碱性蛋白酶水解丝素蛋白的动力学研究

深入了解碱性蛋白酶水解丝素蛋白的作用机理,通过对酶促水解反应过程研究,并根据试验结果和经验公式推导,得可控酶解动力学方程。对推导出的模型准确性进行试验验证,结果显示在一定的范围内可以表征碱性蛋白酶-丝素蛋白的反应规律。     

大米蛋白的双酶法水解条件研究

[目的]为研究大米蛋白的酶法水解条件,提高大米蛋白的溶解、乳化和发泡性能。[方法]通过酶催化反应进程确定酶的加入方式;通过均匀设计实验和Mathematica数学软件确定酶的反应条件。[结果]结果表明碱性蛋白酶和复合蛋白酶的共同水解效果高于单一酶制剂;酶催化反应过程中,大米蛋白的溶解性、乳化性和发泡性等指标变化趋势不同,水解度与上述指标之间也没有对应关系。[结论]得出的结论是双酶法水解更适于改善大米蛋白的溶解性能;两种酶之间有一定的协同作用,适当控制反应条件可以分别得到溶解、乳化或发泡性能显著的大米蛋白水解物。     

响应曲面法研究白果蛋白的酶解工艺

[目的]确定白果蛋白的最佳酶解条件。[方法]分别采用木瓜蛋白酶,2709碱性蛋白酶,中性蛋白酶对白果蛋白进行酶解,并对酶解效果较好的碱性蛋白酶进行单因素试验,考察各因素对酶解效果的影响;采用Designexpert软件设计试验、创建模型,采用响应曲面法分析试验结果。[结果]碱性蛋白酶对白果蛋白的水解度最大（50.50%）;酶解温度为50℃时蛋白水解度最大,酶用量为3g和酶解时间为6h时蛋白水解度达到稳定点;据模型分析,各因素对酶解效果的影响依次为：pH值〉温度〉底物浓度,最佳酶解条件为：时间6h,酶用量2g,pH值9.0,温度47℃,底物浓度2.17%。[结论]最佳酶解条件下白果蛋白的水解度可达67.75%,水解液过膜后干燥可得粗多肽1.3g（占干燥白果粉的6.51%）。     

酶法制备大米活性肽及抗氧化性的研究

以水解液中活性多肽的得率为目标,分别采用5种蛋白酶对大米蛋白进行水解,得出最佳水解酶。水解大米蛋白然后脱盐处理,用铁氰化钾测定了大米多肽的还原能力,并考查了大米多肽对羟基自由基(.OH)、超氧阴离子(O2-.)、二苯代苦味肼酰基自由基(DPPH.)的抑制作用,并同VC做了比较。结果表明:大米蛋白制备活性肽的最佳水解工具酶为枯草杆菌碱性蛋白酶。大米多肽具有还原能力,并对这几种自由基体系具有不同的清除作用。在20.00～50.00 mg/mL时,大米多肽和VC对.OH的清除作用相当;大米多肽对O2-.的清除作用随浓度的增加而增强;在5.00 mg/mL时,大米多肽对DPPH.的清除率达到57.69%,但对O2-.和DPPH.的清除能力均低于VC。     

大米蛋白酶水解条件及水解度对合成类蛋白的影响

观察了胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解米渣蛋白的条件及其水解度对合成类蛋白反应的影响。结果表明:胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解大米蛋白的最适温度分别为50℃、60℃和60℃,最适起始pH值分别为10.0、11.0和1.0,底物浓度分别为7%、5%和5%,E/S为1%、3%和7%,水解时间为4 h;该条件下,3种酶水解大米蛋白的水解度分别为54.0%、71.4%和57.3%,氮收率分别为56.3%、73.8%和58.1%;随着水解时间的延长,胰蛋白酶和胃蛋白酶水解产物中肽类组分变化小,而碱性蛋白酶水解产物中小分子的组分显著增加;大米蛋白水解产物的水解度对类蛋白反应的产率有显著影响,以胃蛋白酶为类蛋白合成酶时,大米蛋白的胰蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶水解产物的水解度分别在54.0%、71.4%和69.1%时,合成类蛋白的产率最高,分别为2.6%、17.5%和15.2%。     

碎米蛋白提取及高剪切辅助酶法改善其溶解性研究

[目的]研究碎米蛋白提取,并通过改性提高碎米蛋白溶解性的关键技术,为解决优质蛋白缺乏问题提供技术参考.[方法]以早籼碎米为原料,采用单因素试验与正交试验相结合的方法,分别以蛋白提取率和蛋白溶解度为考察指标,确定超声波辅助碱法提取碎米蛋白及高剪切辅助酶法改善其溶解性的最佳方案.[结果]提取碎米蛋白的最佳工艺:NaOH质量浓度0.4%、固液比1:8(g/mL)、提取时间2 h,碎米蛋白提取率为70.79%,各因素对碎米蛋白提取率的影响排序为NaOH质量浓度>提取时间>固液比;提高蛋白溶解性的最佳工艺:剪切转速3500 r/min、剪切时间30 min、剪切温度45℃、加酶量1.5%,碎米蛋白溶解度由0.53%提高至28.00%,各因素对碎米蛋白溶解性的影响排序为剪切转速>剪切时间>剪切温度>加酶量.[结论]超声波与碱法联用可提高碎米蛋白提取率,高剪切辅助酶法可提高碎米蛋白溶解性.     

Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用及水解物的性质。[方法]通过单因素试验,研究pH值、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大豆分离蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0、温度60℃、酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,大豆分离蛋白水解度为46.13%。[结论]酶解后大豆分离蛋白的水解度达到了制备大豆多肽的要求。     

响应面法优化鳙鱼鱼肉蛋白的酶解工艺

[目的]为鳙鱼及其他淡水鱼鱼肉蛋白资源的高价值利用提供指导。[方法]首先比较6种不同蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力,找出酶解能力最高的蛋白酶。通过响应面分析法优化酶解鳙鱼蛋白的工艺条件,探讨酶解过程中酶底物浓度比（[E]/[S]）、pH值和温度对酶解物水解度的影响。并分析酶解物的氨基酸组成。[结果]碱性蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力最强,蛋白回收率最高。其酶解鳙鱼鱼肉蛋白的最佳工艺条件为：[E]/[S]1.7%、pH值9.7,温度57℃。鳙鱼鱼肉蛋白在该条件下水解度理论值为25.24%。氨基酸组成分析结果表明,该工艺下所得酶解物的氨基酸组成与鳙鱼鱼肉蛋白的氨基酸组成差别不大,酶解物很好地保持了鱼肉蛋白的特定氨基酸模式。[结论]优化了镛鱼鱼肉蛋白的酶解工艺。     

酶解大米饮品的研制

以大米为原料,探讨了大米饮品的制备工艺条件。通过正交试验研究了真菌淀粉酶的作用条件、大米饮品乳化稳定剂的复配方案及产品配方。结果表明：大米酶解工艺参数为：温度65℃、加酶量8μg/g底物、酶解时间90 min、底物浓度为20%;大米饮品最佳稳定剂为：微晶纤维素0.30%、卡拉胶0.0125%、单（双）甘油脂肪酸酯0.04%、蔗糖脂肪酸酯0.04%;大米饮品最适配料为：大米酶解液75%、小麦胚芽油1.0%、白砂糖4%、食用盐0.010%。     

酶解大米饮品的研制

以大米为原料,探讨了大米饮品的制备工艺条件。通过正交试验研究了真菌淀粉酶的作用条件、大米饮品乳化稳定剂的复配方案及产品配方。结果表明:大米酶解工艺参数为:温度65℃、加酶量8μg/g底物、酶解时间90 min、底物浓度为20%;大米饮品最佳稳定剂为:微晶纤维素0.30%、卡拉胶0.012 5%、单(双)甘油脂肪酸酯0.04%、蔗糖脂肪酸酯0.04%;大米饮品最适配料为:大米酶解液75%、小麦胚芽油1.0%、白砂糖4%、食用盐0.010%。     

大米淀粉提取工艺的研究

[目的]优化Alcalase蛋白酶酶法提取纯度较高的大米淀粉的工艺,从而解决库存谷物严重浪费的问题。[方法]以大米为原料,以Alcalase蛋白酶酶法提取大米淀粉,采用3因素正交实验设计优化提取工艺。采用凯氏定氮法GB5511285测定蛋白质含量,蒽酮比色法测定淀粉含量。[结果]各因子对蛋白质去除和淀粉得率的影响顺序为:反应温度>酶添加量>反应时间。对蛋白质去除的最优组合为温度50℃,酶添加量0.3%,反应时间6 h。淀粉提取的最优工艺组合为温度50℃,酶添加量0.2%,反应时间5 h。[结论]综合考虑,以大米为原料,采用Alcalase蛋白酶酶法除蛋白质提取大米淀粉的最优工艺为温度50℃,酶添加量0.2%,反应时间5 h。在此条件下得到的大米淀粉中蛋白质含量为0.39%,淀粉提取率为89.53%。     

酶水解法制取大米蛋白的机理研究

根据糖类化合物成分和蛋白质形态特征的变化研究了淀粉酶水解法从米渣中制取高纯度大米蛋白的机理。高压液相色谱(HPLC)分析显示,随着淀粉酶水解时间的延长,高分子糖组分含量降低,而低聚糖含量增加,表明α-淀粉酶通过水解米渣中的多糖物质使蛋白质与糖得以分离。扫描电子显微镜(SEM)对不同纯度蛋白质表面微观形态观察发现,随着蛋白质纯度的提高,其表面结构变化依次为连续光滑-蜂窝状结构-凝胶状片层结构,表明去除糖类物质可有效提高蛋白质的纯度。     

可溶性大米蛋白水解液的干燥工艺

[目的]对自制的可溶性大米蛋白水解液进行干燥。[方法]采用自然干燥法、热风干燥法、真空干燥法和喷雾干燥法。[结果]采用喷雾干燥法的效果最好。[结论]初步确定了喷雾干燥的主要参数,即固液比为25%～30%,喷头压力为0.6～0.8MPa,进口温度控制在250～300℃,工作压力为5MPa,出口温度控制在80～85℃。     

柞蚕蛹蛋白溶解性与阳离子关系研究

[目的]为柞蚕蛹蛋白的提取及应用奠定基础。[方法]在分离柞蚕蛹蛋白的基础上,通过均匀设计法研究在不同pH值下不同浓度阳离子(Na+、Mg2+、Ca2+和Zn2+等)对柞蚕蛹蛋白溶解性的影响,并拟合出柞蚕蛹蛋白溶解性与阳离子的回归方程。[结果]阳离子Zn2+、Ca2+、Mg2+、Na+和pH值对柞蚕蛹蛋白的溶解性均有极显著影响。各阳离子对蛹蛋白溶解性的影响顺序为:Zn2+>Ca2+>Mg2+>Na+,且其溶解性随着离子浓度的增加呈先升后降的趋势。所得回归方程的拟合效果较好,可用于对蛹蛋白溶解性进行分析。[结论]根据该试验结果与数学模型分析,可快速算出蛹蛋白的溶解度,有利于柞蚕蛹蛋白在食品加工中的应用。     

米糠蛋白提取工艺的优化及其特性研究

 【目的】建立米糠蛋白在较弱碱性和较低温下保持其特性的高效提取工艺并明确其理化特性。【方法】采用二次通用旋转正交组合设计优化米糠蛋白提取的最佳工艺条件;米糠蛋白特性分别考察其在不同pH、温度、离子强度下的溶解性、乳化性和起泡性,其中,溶解度的测定采用凯氏定氮法,乳化性的测定采用离心法,起泡性的测定采用体积法。【结果】建立米糠蛋白的最佳提取条件为：以pH 11的弱碱性水溶液为溶剂,提取温度40℃,提取时间120 min,在此条件下蛋白提取率可达80.93%。米糠蛋白的溶解度在等电点附近达到最低并随温度升高而增大,离子会降低其溶解度;pH、温度、离子强度对乳化性的影响与其对溶解性的影响表现一致性,蛋白浓度越高其乳化性越好;等电点附近米糠蛋白具有最低的起泡性和最强的泡沫稳定性,适当的热处理可以增强其起泡能力,且随着离子和蛋白浓度的升高起泡能力明显增强。【结论】在较弱碱性（pH 11）和低温度（40℃）条件下提取米糠蛋白的得率可达80.93%,且所得米糠蛋白特性良好,显示出较好的应用前景。     

水稻蛋白质改良的研究进展

目前,稻米蛋白质含量低、营养不够全面,满足不了人们对营养的需求。综述了水稻蛋白质改良的研究现状,以及传统育种方法和细胞工程方法在水稻蛋白质改良上的应用,并对今后的研究方向提出建议。     

玉米胚芽分离蛋白溶解性及对小鼠免疫功能影响的研究

以湿法脱胚的玉米胚芽为原料,采用碱溶酸沉法制备了玉米胚芽分离蛋白;探讨了不同条件如温度、pH、盐浓度等对玉米胚芽分离蛋白的溶解性,解释了溶解性在这些条件下的变化的规律。研究了玉米胚芽分离蛋白对小鼠体内的免疫调节作用,研究结果表明,玉米胚芽分离蛋白能显著提高正常小鼠的免疫脏器指数、腹腔巨噬细胞的吞噬百分率、吞噬指数和淋巴细胞的转化功能活性,促进溶血素的形成。结果提示:玉米胚芽分离蛋白能提高机体的免疫功能,是一种很好的非特异性免疫激活剂。     

花生蛋白酶解条件及酶解产物功能特性的研究

[目的]研究花生蛋白酶解条件、酶解产物的功能特性。[方法]采用酶解法,从花生饼粕粉中提取花生蛋白,通过单因素试验,考察了不同条件下花生饼粕粉中蛋白质的提取情况,并对其功能特性进行了研究。[结果]最佳的蛋白质提取率的条件为花生饼粕粉在55℃水热处理6 h,固液比为1∶20,溶液pH为12,加酶量为0.5%,在此条件下花生蛋白的提取率为74.62%。[结论]酶解花生蛋白具有较高的提取率。酶解产物具有较好的乳化性、起泡性及保水性。