新城疫病毒接种鸡血中IgM,IgC的动态变化

将１６只ＳＰＦ鸡分成４组，每组４只，分别接种新城疫油乳剂苗，新城疫，传染性支气管炎，传染性法氏囊病三联油乳剂苗，ＬａＳｏｔａ弱毒苗和Ｍｕｋｔｅｓｗｅｒ苗。接种后每隔２ｄ采血１次，用ＥＬＩＳＡ测定新城疫特异性ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体，结果：油乳剂灭活苗接种组均无特异性ＩｇＭ抗体出现，特异性ＩｇＧ抗体高峰期出现在接种后２２ｄ，ＬａＳｏｔａ弱毒苗和Ｍｕｋｔｅｓｗｅｒ苗接种组均有特异性ＩｇＭ抗体出现，高峰期为接     

ELISA检测鸡新城疫病毒特异性IgM抗体的研究

以新城疫病毒单克隆抗体包被板,用10％小牛血清-PBS封闭后,捕获尿囊液中的新城疫病毒作固相抗原.在此板上应用酶标抗鸡IgM单克隆抗体进行间接ELISA试验检侧鸡血清中新城疫病毒的特异性IgM抗体.试验证明该方法特异性强、敏惑性高.兔抗新城疫病毒阳性血清可特异性阻断反应,将新城疫病IgM阳性血清用2-ME处理可使ELISA反应呈阴性,与禽源多杀性巴氏杆菌鸡IgM阳性血清、鸡传染性支气管炎病毒IgM阳性血清无交叉反应.该试验可检测到La Sota免疫后3天鸡血清中的特异性IgM,对鸡新城疫病毒IgM阳性血清的检测效价可达1:320以上,并可检测到临床新城疫病鸡血清中的特异性IgM抗体.     

间接夹心ELISA检测新城疫病毒抗原

以ＳＰＦ鸡抗新城疫病毒ＩｇＧ为包被抗体，兔抗ＮＤＶ ｖｅｒｏ细胞培养纯化毒ＩｇＧ为第二抗体，酶标记羊抗兔ＩｇＧ为指示抗体，建立了检测ＮＤＶ的间接夹心ＥＬＩＳＡ，并分别以兔抗ＮＤＶ鸡胚毒纯化ＨＮ糖蛋白，Ｆ糖蛋白ＩｇＧ为第二抗体进行了比较试验，并对攻毒鸡外分泌物样品进行了病原检测。     

非免疫鸡血清中鸡新城疫病毒抗体的测定

对重庆市荣昌县6个乡镇的41个散养养鸡户,按常规方法采取并分离未经鸡新城疫疫苗免疫的1264份成年鸡血清,采用微量法进行红细胞凝集（HA）试验和红细胞凝集抑制（HI）试验检测鸡新城疫病毒抗体的滴度。其结果表明：鸡新城疫阳性率为8．73％,可疑率为4．76％,阴性率为86．51％,从而证明该地区新城疫病毒感染较严重。     

对新城疫病鸡的紧急接种试验

人工感染鸡新城疫（ＮＤ）病毒后，用Ⅳ系和Ⅰ系弱毒疫苗大剂量注射及用抗ＮＤ病毒高免卵黄抗体加ＮＤ油佐剂灭活疫苗共同注射进行紧急接种。结果，对照组９／１０死亡，大剂量Ⅳ系苗接种组８／１０死亡，Ⅰ系苗接种组７／１０死亡；高免卵黄抗体加油剂灭活苗接种组死亡１／１０。感染鸡耐过后１３天，其ＨＩ效价均大于１：８０。     

检测ＮＤＶ特异性ＩgG、IgM、ＩgA的间接ＥＬＩＳＡ方法的建立

本试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）感染的鸡胚尿囊液经差速离心，庶糖密度梯度离心提纯的ＮＤＶ为包被抗原，以纯化的鸡ＩgG、IgM及ＩgA免疫，制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩgG、IgM及ＩgA，分别建立了检测ＤＮＶ特异性ＩgG、IgM、ＩgA的间接ＥＬＩＳＡ方法，抗原最适包被量为１．３４μg/孔。酶标兔抗鸡ＩgG、IgM、ＩgA的最佳稀释度分别为１：４００，１：４００，１：１００，血清样品检测ＩgG时，最适工作浓度为１：４００，检测IgM时为１：５０。该方法具有特异性强、灵敏度快，快速简便等优点，适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测，同时也为城疫免疫要理研究及流行病学调查提供了可靠手段。     

人血清中分离纯化鸡IgG、IgM的实用方法

本试验用绵羊红细胞免疫鸡,免疫后5天采血,制备富集IgM血清。应用硫酸铵粗提、Sepharose-4B分子筛层析方法,从富集IgM的鸡血清一次性分离提取高纯度的IgM及纯度较高的IgG,DEAE－52纤维素离子交换层析进一步纯化,获得电泳纯的IgG。经鉴定该方法制备的IgG,IgM完全可以满足免疫学实验要求,从一份血清样品中同时纯化IgG、IgM两种免疫球蛋白,既省时又节省原料。     

鸡新城疫高免血清的制备

采用鸡新城疫Lasota株病毒（NDV）和鸡新城疫灭活疫苗按6组不同的免疫程序免疫12只12周龄SPF公鸡,以探索快速制备效价较高的鸡新城疫高免血清的方法。结果表明,不同的NDV剂量可以影响抗体水平增长的速度,免疫剂量越大,抗体水平增长越快;但是NDV两次免疫后只能使抗体水平增长到10log2,而再以灭活疫苗免疫可使抗体水平达到14log2。     

富锗种蛋对其初生雏鸡血清IgG,IgM水平的影响

通过给父母代种鸡饲喂四个不同梯度剂量的Ge-132,以获取富锗种蛋,分组孵化后,各取初生雏鸡100只定为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组;另取普通种蛋孵出的初生雏鸡100只,设为第Ⅴ组,以作对照。各组再分成两个小组,每小组50只,其中Ⅰ-1、Ⅱ-1至Ⅴ-1小组按常规进行免疫处理;而Ⅰ-2、Ⅱ-2至Ⅴ-2小组则不进行免疫。于1、7、14、21、28日龄时分别采血、检测血清IgG、IgM含量,结果显示:1日龄雏鸡血清IgG、IgM含量Ⅰ～Ⅳ显高于第Ⅴ组,差异极显著(P<0.05);1日龄后,Ⅰ～Ⅳ组抗体水平逐渐下降,至7日龄时,降至低谷并接近对照组;其后,至28日龄间各组雏鸡血清IgG,IgM含量又呈上升趋势,而Ⅰ～Ⅳ组始终高于第Ⅴ组、但差异并不明显(P>0.05);各免疫处理小组与非免疫小组比较,二者间未见明显的、规律性差异。实验结果首次证实:富锗种蛋孵出的雏鸡,其血清IgG、IgM水平明显高于普通雏鸡,尤于1周龄阶段内更为显著。表明Ge-132能明显地提高初生雏鸡的抗体水平。     

兔脑炎原虫病患兔血清中IgG的测定

以临床症状和病理学变化确诊为兔脑炎原虫感染的家兔为研究对象 ,经间接 EL ISA法对其机体体液免疫状况进行研究 ,并与健康家兔进行比较 ,结果表明兔脑炎原虫病兔外周血 Ig G含量明显高于对照组 (P<0 .0 5)。提示兔脑炎原虫入侵兔体后 ,病兔体液免疫功能有所增强。     

孔雀IgG与鸡IgG的初步比较研究

通过比较孔雀 Ig G与鸡 Ig G的相似性 ,证实鸡疾病诊断试剂用于孔雀疾病诊断的可行性。用饱和硫酸铵盐析法提纯鸡 Ig G、孔雀 Ig G,比较 Ig G粗提物的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱。用直接 EL ISA方法分析孔雀 Ig G、鸡 Ig G与抗鸡 Ig G结合程度的差异 ,并用蛋白免疫转印法进一步验证二者与抗鸡 Ig G的结合情况。最后 ,应用数种鸡疾病诊断试剂盒及血凝抑制实验进行孔雀疾病的血清学调查及诊断应用初步研究。结果表明 :孔雀 Ig G与鸡 Ig G具有较大相似性 ,并能够与兔抗鸡酶标二抗结合 ,但结合力弱于鸡 Ig G;可应用鸡疾病诊断试剂盒诊断孔雀疾病     

抗猪瘟免疫球蛋白在猪初乳中变化规律研究

以猪瘟弱毒疫苗免疫空怀母猪,待母猪分娩后,分别收集10d内的乳汁,以建立的间接ELISA法检测猪瘟IgA、IgG、IgM水平,并观察各种抗体动态变化规律。试验结果表明,猪初乳中的IgA、IgG、IgM抗体效价均在分娩当天达到最高值,随后迅速下降,7d后抗体水平与常乳基本一致(>0.05)。对照组母猪仅在分娩当天检测到较低的抗体水平。     

Serum IgM concentrations in normal,fit horses and horses with lymphoma or other medical conditions

The purposes of this study were to (1) prospectively establish serum IgM and IgG concentrations in normal, fit, adult horses over time and (2) determine the accuracy of serum IgM concentrations for diagnosing lymphoma. Serial IgM and IgG concentrations were measured with a radial immunodiffusion assay in 25 regularly exercised horses at 6-week intervals. Horses had serum IgM concentrations ranging from 50 to 242 mg/dL over 5 months, with 20% of horses having IgM < or = 60 mg/dL. The normal range for IgM in fit horses should be considered 103 +/- 40 mg/dL and a cut-point for an IgM deficiency, < or = 23 mg/dL. IgG concentrations ranged from 1,372 to 3,032 mg/dL. Retrospectively, medical records of adult horses (n = 103) admitted to the Cornell University Hospital for Animals for which serum IgM was measured were examined. Horses were categorized as "lymphoma negative" (n = 34) or "lymphoma positive" (n = 18). The sensitivity and specificity of a serum IgM concentration (< or = 60 mg/dL) for detecting equine lymphoma was 50 and 35%, respectively. At the new cut-point (< or = 23 mg/dL), the sensitivity was low at 28% and the specificity improved to 88%. The negative predictive values at various population prevalences indicate that a horse with a high serum IgM (> 23 mg/dL) is unlikely to have lymphoma, whereas the positive predictive value (70%) does not allow for reliable determination of lymphoma in a horse with serum IgM < or = 23 mg/dL. Therefore, serum IgM concentrations should not be used as a screening test for equine lymphoma.     

IgG, IgM and IgA in the serum of cattle naturally infected with Mycobacterium paratuberculosis

Serum IgG, IgM and IgA antibody response in 20 cattle naturally infected with Mycobacterium paratuberculosis and in 15 non-infected cattle were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. A strong IgG response was detected in 16 (80%) of the infected animals. Diagnostic levels of IgM were detectable in all of the infected animals as well as in 8 (53%) of the non-infected animals. Animals with paratuberculosis had a very weak specific serum IgA response and this appears to be of little value in detection of infection in these animals.