猪附红细胞体PCR检测方法的建立

 根据已发表的部分猪附红细胞体序列设计了一对特异性引物，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增出了一条约936 bp的基因片段，并成功地将该基因克隆于克隆载体PMD18-T，经酶切分析和PCR进一步鉴定后进行序列测定，结果表明，所克隆的目的基因与GenBank中发表的序列一致。并利用特异性引物初步建立了猪附红细胞体病PCR检测技术。     

猪附红细胞体特异性基因的克隆和序列分析

为分析吉林省流行的猪附红细胞体基因序列,根据发表的猪附红细胞体16S rRNA基因序列设计引物,扩增出长度约为541 bp的基因片段,并成功地将该基因克隆到pGEM-T Easy载体.将经Not Ⅰ酶切鉴定和PCR鉴定为阳性的重组质粒进行测序,与发表的附红细胞体基因序列进行比较,试验所获得的核苷酸序列与猪附红细胞体16S rRNA基因序列非常相近,同源性为97.8%～100%,从而证明吉林省所流行的猪附红细胞体属于16S rRNA基因群.     

猪附红细胞体解离方法的比较

为建立一种简便易行的猪附红细胞体的解离方法，对同一患有附红细胞体病猪的血液样本进行解离，比较了两种方法对附红细胞体的解离效果．结果表明，应用水浴法解离附红细胞体较化学试剂法解离效果好；再用超声波粉碎，经Sephadex G-200柱层析，即可取得纯度较高、提取量较大的附红细胞体抗原成分．为进一步研究附红细胞体的生物学特性及抗原分析奠定了基础．     

半套式PCR方法检测猪附红细胞体病的建立

建立一种客观敏感的附红细胞体病早期实验室诊断方法。本实验采用已公布的附红细胞体序列设计半套式引物进行PCR扩增,对扩增出得特异性条带进行序列分析。镜检结果阳性率为75%,PCR检测结果阳性率为90%,测序结果与已公布的序列同源性达99.9%。半套式PCR方法比镜检高效准确,适合附红细胞体病的早期诊断。     

猪附红细胞体病的防治

猪附红细胞体病是由附红细胞体寄生于猪红细胞和血浆中而引起的一种传染病,主要引起猪高热、贫血、黄疸和全身发红,腹部皮下和四肢末梢发紫,且多为隐性感染.猪、绵羊、牛、马、犬、猫和其它动物易感,主要由吸血昆虫如蚊、跳蚤、虱、疥螨、虻、蠓等传播,注射针头、交配、手术器械也可以传播本病.     

猪附红细胞体病的诊断与防治

综述了猪附红细胞病的历史与分布、病原学、流行病学和病理变化,阐述了该病的临床诊断与防治措施。     

猪附红细胞体病研究进展

猪附红细胞体病是一种发热性溶血性疫病,主要由吸血昆虫传播,特征是贫血、黄疸、发热。该病常与其它疫病混合感染,表现不同交叉症状。本文综述了猪附红细胞体病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、诊断方法及其防治措施。     

猪附红细胞体病诊治初探

根据临床经验,探讨了猪附红细胞体病诊治措施。     

猪附红细胞体病的防治

猪附红细胞体病是由附红体感染引起,呈世界流行,病原对人也有致病作用,危害较大;血液传播是本病的主要传播途径,应激对本病具有促发作用;病猪表现全身缺氧,黄疸和组织器官衰竭,耐过猪生长发育不良;消灭猪场的蚊虫,加强饲养管理可有效预防本病的发生,四环素类药物是治疗本病的极佳选择。     

猪附红细胞体PCR诊断方法的建立

据猪附红细胞体重庆株16S rRNA基因的序列特点设计合成种特异性引物,建立了猪附红细胞体PCR诊断方法.该方法能特异性扩增840 bp的猪附红细胞体16S rRNA基因片段,而对牛温氏附红细胞体、羊附红细胞体、猫血巴尔通氏体CA株、绵羊肺炎支原体、猪肺炎支原体、假单孢茵、大肠杆茵、沙门氏茵、肝片吸虫、葡萄球菌等的基因组DNA没有扩增条带出现.对猪附红细胞体基因组DNA的最小检测量为0.16 fg.通过对30份临床样品的检测,21份猪附红细胞体感染为阳性,其余为阴性.结果表明:建立的PCR诊断方法具有很高的敏感性和特异性,可用于猪附红细胞体的临床诊断和流行病学调查.     

豫南地区猪附红细胞体病的调查与分析

2002年6月份以来,信阳市各县区及周边地区继去年同期发生猪附红细胞体病后,再次爆发了以高热、皮肤发红、黄疸、贫血等为主要特征的疾病,导致大批猪只的淘汰和死亡。经诊断,确诊为猪附红细胞体病。     

猪附红细胞体病鉴别诊断研究进展

猪附红细胞体病是由立克次氏体目中的附红细胞体寄生于猪的血浆和红细胞中而引起的一种人畜共患的热性传染病。详细叙述了猪附红细胞体病的传播途径和鉴别诊断方法,旨在为控制该病的发生和流行提供一定参考。     

猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测

构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工感染SPF小鼠,感染后通过血液压片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。同时检测对照组和试验组小鼠的血液常规指标变化,红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化,发现试验组小鼠红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,红细胞免疫黏附功能下降,其他指标没有显著变化。     

猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染的诊断与防治

[目的]探索猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染的诊断方法与防制措施。[方法]分别从发病情况、临床症状、病理解剖、诊断防制措施等方面对猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染进行介绍。[结果]猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染可引起断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS);其病征为体温高、贫血、黄疸、精神沉郁,消瘦、发育障碍,同时出现贫血、黄疸、发热等症状;诊断方法有血液压片镜检、血清学检测、猪圆环病毒(PCV)的PCR检测等;防制措施有加强饲养管理、防止继发感染、综合防治、对症治疗等。[结论]该研究为养猪业可能发生的猪圆环病毒与猪附红细胞体混合感染提供了防治方法。     

三种中草药提取物对猪附红细胞体的体外药敏试验

研究了骆驼蓬子、常山、狼毒3种中草药提取物体外抑制猪附红细胞体的效果.结果表明:3种中草药提取物的高剂量组(4000μg·mL-1,2000μg·mL-1)5min后均可完全使附红细胞体从红细胞上脱落,红细胞感染率均为0;中剂量组(1000μg·mL-1)5min后可以使部分附红细胞体脱落,红细胞感染率为15%～30%;低剂量组(500μg·mL-1)无明显药效作用,5min后红细胞感染率仍为70%～85%;而对照组红细胞感染率为90%以上.表明猪附红细胞体对3种中草药提取物的中高剂量组较敏感,低剂量组不敏感.     

河北省猪附红细胞体病的流行病学调查

应用血液压片镜检法对河北省猪附红细胞体病进行了检测,研究猪附红细胞体病在河北省的发病情况和感染率.结果表明:共检测猪血样1 613份,其中阳性血样1 480份,感染率达91.8%.     

猪附红细胞体对仔猪免疫功能的影响及免疫调节剂的筛选

为研究猪附红细胞体对仔猪免疫功能的影响,以及比较免疫增强剂对患猪免疫能力的调节作用,试验选择20头健康大白仔猪,随机分为5组,试验组和阳性对照组人工感染附红细胞体,3个试验组分别给予免疫增强剂防风多糖、黄芪多糖及左旋咪唑,另一组作为阴性对照组,然后测定实验动物的细胞免疫和体液免疫指标。结果表明:猪感染附红细胞体病后,细胞免疫和体液免疫能力均下降。比较3种免疫增强剂的作用,黄芪多糖的免疫增强作用较好。     

猪附红细胞体的形态学观察

对感染附红细胞体临床症状典型的10头猪的10个样品分别进行新鲜血液压片、瑞氏染色、姬姆萨染色镜检,进而对其电镜扫描进行形态学观察.结果表明,大小不等的链球状、卵圆形、杆状的附红细胞体单一或成团寄生在红细胞表面,使红细胞膜表面出现皱褶、突起、凹陷,红细胞失去球形立体形态,有的呈齿轮状或星芒状,有的呈不规则的多边形,红细胞结构和功能均发生了改变.     

Detection of Eperythrozoon wenyoni by PCR assay

The objective of this research was to develop a detection method for Eperythrozoon wenyoni infection using polymerase chain reaction (PCR) assay technique. A pair of primers was designed and synthesized according to the conservative sequence 16S rRNA. The PCR assay was performed with the primers. A 985-bp fragment was amplified by using PCR. The amplified fragments with the expected size were identified by EcoR I restriction digestion. The crossing-reaction, specific-reaction and duplicate-reaction indicated that the PCR method is a specific, sensitive, fast and effective method for diagnosing E. wenyoni infection at group level.