土壤宏基因组DNA提取最有效的方法。  相似文献   

16.
【目的】筛选出一种快速高效获取柑橘黄龙病病原DNA的提取方法,为黄龙病亚洲种病原的检测奠定基础。【方法】选取5份疑似黄龙病症状柑橘叶片样品,分别采用4种试剂盒(快捷型基因组DNA提取系统、新型植物基因组DNA提取试剂盒、植物基因组DNA提取试剂盒、快速DNA提取扩增套装)及CTAB法提取柑橘叶脉基因组DNA,并用柑橘黄龙病亚洲种的16S rDNA特异引物fD1/fD2和OI1/OI2c进行PCR扩增,DNA提取产物及PCR扩增产物在1%琼脂糖凝胶电泳上检测。【结果】快捷型基因组DNA提取系统获得的DNA质量最好,植物基因组DNA提取试剂盒和CTAB法提取DNA方法提取得到的DNA质量较好,新型植物基因组DNA提取试剂盒所获得的DNA质量较差,快速DNA提取扩增套装所获得的DNA质量最差。除快速DNA提取扩增套装外,其余4种DNA提取方法均扩增出黄龙病亚洲种病原。【结论】快捷型植物基因组DNA提取系统试剂盒操作简单快捷,耗时短,提取的DNA效果较好,能够满足黄龙病病原PCR检测的要求。  相似文献   

17.
为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量.结果显示:酚-氯仿法提取的DNA片段比试剂盒法提取的更完整,且DNA浓度较高,但纯度稍低;无论何种提取方法,刚毛和血淋巴液中的DNA纯度都高于鳃和肌肉,4种组织中的DNA含量依次为鳃>肌肉>刚毛>血淋巴液,未剪碎刚毛中未能提取到基因组DNA;微卫星标记的电泳结果表明,两种提取方法下4种组织中提取的DNA均可满足微卫星标记的应用要求.综上,本研究建立了一种简便的非损伤性中华绒螯蟹的采样及其DNA提取方法,这对于进行中华绒螯蟹遗传育种和分子标记研究等方面具有一定的积极作用.  相似文献   

18.
新疆泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
李建辉  路盼盼  张亚平 《安徽农业科学》2010,38(23):12416-12417
[目的]寻找一种有效的泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法。[方法]分别采用CTAB法、SDS加酶法、实验室改进法、试剂盒法提取泥火山土壤宏基因组,比较4种方法的提取效果。[结果]试剂盒法的提取效率最高、纯度最好;实验室改进法次之;SDS加酶法提取量最多。实验室改进法获得的DNA稀释10倍可直接用于PCR扩增。[结论]从经济和DNA质量的角度考虑,实验室改进法可作为新疆泥火山土壤宏基因组DNA提取最有效的方法。  相似文献   

19.
以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解法和酚-氯仿法分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方法提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PCR扩增均能得到目的条带。碱裂解法提取的DNA原液稀释5倍、10倍后作为模板均获得了较为稳定的扩增产物。该结果表明,简单、快速、无毒的碱裂解法适用于动物定性PCR检测时DNA的提取。  相似文献   

20.
一种简易的拟南芥幼苗微量DNA提取方法   总被引:12,自引:2,他引:12  
报道了一种简易的拟南芥幼苗微量DNA提取方法。陔方法可在常温下进行DNA提取,而且样品用量少,仅需10mg左右,用100μL重蒸水回溶DNA沉淀所获得的粗提液可直接用于PCR检测。结果表明:应用该法提取的DNA完整性好,PCR效果佳,适用于拟南芥转基因植株鉴定。  相似文献   

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