新城疫V4克隆疫苗的研究与应用Ⅲ.疫苗的田间试验

将NDV4克隆鄂92株制备6批活疫苗用于田间试验,用106EID50免疫7～18日龄雏鸡无毒副作用,免疫持续期达4个月以上.自然传播免疫试验表明,将非免疫鸡同免疫鸡群混合2周后,非免疫鸡群可测到抗体.试验中对榛鸡、鹌鹑和鸽等的安全性和免疫效果进行了测定,结果表明,该疫苗对这些经济禽类是安全的,并能产生理想免疫效果.     

鸡新城疫V4克隆株疫苗研究与应用Ⅰ·V4克隆株/HB92选育及生物学特性测定

从澳大利亚引进NDV4自然无毒株,经耐热选育,利用蚀斑技术克隆病毒,选育出NDV HB92株,56℃ 6h对该毒株病毒活性没有影响;室温(10～25℃)条件下保存6个月,37℃保存2周,病毒仍有活力;37℃下保存8周,HA滴度不变.鸡胚平均致死时间(MDT)>168h;1日龄鸡脑内致病指数(ICPI)为0.00;鸡静脉致病指数(IVPI)为0.00.将含毒尿液接种18日龄雏鸡,接种量为105EID50,接种后14d测定NDHI抗体效价≥24,强毒攻击保护为100%.     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究Ⅱ报——疫苗的免疫持续期及保存期试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿囊液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获茵液,经灭活后制备成5批油乳剂灭活苗(批号2001-1～2001-5),用于免疫2月龄以上的青年鸡,试验分一次免疫组和二次免疫组,分别在免疫后1个月、3个月、6个月、9个月进行ND和FC强毒攻击保护试验,结果表明,相同剂量分两次免疫,近期效果差异不明显.一次免疫组,6个月攻毒ND的保护为100%、FC保护为80%;8个月攻毒ND的保护为95%、FC保护为52.5%.二次免疫组.6个月攻毒ND的保护为100%,HI抗体1:64以上;FC攻毒保护87.5%;8个月攻毒ND的保护为100%,FC保护为77.5%.疫苗保存期试验证明,4～8℃冰箱保存可达18个月,10～20℃保存的有效期为4个月.     

禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究I报——疫苗的制备、免疫效果及安全性试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获菌液,经灭活后制备成油乳剂灭活疫苗,应用该疫苗分别免疫18日龄雏鸡和60日龄以上的青年鸡;18日龄雏鸡免疫量为每只0.25mL,免疫后2周可测到ND抗体HI≥1∶16,3周攻毒ND保护率为100%;90～120日龄鸡免疫量为每只1mL,免疫3周攻毒,禽霍乱保护率为87.5%～100%。安全性试验表明,18日龄雏鸡注射0.5mL、120日龄鸡注射2mL疫苗,观察14天,无不良反应。     

禽霍乱、新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究Ⅰ报——疫苗的制备、免疫效果及安全性试验

采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获菌液,经灭活后制备成油乳剂灭活疫苗,应用该疫苗分别免疫18日龄雏鸡和60日龄以上的青年鸡;18日龄雏鸡免疫量为每只0.25mL,免疫后2周可测到ND抗体HI≥1∶16,3周攻毒ND保护率为100%;90～120日龄鸡免疫量为每只1mL,免疫3周攻毒,禽霍乱保护率为87.5%～100%.安全性试验表明,18日龄雏鸡注射0.5mL、120日龄鸡注射2mL疫苗,观察14天,无不良反应.     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗免疫效果及免疫机理的研究

 用禽脑脊髓炎病毒 (AEV)不同毒株分别接种易感鸡胚所制作的油乳剂灭活疫苗 ,分别给 4组正常 1周龄雏鸡接种免疫 ,另设 1组SPF雏鸡作空白对照。对免疫前后及攻毒后的雏鸡 ,以琼脂扩散试验 ,淋巴因子的提取 ,血清IgG的分离、纯化及检测 ,鸡胚敏感试验 ,病理学观察为检验手段 ,以期对本油乳剂灭活疫苗的免疫效果作出综合评定 ,同时根据各试验的结果对免疫机理作初步的探讨。结果表明 ,各组试验用疫苗均安全有效 ,雏鸡免疫后体内抗体持续保持高水平 ,雏鸡免疫期至少达 37周 ,子代鸡胚敏感试验保护率≥ 92 .3%以上。免疫机理方面 :以IgG为主的体液免疫在抵抗感染过程中起关键作用 ;细胞免疫也同时存在 ,并与日龄的增长存在一定的相关性 ,而与疫苗接种不存在相关性     

胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND常规免疫效果之影响

为探明用IBD疫苗进行鸡胚免疫的可行性,探讨了胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND常规免疫接种效果的影响．将IBD中等毒力疫苗接种18日龄鸡胚,出壳后按常规免疫方法进行ND免疫,检测抗体水平、免疫细胞数量及功能和免疫保护力等．结果表明,胚期接种IBD中等毒力疫苗对雏鸡ND常规免疫具有免疫抑制作用．     

鸡胚MD免疫器官组织形态学变化

用马立克氏病(MD)三价苗对18日龄鸡胚免疫后,其免疫器官(法氏囊,胸腺,脾脏)中的酯酶阳性T淋巴细胞,浆细胞数量明显高于1日龄雏鸡免疫组,而后者又高于未免疫对照组。表明18日龄胚胎免疫比1日龄雏鸡免疫能更早地产生较好的免疫应答,并能更早地促进免疫器官的免疫成熟。     

仔猪红黄痢疫苗的最小免疫剂量、免疫持续期和保存期试验

用大肠杆菌K88、K99、987P菌株和C型产气荚膜梭菌制备成仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗(仔猪红黄痢疫苗),以不同剂量的疫苗免疫怀孕母猪,然后对其所产仔猪用发病剂量的相应菌株进行攻毒,同时将连续3批疫苗置2～8℃保存,分别于保存后的不同时间取样进行保存期试验。结果发现,用1.6mL以上剂量疫苗免疫组仔猪的攻毒保护率均在80%以上。通过对免疫母猪所产的1、4、7和10日龄仔猪进行攻毒,仔猪的攻毒保护率均不低于80%,说明疫苗免疫产生期为仔猪吸食初乳后24h内,仔猪被动免疫持续期为7d以上。疫苗保存期检测结果显示,疫苗保存27个月后,疫苗的性状检验合格,对怀孕母猪安全,疫苗免疫母猪所产仔猪攻毒保护率均不低于80%。因此,确定疫苗的最小免疫剂量为1.6mL,仔猪被动免疫持续期为7d以上,疫苗保存期为2～8℃保存24个月。     

影响“鸡新城疫”免疫效果的因素

<正> 一、免疫日龄及抗体的健康雏鸡发育的健状与否对免疫有着直接的关系,幼龄鸡因发育不完全,对抗原的反应很弱,在通常情况下1—10日龄的雏鸡抗力弱于10—15日龄的雏鸡;另外机体的壮弱直接影响对疾病的抵抗能力。雏鸡健壮,免疫力就强,反之免疫力就差;还有呼吸道疾病,球虫病、大量贫血性疾病等,也会影响抗原产生相应的抗体。二、母源抗体 1、免疫母鸡通过卵黄传给下一代的抗体,一般是:①1—3个月生的卵,孵化雏10—12日龄母源抗体效价为1:16—1:32倍;②4—6个月生的卵,孵化雏10—12日龄母源抗体效价1:4—1:16倍;③8—9个月生的卵,孵化出的雏鸡10—12日龄母源抗体效价1:2—1:4倍。 2、免疫基数不同,效果也不一样:①母源抗体1:16倍的雏鸡,免疫后10天,抗体效价1:8     

雏鸡新城疫疫苗三种不同免疫程序的免疫效力

新城疫（ND）油乳剂灭活苗与LaSota株弱毒疫苗,采用三种不同方法对试验雏鸡进行免疫,依据HI抗体滴度的检测和攻毒试验,比较了雏鸡三种不同免疫程序的免疫效力,结果表明,3种程序免疫的雏鸡60日龄时对强毒攻击均得到完全保护,对母源抗体HI滴度5．2（log2HI值）的雏鸡,2日龄用ND油乳剂灭活苗和LaSota疫苗免疫优于2日龄用ND油乳剂灭活苗免疫或10日和20日龄用LaSota疫苗二次免疫。     

鸡新城疫免疫程序的研究——Ⅱ.单克隆(N-79型)LaSota 系弱毒疫苗对雏鸡饮水免疫的试验

单克隆(N-79型)是新城疫 LaSota 株经克隆纯化制成弱毒疫苗。应用鸡胚尿囊液的疫苗毒对13—26日龄的雏鸡经饮水免疫,1毫升疫苗免疫200只雏鸡,免疫14天后血清 HI 抗体滴度上升到高峰。免疫鸡经新城疫强毒毒株攻击试验证明,鸡体的血清 HI 抗体滴度在3 Log2就能抵抗新城疫强毒的感染。每毫升疫苗经饮水免疫500只雏鸡也可产生坚强的免疫力。这疫苗也可用于滴鼻免疫。这疫苗对雏鸡经2次饮水免疫(间隔4周),免疫期可达5个月以上。这疫苗在一个养鸡场使用时,在免疫后45天该场的鸡群受到新城疫强毒侵害,凡是用过新城疫 B_1和 LaSota 系疫苗免疫的鸡有一部分被感染死亡,而应用单克隆(N-79型)疫苗免疫的鸡没有死亡。     

鸭禽流感疫苗免疫程序研究报告

为了科学制定鸭的禽流感疫苗免疫程序,进行了以下三方面的试验:①不同品种雏鸭母源抗体消长情况测定.结果表明,5～7日龄雏鸭AI-HI抗体可维持较高水平,15～17日龄下降至4.0log2以下.②疫苗首免后抗体检测.结果表明,鸭首次免疫后2周可测出AI-HI抗体,4周时达到高峰;抗体水平持续4周后开始下降.肉鸭免疫一次抗体水平差异较大,不能完全预防禽流感的发生.③肉种鸭及蛋种鸭免疫程序及抗体消长规律的测定.结果表明,7～14日龄初免,60日龄二次免疫和120日龄加强免疫(三次免疫),种鸭的AI-HI抗体水平最高分别可达到9log2、11 log2,二次免疫后8个月其AI-HI平均抗体水平为5.6 log2,三次免疫后10个月其AI-HI平均抗体水平为7.6 log2以上.     

鸡减蛋综合征油乳灭活苗的制备及其免疫效果的测定

本研究以鸡减蛋综合征(EDS—76)当地流行毒株做为种毒培养病毒,配以油佐剂制奋了鸡减蛋综合征油乳灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明,该苗在免疫后第10天即可产生坚强的免疫力(HI效价为8.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(11.25log2),直到第150天,其HI效价仍为(7.5log2)。对所有用苗鸡群(10万余只)跟踪调查10个月,未发现有发病鸡群,免疫效果普遍反映良好。保存期试验证明,该苗在4℃可保存18个月以上,室温阴暗处可保存10个月以上,这些均证明该苗产生免疫力快,强而且持久,可以有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行,应进行大面积的推广应用。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗室温保存工艺的研究

为了提高猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）弱毒活疫苗的耐热性能,用蔗糖、胰蛋白胨、EDTA、乳糖等成分配伍成不同组方,对PRRS病毒进行梯度真空泡沫干燥。37℃ 10 d耐老化试验结果表明,组方T28C-1、T28C-4、T28C-5和T28C-7的病毒损失均＜0.5 Lg;疫苗长期保存期试验结果表明,T28C-4、T28C-5在37℃可保存4个月,25℃及自然条件下可保存5个月以上;将37℃、25℃及4℃下保存3个月的T28C-4干燥疫苗免疫20日龄仔猪,免后2周ELISA抗体水平合格且与商品苗趋势相当。试验结果表明PRRSV泡沫干燥疫苗有很好的耐热效果。     

禽流感疫苗免疫鸡群后HI抗体消长规律及免疫保护临界值的测定

禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)SD-1株(H5N2亚型)接种10日龄SPF鸡胚,收获24h后死亡的鸡胚尿囊液,按照《兽医生物制品规程》制备油乳剂灭活苗,并对200只14日龄雏鸡进行免疫,免疫后每隔1周抽取20只鸡测定HI抗体,并分别选择HI抗体水平为3log2、4log2、5log2、6log2和7log2时进行攻毒。结果表明,疫苗免疫鸡群后第8周抗体达到高峰(8log2),而后逐渐下降,第16周抗体降至5log2。攻毒试验表明,能够抵抗致死剂量AIV攻击的HI抗体临界值为5log2。     

鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒疫苗的研究 Ⅱ、稳症性、保存条件及保存期的测定

本文报道了鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒疫苗的稳定性、保存条件和保存期。稳定性的测定是采用了不同保存条件、不同保存期（月）的二联苗，用抗鸭瘟高免血清或抗鸭病毒性肝炎高免血清中和掉二联苗中的相应弱毒后，测定剩下的鸭病毒性肝炎弱毒和鸭瘟弱毒（满度）分别对9日龄鸡压的半数致死置（LD60）和对鸡胚成纤维细胞（CEF）的半数感染量（TCID60）来判定二联苗的稳定性．保存期的测定是采用不同保存条件（℃）不同保存期（月）的二联苗免疫成年鸭，10天后采血测定抗鸭肝炎病毒中和抗体效价及抵抗1万倍最小致死量鸭瘟强毒攻击的能力．试验结果表明：非冻干二联苗子－15—25℃条件下可保存18个月，0℃冻冻结态下可保存1年，4－10℃可保存半年，15－25℃保存10天。疫苗冻干后，－15—25℃条件下可保存20个月，0℃保存问个月，4－10℃保存12个月，15－25℃保存20天．     

两种鸡大肠杆菌油佐剂灭活苗对雏鸡免疫效果的比较

为了探讨用鸡胚和普通培养基增殖的大肠杆菌在免疫效果方面有无差异,用致病性大肠杆菌地方菌株与标准菌株混合,经鸡胚及固体培养基增殖后,制成两种油佐剂灭活疫苗,分别免疫10日龄雏鸡,免疫后21d抗体达到峰值,抗体在3log2以上维持35d以上,免疫后42d用混合菌液对两种菌苗免疫组分别进行攻击,鸡胚苗免疫组对混合菌液的攻击保护率为93.3%,常规培养苗免疫组对混合菌液的攻击保护率为83.3%。     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的研制与应用

将ＥＤＳ７６的１２７株腺病毒接种到鸭胚尿囊腔内，制备抗原液，经福尔马林灭活与油相佐剂乳化制备成ＥＤＳ７６油乳剂灭活苗。通过对不同日龄鸡群的安全性、免疫性及保存期测定，灭活苗以双倍以上使用剂量肌肉或皮下注射１～６０日龄雏鸡，安全性良好；甩１、１／２和１／４个使用剂量分别免疫２月龄雏鸡，免疫后２１～２８天，血清中血凝抑制（ＨＩ）抗体平均滴度达到高峰，均可达到２７以上，其免疫原性均达到效力检验的标准要求；灭活苗在室温２０～２５℃保存２个月，４～８℃保存７个月时，ＨＩ抗体平均滴度仍保持相当高的水平。     

IB(M41株)种毒代次和免疫原性的关系

评估不同代次IBV M41株种毒是否可以作为生产用种子。将M41株种毒用SPF胚连传8代,从中选出第3、第5、第7代,测定其EID50。并用此3代M41株鸡胚尿囊液制毒的油乳苗免疫易感鸡,以HI试验检测其抗体水平。3种疫苗免疫鸡均保护9/10以上,对照鸡全发病;对免疫后与免疫前HI抗体水平的比较表明,免疫后抗体平均滴度提高3倍以上。不同代次的M41毒株的免疫原性仍然保持良好,可以正常用来制造疫苗和建立种子批。