有氧运动对小鼠心肌、骨骼肌线粒体SOD、MDA、LDH的影响

探讨了有氧运动对小鼠心肌、骨骼肌线粒体SOD、MDA、LDH的影响.结果表明,在3 h游泳运动后,试验组与对照组小鼠心肌中SOD的活性无显著差异(P>0.05),而骨骼肌中SOD活性显著降低(P<0.05);试验组小鼠心肌、骨骼肌线粒体中MDA的含量均有所升高,差异显著(P<0.05):LDH活性有所降低,但差异不显著(P>0.05).说明有氧运动对小鼠骨骼肌中SOD活性和小鼠心肌、骨骼肌线粒体中MDA含量的影响显著,但对LDH活性无显著影响.     

Lactate transporter defect: a new disease of muscle

New methods were used to identify the abnormality in a patient who showed evidence of neuromuscular dysfunction on extensive clinical examination. The methods revealed that the lactate content of the patient's skeletal muscle does not decline normally after exercise and that his red cells are defective in lactate transport. These results suggest that skeletal muscle and erythrocyte membranes share the same genetic lactate transporter (or a common subunit), which is deficient in this patient. This defect may be a common cause of elevated serum creatine kinase levels, as seen in the patient described here and of unexplained episodes of rhabdomyolysis and myoglobinuria.     

竹叶提取物对小鼠运动能力的影响

旨在研究竹叶提取物对小鼠运动能力的影响。选取8周龄健康雄性小鼠45只随机分为阴性对照组、模型组和试验组,检测骨骼肌和心肌组织中丙二醛(MDA)的质量摩尔浓度,并测定超氧化物岐化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。结果表明,试验组小鼠游泳至力竭的时间显著大于模型组。与阴性对照组相比,运动训练后,模型组小鼠骨骼肌和心肌组织中的MDA质量摩尔浓度上升,试验组下降;模型组小鼠骨骼肌和心肌组织中的CAT活性下降,试验组升高;试验组和模型组的SOD活性升高。说明竹叶提取物具有改善运动能力和抗氧化的功能。     

Hexokinase isoenzymes in human erythrocytes

The electrophoretic mobility of hexokinase from human erythrocytes and other tissues was studied with a new method that depends on the fluorescence of reduced nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate for detecting enzyme activity on starch gel. The hexokinase of cord-blood erythrocytes has slightly different electrophoretic properties from that of adult red cells. Type I enzyme is split into type I(A) and type I(F); the latter is more intense in cord blood; in hemolyzates of adult blood, the activity of the two bands is usually about equal. No type II enzyme was found in cord blood. The double type I band was present in red cells from adult rabbits.     

鸭发育早期骨骼肌TNNI1基因mRNA表达 及与肌纤维生长的相关性分析

为探讨慢收缩骨骼肌型Tnl(slow skeletal muscle troponin I,TNNI1)基因在鸭早期肌肉发育中的m RNA表达规律及与肌纤维发育的相关性,以地方品种高邮鸭为素材,采用实时荧光定量PCR方法,检测胚胎期21、25、27胚龄及出雏后5日龄时腿肌腓肠肌外侧头中TNNI1基因m RNA表达量,结果发现,25胚龄是TNNI1基因的表达高峰期,之后显著下调,并持续至5日龄。肌纤维类型变化则是随时间的推移,慢肌纤维比例逐渐升高,快白肌纤维比例逐渐下调;25胚龄时,慢肌纤维直径和横切面积均出现显著增高(P0.05),快白肌纤维横切面积则出现下调;之后,3种类型肌纤维直径和横切面积在各个时间点之间无显著差异(P0.05);相关性分析结果显示,TNNI1基因m RNA表达量与快红肌纤维比例呈显著负相关(P0.05),与肌纤维直径、横切面积均无显著相关性(P0.05)。提示TNNI1可能在鸭发育早期骨骼肌肌纤维类型转换中具有重要的作用。     

Localization of calcium pump activity in smooth muscle

A microsomal fraction isolated from longitudinal smooth muscle of guinea pig ileum actively sequesters calcium ion in the presence of magnesium and adenosine triphosphate in a fashion previously described for microsomes of the rabbit aorta. This activity in guinea pig ileum appears to be associated primarily with the plasma membrane as is found in the red cell. By contrast the uptake of calcium in aortic smooth muscle appears to be associated to an appreciable extent with intracellular membranes, possibly analogous to the sarcoplasmic reticulum of skeletal muscle.     

脆肉鲩与普通草鱼肌肉显微结构观察

【目的】观察对比脆肉鲩与普通草鱼肌肉显微结构的差异,为脆肉鲩的肉质加工提供科学依据。【方法】采集脆肉鲩和普通草鱼的背部白肌、背部红肌和腹部白肌,经石蜡组织切片和苏木素-伊红染色后,显微镜下观察肌纤维的形态特征,用肌纤维直径和密度两个指标衡量脆肉鲩与普通草鱼的肌纤维差异。【结果】脆肉鲩和普通草鱼背部白肌、腹部白肌及背部红肌的基本结构相同。脆肉鲩背部白肌的肌纤维直径（67．6μm）显著小于普通草鱼（109．4μm）（P〈0.05,下同）,肌纤维密度（249条／mm2）N显著大于普通草鱼（121条／mm2）;在腹部白肌和背部红肌的肌纤维直径、肌纤维密度方面,脆肉鲩与普通草鱼无显著差异（P〉0．05）。【结论】脆肉鲩肌肉的肌纤维直径及密度与其肌肉硬度具有一定相关性。     

基于表达谱芯片挖掘鸡骨骼肌不同类型肌纤维的差异表达基因

【目的】肌纤维类型的差异是直接影响肌肉生长发育和肉品质的重要因素,红肌纤维比例高的肌肉肉品质要显著优于白肌纤维比例高的肌肉,然而,目前对于鸡骨骼肌纤维类型形成及转换的分子调控机制尚不明确。本究以中国优良的地方品种清远麻鸡为研究对象,首次对其骨骼肌中不同类型肌肉的转录组差异进行了研究,以期挖掘在鸡肌纤维生成和类型转换中发挥调控作用的关键因子。【方法】采用Agilent鸡全基因组表达谱芯片对清远麻鸡骨骼肌表型差异较大的比目鱼肌和趾长伸肌中与肌纤维类型组成和转换相关的候选基因进行系统筛查,采用荧光定量PCR对芯片筛选出的差异表达基因进行验证,采用慢病毒质粒包装系统构建特异靶向鸡PPARGC1A基因的RNA干扰慢病毒载体进行基因功能研究。【结果】芯片结果共发现差异倍数在2倍及以上的基因1 224个(P0.05,FC≥2),以趾长伸肌作为参照,比目鱼肌中上调基因为654个,下调基因为570个,尽管芯片和荧光定量PCR两种方法得出的差异倍数并不完全一致,但所选基因的表达趋势是一致的,表明芯片结果是可靠的。对差异表达基因进行GO(GO ontology)功能分类,共发现了74个显著性GO,主要分为生物学过程、分子功能和细胞组分等3大类。基于KEGG Pathway分析发现,一些已知的与肌纤维类型转换、肌肉发育以及脂质代谢相关的信号通路在两种类型的肌肉中被显著富集。综合差异基因的GO、KEGG Pathway和共表达网络分析,推测PRKAG3,ATP2A2以及PPARGC1A可能是与肌纤维类型性状紧密关联的关键基因。进一步对PPARGC1A基因进行功能研究发现,PPARGC1A基因的敲低,引起了PPP3CA,MEF2C以及SM等慢肌纤维标志基因以及与肌纤维发育与转换相关基因表达水平的显著降低,而快肌纤维标志基因FWM的表达水平则显著上升。【结论】揭示了鸡红肌和白肌两种不同类型肌肉间的转录组差异,证明了PPARGC1A基因能够与钙离子信号通路相关基因协同从而在鸡肌纤维类型组成和转换中发挥着重要作用,从而为中国地方鸡肉品质性状的遗传改良提供一定的理论依据。     

Control of myocardial contraction: the sensitivity of cardiac actomyosin to calcium ion

The control by calcium ion of the adenosine triphosphatase activity of cardiac actomyosin is similar to that of white skeletal actomyosin. This finding indicates that the slower contraction and relaxation of heart muscle do not reflect different levels to which free calcium ion concentration around the myofibrils must be adjusted during contraction and relaxation and suggests a mechanism whereby myocardial contractility may be regulated.     

Oxygen consumption of red and white muscles from tuna fishes

Metabolic rates of unstimulated, minced preparations of red and white muscles from two species of Pacific tuna fishes (Katsuwonus pelamis and Thunnus obesus) were determined from respirometric measurements of oxygen consumption. Ratios of mean metabolic rates for red muscles to those of white muscles averaged 6.2 at five temperatures over the range of 5 degrees to 35 degrees C. Temperature coefficients (Q10's) for mean metabolic rates for both types of muscle were between 1.0 and 1.2 over the entire temperature range. Metabolic rates of tuna red muscles were equal to those of preparations of mixed red and white muscle from the white rat at 25 degrees and 35 degrees C, and were higher than the mammalian rates at lower temperatures.     

广西麻鸡m6A甲基转移酶基因表达与肌纤维类型及成肌分化的关系

[目的]肌纤维类型及其转化的调节是改善肉质的重要途径,最新研究表明,m6A RNA甲基化修饰在肌肉的分化中发挥着重要作用.以优良的地方品种——广西麻鸡作为研究对象,研究其性成熟日龄不同部位肌纤维类型的组成差异,探究m6A甲基化转移酶相关基因甲基化转移酶样蛋白3/14(methyltransferase like 3/1...     

九香虫醇提物对大鼠运动能力及骨骼肌抗氧化酶系的影响

为探讨补充九香虫醇提物对大鼠运动能力和骨骼肌抗氧化酶系的影响,对大负荷游泳训练大鼠补充剂量分别为0.5、1.0和1.5 g/kg的九香虫乙醇提取物,大负荷训练8周后,测定大鼠力竭游泳时间和骨骼肌抗氧化酶系的活性。结果表明,与对照组（单纯大负荷运动组）比较,大负荷训练后补充九香虫醇提物组力竭游泳时间均明显延长,补充1.5 g/kg九香虫醇提物组游泳力竭时间较对照组延长37.1%;补充九香虫醇提物能够显著提高抗氧化酶系活性,尤其是SOD活性有极显著升高（P<0.01）;补充1.0 g/kg 和1.5 g/kg九香虫醇提物组受试动物血清MDA浓度显著低于对照组（P<0.05）。说明补充九香虫醇提物有助于提高训练大鼠的运动能力及骨骼肌抗氧化酶活性。     

Transport of energy in muscle: the phosphorylcreatine shuttle

In order to explain the insulin-like effect of exercise, it was proposed in 1951 that contracting muscle fibers liberate creatine, which acts to produce an acceptor effect--later called respiratory control--on the muscle mitochondria. The development of this notion paralleled the controversy between biochemists and physiologists over the delivery of energy for muscle contraction. With the demonstration of functional compartmentation of creatine kinase on the mitochondrion, it became clear that the actual form of energy transport in the muscle fiber is phosphorylcreatine. The finding of an isoenzyme of creatine phosphokinase attached to the M-line region of the myofibril revealed the peripheral receptor for the mitochondrially generated phosphorylcreatine. This established a molecular basis for a phosphorylcreatine-creatine shuttle for energy transport in heart and skeletal muscle and provided an explanation for the inability to demonstrate experimentally a direct relation between muscle activity and the concentrations of adenosine triphosphate and adenosine diphosphate.     

补充扇贝寡肽对运动大鼠骨骼肌废用性萎缩的干预研究

目的 通过组织学、免疫组化方法和Calpain活性的测试，观察扇贝寡肽对运动大鼠停训致肌萎缩后肌肉湿重、肌细胞形态、肌纤维直径、横截面积、Calpain活性、肌球蛋白表达以及肌细胞凋亡过程的影响，研究扇贝寡肽对停训后骨骼肌萎缩的干预作用。方法 40只SD雄性大鼠以15m/min的速度，持续性水平跑台训练30min，运动6d/week，休息1d/week，其后以速度递增3m/min/week，运动时间递增30min/week，在为期3周的训练后即随机抽取10只大鼠为基础对照组(A,n=10)，其余大鼠为B组用于制备骨骼肌萎缩模型，3周后随机分组为补充扇贝寡肽组(B1, n =10)、补充安慰剂组(B2, n =10)、补充牛乳组(B3, n =10)。实验组所有动物每天分别进行灌胃15%扇贝寡肽饮料2ml、B3组大鼠灌胃等量的牛乳，B2组大鼠灌胃等量的安慰剂。结果 固定大鼠左侧后肢3周后可导致骨骼肌废用性萎缩，废用性肌萎缩的发生、发展与Calpain活性升高、水解骨骼肌收缩蛋白有关，而且，骨骼肌细胞凋亡增加在废用性肌萎缩的发生发展过程中产生重要作用。而补充扇贝寡肽可显著减低骨骼肌细胞凋亡指数，明显抑制骨骼肌Bax蛋白的表达、促进Bcl-2蛋白的表达，抑制Calpain活性，减少收缩蛋白的降解，维持肌球蛋白结构的完整，从而干预肌萎缩的进程。     

基于全基因组重测序分析藏猪骨骼肌发育相关基因

为从全基因组水平探索影响藏猪骨骼肌发育的遗传变异，本研究对5头迪庆藏猪进行全基因组重测序，并合并NCBI数据库中来自3个省的藏猪、与藏猪同样小体型及生长慢的巴马香猪、及体型大且生长快速的杜洛克和大白猪共70个猪只的全基因组重测序数据进行整合分析，获得全基因组SNP后结合选择信号检测与等位基因频率(AF)分析鉴定藏猪-香猪与杜洛克-大白猪的遗传差异；利用GO和KEGG功能富集分析藏猪骨骼肌转录组与蛋白组相关基因。结果发现:1)2 211个基因在藏猪-香猪与杜洛克-大白猪2个比较组中存在遗传差异，138个基因富集到骨骼肌发育相关的GO功能集及KEGG通路；2)9个基因(UCHL3、POSTN、COL12A1、PGK1、JPH1、GPT2、RBFOX1、FLNB和DCX)已报道参与藏猪60 d胚胎背最长肌发育调控，1个(CKM)参与6月龄藏猪背最长肌发育调控；3)10个基因共包含936个SNP，其中655个SNP位于基因间区，255个是内含子变异，少量SNP是外显子及调控区变异。本研究从全基因组水平鉴定了与藏猪骨骼肌发育相关基因及其遗传变异，为以后持续深入解析藏猪骨骼肌发育的遗传机制提供参考。     

应激过程中骨骼肌内热休克蛋白(HSPs)的变化及其调控机制

在应激反应时,细胞可快速产生一系列蛋白质,这些蛋白质即被称为热休克蛋白(HSP)。人们认为HSPs是一种分子伴侣,在保持细胞稳态当中起着十分广泛的作用。骨骼肌中所表达的HSPs包括小分子HSP家族(泛素、alpha B-晶体蛋白、HSP20、HSP27),HSP70、HSP60、HSP90等。骨骼肌是一个非常复杂的系统,其中的收缩蛋白是由各种不同的肌肉纤维类型所组成,每一种肌纤维均具有其各自的生化组成和功能特征。HSPs 的表达与肌纤维的类型有关。在肌病或体育锻炼过程中HSPs有明显的变化,然而HSP的诱导及调控的分子机制以及它在维持肌肉功能方面的作用尚未完全明了。本文主要阐述了骨骼肌中HSP的变化及其调控的分子生物学机制。     

Histochemical phosphorylase activity in regenerating muscle fibers from myophosphorylase-deficient patients

Fresh frozen sections of mature skeletal muscle fibers from patients with genetically determined "absence" of skeletal muscle phosphorylase (McArdle's disease) have no histochemical phosphorylase activity. That regenerating muscle fibers, in vitro and in vivo, from such patients do have histochemical phosphorylase activity present suggests a loss of enzyme activity with fiber maturity.     

高压氧对急性力竭运动大鼠骨骼肌Fas-mRNA表达与细胞凋亡的影响

[目的]探讨高压氧对急性力竭运动大鼠骨骼肌Fas-mRNA表达与细胞凋亡的影响及其对骨骼肌损伤的恢复作用。[方法]24只健康雄性大鼠,随机分为3组,即：安静对照组（A）、急性力竭运动组（B）、急性运动高压氧恢复组（c）;B组分别进行一次急性力竭运动,C组于运动后应用高压氧疗法,应用HE染色与RT—PCR对各组大鼠骨骼肌细胞凋亡与Fas—mRNA的表达进行检测。[结果]与对照组相比,B组大鼠骨骼肌细胞凋亡数量增多,Fas—mRNA的表达增多,经高压氧治疗后细胞凋亡数量减少,Fas—mRNA的表达降低。[结论]高压氧疗法能抑制Fas．mRNA的表达,减少运动训练大鼠骨骼肌细胞凋亡,促进运动性疲劳与骨骼肌微损伤的恢复。     

山羊MyoG启动子的克隆和活性检测

【目的】肌细胞生成素(myogenin,MyoG) 是生肌调节因子(MRFs)基因家族中唯一能在骨骼肌细胞发育与生长过程中均可表达的调控因子, 在肌肉细胞分化过程中起着中心调控的作用,它正调控着骨骼肌卫星细胞向成熟肌细胞分化的过程,是唯一不可代替的生肌调节因子。MyoG基因在复制、扩增、基因激活、转录、翻译等多级水平上对肌肉发育进行调控。基因转录的起始阶段是机体生长发育因子进行调控的开端,而此阶段调控的实质是通过启动子和上游调控序列的相互作用,调控目的基因的表达。因此克隆MyoG基因的启动子,探讨启动子区域的启动活性,有助于从理论上揭示MyoG基因表达的关键调控位点,同时也有利于揭示肌肉发育调控的相关机理,为治疗人类相关疾病以及改良家畜肉质研究提供实验依据。本研究克隆山羊Myogenin（MyoG）基因的启动子区域,检测其在哺乳动物骨骼肌细胞内的启动活性。【方法】克隆山羊MyoG基因的启动子序列,连入pDsRed2基本骨架构建了以红荧光蛋白基因为标记基因的真核表达载体pDsRed-GoatMyoG(5.3 kb)。表达载体pDsRed-GoatMyoG经酶切和测序鉴定后,分别转染体外培养的绵羊肌卫星细胞、肌管细胞和成纤维细胞,观察红色荧光蛋白表达情况,然后利用实时荧光定量PCR、Western blot和冰冻切片、免疫组化等技术检测细胞转染后标记基因mRNA 和蛋白在体外培养细胞中的的表达活性。pDsRed-GoatMyoG表达载体对小鼠进行肌肉注射,检测GoatMyoG启动子在体内组织中的启动特异性和效率。肌肉注射5 d后,分别取小鼠的注射腿肌肉组织、非注射腿肌肉组织、睾丸组织、肠组织和肝脏组织,通过实时荧光定量 PCR 检测标记基因DsRed在不同组织中的表达情况。【结果】克隆得到的MyoG启动子序列测序正确,载体pDsRed-GoatMyoG经酶切和测序鉴定,证实载体构建成功;转染质粒 pDsRed-GoatMyoG后,肌卫星细胞和肌管细胞在显微镜下均可观察到细胞发红色荧光,成纤维细胞没有红色荧光。通过实时荧光定量PCR检测得出,转基因肌管细胞内GoatMyoG 启动DsRed 基因表达mRNA 的相对量为14.07;通过Western blot技术检测出转基因肌管细胞含有GoatMyoG启动的DsRed蛋白质,在转基因成纤维细胞内没有检测到 DsRed 蛋白质,说明GoatMyoG启动子可在肌肉组织特异性启动外源基因表达。小鼠肌肉注射pDsRed-GoatMyoG质粒后,注射腿肌肉组织内GoatMyoG 启动DsRed 基因转录mRNA 的相对量为212.32,非注射腿肌肉组织内mRNA的相对量为39.76,注射腿肌肉组织和非注射腿肌肉组织内mRNA 的量均是其它组织的1.99倍以上。通过免疫组化技术在注射腿肌肉组织和非注射腿肌肉组织内均可检测到红色荧光蛋白,在睾丸、肠和肝脏内均未检测到DsRed 蛋白。【结论】山羊MyoG启动子可以特异性的在骨骼肌组织驱动外源基因的表达,是一种有效的肌肉特异性启动子。     

新西兰白兔中Myh6基因的表达及与肌纤维性状的相关性

【目的】分析Myh6基因在新西兰白兔Oryctolagus cuniculus肌肉中的表达规律及与肌纤维特性的相关性,探究Myh6基因在肌纤维发育过程中的作用。【方法】利用冰冻切片技术测量了2、4、6、8、10、12周龄新西兰白兔背腿肌中不同类型肌纤维的密度、面积、长径和短径等性状,采用qRT-PCR测量了Myh6基因在不同周龄新西兰白兔背腿肌中的表达量,分析了上述性状与Myh6基因表达的相关性。【结果】2~8周龄新西兰白兔各类型肌纤维的密度逐渐变小,面积、长径和短径则逐渐变大(白肌纤维短径除外,仅在2~6周龄有变大趋势)。Myh6基因在4周龄表达量最高。Myh6基因表达量与公兔背部红肌纤维的面积呈极显著负相关(P0.01),与公兔腿部红肌纤维的密度呈极显著正相关(P0.01)。【结论】Myh6基因表达与肌纤维类型和肌纤维的生长发育密切相关。