应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎的试验

采用CIDR FSH PG法对206头优秀荷斯坦供体母牛进行超数排卵,其中实验组73头超排后用X性控冷冻精液输精(每头3支),获可用胚310枚,头均可用胚4.25枚;对照组133头,采用常规冷冻精液输精(每头3支),获得可用胚787枚,头均可用胚5.92枚,差异不显著。结果表明,用已分离的X精子冷冻精液对超排母牛进行人工授精生产体内性控胚胎是可行的。     

常规精液与性控精液的超数排卵效果比较

采用常规精液输精和性控精液输精对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排试验。超排后,采用常规精液输精供体母牛521头,共回收卵5311枚,平均每头10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。采用性控精液输精供体母牛59头,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控精液组的未受精率大大高于常规精液组,而可用胚胎数和可用率明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了可用胚胎率。     

常规精液与性控精液生产胚胎的效果比较

分别采用常规精液和性控精液输精,对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排效果试验。超排后,521头采用常规精液输精供体母牛,共回收卵5311枚,头均10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。59头采用性控精液输精供体母牛,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控组的未受精率大大高于常规精液组,而有效胚胎数和比例明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中,受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了有效胚胎率。     

利用分离的奶牛X精子冷冻精液生产体内性控胚胎试验

采用常规精液和分离的X精子冷冻精液对115头超数排卵的青年和经产荷斯坦母牛人工输精生产体内性控胚胎。结果表明,利用2支和3支性控精液给超排青年母牛输精,头均分别获得6.8枚±4.8枚和6.3枚±3.2枚可用胚胎,与常规精液的超排效果(7.2枚±5.2枚)无明显差异;利用2支和3支性控精液给超排经产母牛输精,头均可用胚胎分别为7.5枚±4.5枚和8.6枚±5.6枚,与常规精液的超排效果(6.1枚±3.2枚)相比,分别增加23%(P>0.05)和41%(P>0.05),无显著差异,但解冻后性控精子会明显影响经产母牛的受精率;对用性控精液输精生产的12枚抽样胚胎采用LAMP法进行性别鉴定并移植,结果获得了91.7%的雌性率和36.4%的受胎率。结果提示,X精子的分离过程会在一定程度上影响受精率,用分离的X精子冷冻精液对超排母牛进行人工授精生产体内性控胚胎是可行的。     

性控胚胎生产对育成牛繁殖机能影响的研究

选择良种育成牛作供体,超排处理后用X精子冷冻精液人工授精生产性控胚胎,累计处理38头供体,冲胚35头,获可用胚胎96枚,平均2.74枚;冲胚后的育成牛用常规冷冻精液配种的情期受胎率和总受孕率分别为76.32%和94.74%,与该场同时期未作供体的育成牛的73.81%和94.44%相比差异不显著(P0.05);同时在夏、秋、冬三季对育成牛进行超排,胚胎可用率分别为18.95%、40.18%和57.89%(P0.05)。结果表明:利用育成牛作供体生产性控胚胎,对其繁殖机能无明显的影响;在秋、冬两季生产胚胎的可用率显著高于在夏季生产,而且在冬季供体冲胚后繁殖机能恢复的时间最短。     

利用荷斯坦奶牛性控冻精生产性控胚胎试验报告

利用荷斯坦奶牛性控冻精生产性控胚胎的试验。选用澳大利亚进口荷斯坦奶牛为供体,按常规方法进行超数排卵,以国产荷斯坦奶牛性控冻精进行人工授精生产性控胚胎。试验共超排供体牛7头,获胚胎6枚及未受精卵33枚,胚胎中可用的B级和C级胚各1枚,退化胚4枚;移植受体牛2头均未受孕,试验表明性控冻精的质量尤其是有效精子可能是生产性控胚胎的决定因素。     

奶牛胚胎性别控制技术的试验研究进展

应用LAMP法进行了613枚胚胎的性别鉴定结果，雌性胚胎302枚(49．3％)，雄性胚胎311枚(50．7％)，移植成功率平均为40．9％(122／298)，出生后代中与性别鉴定结果一致的121头，性别鉴定准确率为96．0％(121／126)。应用奶牛性腔胶囊后输精的14头供体母牛，共采集69枚可用胚胎，对其中64枚胚胎进行性别鉴定，确定雌性胚胎的比例为71．9％(46／64)，头均获4．9枚可用胚胎。应用奶牛性控液对3头供体母牛宫注后输精，共采集26枚可用胚胎，经性别鉴定后确定雌性胚胎比例为73．1％(19／26)，头均获可用胚胎8．7枚。应用分离X精子冷冻精液对12头供体母牛进行输精，对采集到的61枚胚胎进行性别鉴定后，确定雌性胚胎比例为100％(61／61)，头均获得可用胚胎5．5枚。11枚性控冷冻胚胎移植后，40d以上未返情率为63．6％(7／11)。用分离的X精子冷冻精液对供体母牛输精后，可获得与未分离冷冻精液输精后相接近的超排供体母牛采集胚胎的数量和质量。     

应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎的试验研究进展

应用X精子冷冻精液对75头超排供体母牛进行2～3次（3～4支细管）输精，共采集胚胎633枚，其中可用胚339枚，退化胚135枚，未受精卵159枚。胚胎的受精率为74.9％（474/633），可用率为53.6％（339/633），发育率为71.5％（339/474），头均获得可用胚胎4.5枚。输2次精3支细管，与输3次精4支细管，均可获得同样的胚胎采集效果。应用LAMP法对61枚胚胎进行性别鉴定后，确定雌性胚胎比例为100％（61/61）。11枚X精子冷冻精液生产的体内性控冷冻胚胎移植后，怀孕率为63.6％（7/11）。因此，应用X精子冷冻精液对供体母牛进行输精，不仅可获得与未分离冷冻精液输精后相接近的胚胎的数量和质量，而且移植后可得到较高的怀孕率。应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎，可在我国胚胎移植技术中大量推广应用。     

重复应用CIDR进行超排的效果分析

2002年11月至2003年1月，在新疆金牛生物股份有限公司牛场开展了澳大利亚进口荷斯坦牛超数排卵工作。供体牛埋植CIDR进行超排。CIDR用过一次超排后，经过处理供第二次使用(第二次为旧CIDR)。经过对184头澳大利亚供体牛进行超数排卵，其中：14月龄供体牛埋植新CIDR平均每头获可用胚7．6枚，埋植旧CIDR平均每头获可用胚6．1枚；15月龄供体牛埋植新CIDR平均每头获可用胚胎6．9枚，埋植旧CIDR平均每头获可用胚胎6.6枚。对同一批次不同月龄供体牛平均每头获可用胚胎数进行对比分析，结果差异不显著。     

娟姗牛与荷斯坦牛X-性控冷冻精液试验研究效果分析

采用娟姗牛与荷斯坦牛X-性控冷冻精液,给娟姗母牛、荷斯坦母牛及胚胎移植供体进行人工授精,以探索两种冷冻精液人工授精受胎效果及供体牛生产胚胎效果。研究结果表明,人工输精试验牛情期受胎率及供体母牛的平均可用胚胎数和可用胚胎率受公牛X-性控冷冻精液的影响;人工输精试验牛的受胎率青年牛优于经产牛,而荷斯坦牛的优于娟珊牛;生产胚胎的供体牛,综合可用胚胎数和可用胚胎率,在同一品种上青年牛的效果优于经产牛,在不同品种而同一年龄上的荷斯坦牛优于娟珊牛。     

CIDR的两次应用对超排效果的分析

2002年11月至2003年1月,在新疆乌鲁木齐金牛股份有限公司牛场展开了进口澳大利亚供体牛超数排卵工作.供体牛埋植CIDR进行超排.CIDR用过一次后第2次继续埋植使用(第2次称为旧CIDR).共对184头牛进行超数排卵,其中14月龄供体牛埋植新CIDR,平均每头获可用胚7.6枚,埋植旧CIDR超排后平均每头获可用胚6.1枚;而15月龄供体牛埋植新CIDR超排后平均每头获得可用胚胎6.9枚,埋植旧CIDR超排后平均每头获得可用胚胎6.6枚.对同一批次不同月龄供体牛每头胚胎可用数结果进行对比分析,结果显示14、15月龄平均每头胚胎可用数差异不显著.     

常规冻精与性控冻精的授精效果分析

试验对常规冻精和性控冻精在荷斯坦牛超排后的授精效果作了分析.对29头做性控(X-精子)冻精的授精,获得111枚可用胚胎,头均可用胚为3.83枚;受精率:青年牛卵子受精率为90.60%,经产牛卵子受精率为86.15%.对34头做常规冻精的授精,获得212枚可用胚胎,头均可用胚为6.24枚;受精率:青年牛卵子受精率为92.17%,经产牛卵子受精率为88.50%.     

应用奶牛性控精液生产体内性控胚胎及其移植试验初报

试验超排处理了3头供体牛,回收卵数19枚.可用胚胎11枚、退化胚6杖、未受精卵2枚.胚胎可用率为57.9%(11/19),头均可用胚3.7枚(11/3);同期发情处理了3头受体牛,妊娠率为66.6%(2/3),生下2头母犊,雌性胚胎率为100%.     

应用性控冻精和超数排卵技术生产奶牛性控胚胎的效果分析

通过在石河子地区应用荷斯坦性控冷冻精液(以下简称“性控冻精”)和超数排卵(以下简称“超排”)技术生产奶牛性控胚胎的早期试验数据分析,发现应用不同种公牛性控冻精与不同超排方法对其超排效果无显著影响(P＞0.05),随着输入精子数量的增加,超排效果逐步提高(P＜0.01或P＜0.05),不同输精时间对超排效果有显著影响(P＜0.01).     

性控精液对奶牛体内胚胎质量、发育和移植妊娠率的影响

[目的] 研究性控精液对奶牛体内胚胎质量、胚胎发育和胚胎移植妊娠率的影响。[方法] 将144头青年奶牛随机分为对照组（63头）和试验组（81头）,使用促卵泡激素（FSH,260 mg/头）进行超排处理。对照组和试验组分别使用常规精液和性控精液输精,并对获得的体内性控胚胎进行移植,对胚胎生产、胚胎质量、胚胎发育和胚胎移植妊娠情况进行统计。[结果] 试验组供体获得的平均可用胚胎数（5.67枚）显著（P<0.05）低于对照组（6.92枚）;试验组供体获得的可用胚胎中A级胚胎比例（62.53%）、B级胚胎比例（35.29%）与对照组（A级胚胎比例66.51%、B级胚胎比例30.97%）相比差异均不显著（P>0.05）;试验组供体获得的可用胚胎中桑葚胚比例（84.10%）显著（P<0.05）高于对照组（61.24%）,囊胚比例（15.90%）显著（P<0.05）低于对照组（38.76%）;试验组的鲜胚移植妊娠率（52.41%）显著（P<0.05）低于对照组（66.13%）。[结论] 与常规精液相比,使用性控精液生产奶牛体内性控胚胎并移植后,平均可用胚胎数、可用胚胎中囊胚比例和胚胎移植妊娠率降低,可用胚胎质量未明显降低;优化性控精液使用方案和胚胎移植技术能够提高体内性控胚胎生产和胚胎移植效率。     

促卵泡素超排效果比较试验

用宁波产促卵泡素(FSH)超排处理供体牛19头,共冲出156枚卵,每头平均8.21枚,其中可用胚胎为140枚,每头平均7.36枚,达到国内平均水平;用北京产FSH超排处理供体牛15头,共冲出98枚卵,每头平均6.53枚,其中可用胚胎为72枚,每头平均4.48枚.试验证明2个不同产地FSH的超排效果有显著差异.     

高产奶牛超数排卵移植黄牛技术研究

2002-2004年,从饲养的812头奶牛群中,选择69头高产奶牛作供体进行超数排卵处理,63头供体牛共获胚胎495枚,超排成功率达91．3％(63／69),平均获胚胎7．17枚／头,可用胚胎402枚,平均可用胚胎5．82枚。其中采用加拿大生产的促卵泡素超排处理奶牛供体10头,获卵106枚,可用胚胎87枚,平均获可用胚胎8．7枚/头;采用鲜胚移植奶牛受体8l头,妊娠44头,妊娠率为54．3％,产犊28头,待产16头;采用冷冻胚胎移植黄牛受体278头,妊娠114头,妊娠率为41．0％。产犊22头,待产92头。     

黑安格斯牛体内性控胚胎生产影响因素的研究

为了对黑安格斯牛体内性控胚胎生产过程中的相关影响因素,如月龄、卵泡刺激素(FSH)剂量和精液质量进行研究,试验使用性控分离精液生产黑安格斯牛体内性控胚胎,选择90头13~25月龄黑安格斯牛为供体,分别使用260 mg、340 mg FSH对供体进行超数排卵(简称超排)处理,同时选择3头公牛性控分离精液进行人工授精。结果表明:260 mg、340 mg FSH对不同月龄供体超排获得的平均胚胎数、平均可用胚胎数、平均不可用胚胎数、供体卵巢平均黄体数差异均不显著(P0.05);使用3头不同公牛性控精液进行人工授精后获得的平均胚胎数分别为10.44枚、10.89枚、9.30枚,且差异不显著(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均可用胚胎数分别为2.78枚、4.11枚,显著高于♂3性控分离精液获得的平均可用胚胎数(0枚)(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均不可用胚胎数分别为7.66枚、6.78枚,显著低于♂3性控分离精液获得的平均不可用胚胎数(9.30枚)(P0.05)。因此,使用低剂量FSH对较早月龄黑安格斯牛进行超排,同时选择受精力高的性控分离精液能够进行体内性控胚胎生产。     

肉羊X、Y精子分离及其对超排羊腹腔镜输精卵子受精率的研究

采用电刺激采精方法收集1.5～3周岁的10只陶赛特种公羊精液,19℃水浴保存,经过1h运输后,利用流式细胞仪进行X、Y精子分离.共生产性控冷冻精液182支(X型98支,Y型84支).分离前精液活率为76％,分离后X、Y型冻精活率分别为39％和2％,有效精子数约为230万和10万,4h存活指数分别为10％和1％,畸形率分别为12％和26％.另外,结合腹腔内窥镜输精技术对19只超排母羊开展了输精,在输精后第6天采用子宫角采胚法共回收卵子104枚,其中受精胚胎53枚,受精率51％.结果表明:①分离所得X精子能够满足腹腔内窥镜低剂量输精要求;②Y精子活率检验仅为2％,失去了输精价值;③性控冷冻精液结合腹腔内窥镜输精技术应用于性控胚胎生产具有可行性.     

中国荷斯坦牛重复超排试验

为探讨多次重复超排的效果,自2003年12月至2005年4月对9头供体牛进行6次重复超排,采胚47头次,累计生产可用胚胎292枚,平均每头次冲胚获可用胚6.2枚。每批获可用胚胎数依次为49、50、46、48、55、44,可用胚胎数并未随超排次数的增加而呈现逐渐下降趋势,说明中国荷斯坦牛以3个月的间隔多次重复超排是可行的。