间接血凝血纸法检测猪弓形体病血清抗体的应用

目前,间接血凝法检测猪弓形体病血清抗体有血清法和血纸法。鉴于血清法存在着样品收集、保存及血清灭能等繁冗过程,给临床推广使用带来不便,笔者试用血纸法测定猪弓形体病血清抗体,并与血清法平行对比试验,旨在从实用角度出发探讨血纸法的应用价值,现将结果报告于后:     

西安地区猫弓形体抗体调查报告

近年来,国内应用间接血凝试验诊断家畜弓形体病以及家畜弓形体抗体调查的研究报道较多,但有关猫的感染情况报道甚少。为了解家猫弓形体病感染程度,我们应用滤纸干血滴供检的间接血凝试验,对西安地区猫弓形体抗体做了检测。现报告如下:     

青海改良种绵羊弓形体病的血清学调查

应用间接血凝试验(IHA)，对采集的160份青海改良种绵羊血清，进行了弓形体病的血清学抗体定性检测。结果检出7份阳性血清，血清学阳性率为4．38％。     

应用间接ELISA检测鸡病毒性关节炎抗体的研究

用本试验建立的抗鸡病毒性关节炎(AVA)抗体的间接 ELISA 方法检测了实验感染 AVA 病毒(AVAV)的鸡血清、自然感染鸡血清及 IBD,ND 和 MD 病鸡血清,证明其具有较高特异性.通过对鸡实验感染 AVAV 后不同时期的检测表明.间接 ELISA 可在感染后6天检出血清特异性抗体,且不同时期检出率均高于 AGID 法,并可在2小时内报告试验结果.适用于 AVAV 抗体的常规检测.用该法对来自南京、海宁、长春等地鸡场的162份血清进行检测,阳性率为10.5%.     

用间接血凝试验检测伊氏锥虫病抗体

间接血凝试验已广泛应用于寄生虫病的诊断。其中Gill(1965)报道了用甲醛化红细胞间接血凝试验检查家兔和大白鼠血清中的伊氏锥虫抗体;Jatker等(1971)报道了骆驼伊氏锥虫间接血凝试验;Verma等(1977)报道了实验感染水牛犊和黄牛犊的间接血凝滴度。胡氏等(1979)报道了用丙酮醛—戊二醛双醛化红细胞间接血凝试验以诊断耕牛锥虫病,取得了较好的结果。笔者在上述基础上进一步试验,初步标化了各种反应要素,并对疫区耕畜血清,以补体结合反应作对照,检测了伊氏锥虫病抗体。现将结果总结如下。     

间接ELISA检测犬瘟热血清抗体方法的建立

以重组表达的犬瘟热病毒融合蛋白(fusion protein,F)作为包被抗原,建立了检测犬瘟热病毒血清抗体的间接ELISA方法。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为125ng/孔,血清最佳稀释度为1∶160。经阻断试验、重复性试验等表明该方法特异性强、重复性较好,可用于犬瘟热血清抗体的定量和定性检测。     

闽南地区猪弓形体病的血清学调查与分析

对369批次（猪场）临床送检的1169份病猪血清进行弓形体病间接血凝试验（IHA）的血清学捡删，结果表明猪弓形体病抗体总体阳性率23．95％。猪弓形体病在闽南地区有一定流行趋势，母猪群体感染程度较为严重。     

用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体

利用扬州大学农学院畜禽病原微生物研究室提供的传染性法氏囊病单克隆抗体致敏红细胞，用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体。试验表明：反向间接血凝抑制试验具有很高的特异性，能被传染性法氏囊病抗原特异性地阻断，且不与鸡马立克氏病、白血病、传染性脑脊髓炎、减蛋综合征、新城疫等血清出现交叉反应。该法敏感性比琼脂扩散试验高２８倍，检出率高约６０％。与琼脂扩散试验的相关系数为０．９４００。用此法测定雏鸡母源抗体，测得雏鸡于１３～１５日龄时母源抗体降至免疫临界线     

用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体

利用扬州大学农学院畜禽病原微生物研究室提供的传染性法氏囊病单克隆抗体致敏红细胞。用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体。试验表明：反向间接血凝抑制试验具有很高的特异性，能被传染性法氏囊病抗原特异性地阻断，且不与鸡马立克氏病，白血病，传染性脑脊髓炎，减蛋综合征，新城疫等血清出现交叉反应。     

弓形体间接血凝诊断抗原制剂使用后回收与再生的实验

间接血凝试验(IHA)是检查弓形体抗体常用方法之一。通常在试验后就将诊断红细胞弃去。1981—1986年,我们对醋酸法和鞣酸——醋酸法致敏的弓形体IHA诊断红     

猪丹毒杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测猪丹毒杆菌血清抗体的ELISA方法,本研究将猪丹毒杆菌(1a型)云南分离株ZY15074的超声裂解的全菌蛋白作为包被抗原,通过反应条件的优化,建立了猪丹毒杆菌抗体间接ELISA检测方法。特异性试验结果显示该方法与猪其它10种常见病原阳性血清均无交叉反应。该方法对阳性血清的敏感性为1/256。重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于10%。对160份临床血清样品比对试验结果显示该方法与国外间接ELISA方法的符合率为90.6%。本研究建立的间接ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,可以用于猪丹毒杆菌血清抗体检测和流行病学调查。     

间接ELISA检测鸭病毒性肝炎抗体的研究

本试验以氯仿去脂-滤膜过滤-浓缩层析方法纯化病毒作包被抗原，成功地建立了检测鸡抗鸭肝炎病毒(DHV)血清抗体的间接ELISA方法，经交叉试验和阻断试验表明，该方法具有很高的敏感性和特异性，应用于DHV抗体检测比较有效，为鸭抗DHV血清抗体检测以及进行DHV单克隆抗体筛选提供了依据。     

间接ELISA快速检测猪PRV抗体方法的建立

用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化伪狂犬病病毒(PRV)作抗原,建立了检测PRV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为3.2 mg/L,血清最佳稀释度为1∶80。试验结果表明,间接ELISA检测PRV抗体具有快速、敏感、特异等特点,适合于大量样品的检测,对畜群免疫效果的检测和免疫程序的制定有重要意义。     

猪痢疾密螺旋体的间接荧光抗体检查

应用无害密螺旋体(Ti)吸收过的兔抗猪痢疾密螺旋体(Th)血清,作间接荧光抗体试验来检查Th,发现无法与Ti明确区分。应用于田间检查,对Ti同样呈阳性反应,但比结晶紫染色法见到的菌数明显增加。由于间接荧光抗体试验并不复杂,有条件的实验室可以使用,但看来同结晶紫染色法一样,不能区别Ti和Th。     

放射免疫法检测急性弓形体病猪血清中循环免疫复合物和抗体

本文用放射免疫法(Radioimmunoassay,RIA)检测急性弓形体病猪血清110份,经感染后第五天血清中出现明显的弓形体特异性抗体和免疫复合物,而健康对照猪血清10份全部阴性。此种抗体与免疫复合物连续测定26天,其结果一直保持在阳性范围之内。急性弓形体病的临床期诊断尤其对人的弓形体病更为重要。目前国内外都采用血清学方法检测康复后血清抗体,但是此法未能做出快速确诊,从而拖延时间影响了对症治疗。放射免疫法以抗原和抗体特异性免疫反应为基础,是一种超微量分析技术,它能够探测101~(-12)克水平元素,其方法具有灵敏、精密度高,特异性强等的优点。上述研究将为今后建立快速诊断弓形体病提供新的测试手段,值得推广使用。     

猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒的临床应用研究

采用猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对5省/市的猪血清样本进行检测,并与进口ELISA试剂盒相比较,同时采用世界动物卫生组织(OIE)指定方法-荧光抗体病毒中和试验对检测结果有差异的血清样本进行验证,结果显示,两种试剂盒对田间临床样本的符合率为78.1%;猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒与荧光抗体病毒中和试验的符合率高于进口ELISA试剂盒;综合免疫背景分析,猪瘟病毒间接ELISA抗体试剂盒的敏感性和特异性均高于进口试剂盒,更适合在我国进行大规模推广应用。     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。     

比较3种间接ELISA试验检测口蹄疫感染抗体的研究

将3种检测口蹄疫非结构蛋白抗体的间接ELISA试验进行了比较。这3种间接ELISA试验检测田间血清样品的最低符合率为96％，最高符合率达98％：有2种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第10天后血清中的口蹄疫感染抗体．有1种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第14天后血清中的口蹄疫感染抗体；这3种间接ELISA试验检测12份已知口蹄疫阳性血清的试验结果吻合。研究表明．这3种间接ELISA试验方法对于检测口蹄疫感染抗体具有较好的特异性．其中猪口蹄疫3A蛋白间接ELISA诊断试剂盒在灵敏性、特异性和符合率方面更优于另外2种试剂盒。     

鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的间接ELISA检测方法,应用原核表达的IBDV VP2蛋白作为包被抗原,经方阵试验确定间接ELISA试验的最佳反应条件：包被抗原的浓度为8 μg/mL,标准阴、阳性血清的稀释度为1:400,封闭液选用10 %马血清,酶标抗体最佳稀释倍数为1:15000,最佳抗原稀释液为0.01 M PBS(PH 7.2);抗原最佳包被条件为4 ℃过夜,待检血清和酶标二抗反应条件为37 ℃ 60 min,底物作用时间为15 min。待检血清的OD450nm≥0.288判为阳性,反之判为阴性。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果显示,该方法的特异性好、敏感高、重复性好。用建立的间接ELISA方法与商品化IDEXX-ELISA试剂盒对临床血清样品进行检测,符合率为93.5 %。该方法的建立为检测IBDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、方便经济的检测方法,为鸡传染性法氏囊病免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。     

在新疆的马羊牛及人群中发现弓形体

1986年广西卫生防疫站和新疆畜牧兽医总站合作,采用间接血凝试验(IHA≥1:64判为阳性)进行弓形体感染调查,结果在人畜血清中均发现阳性感染人的弓形体抗体