苹果主栽品种潜隐病毒脱毒研究

近年来我们对苹果潜隐病毒研究的结果表明:在西北地区栽培的主要苹果品种中,都普遍带有潜隐病毒,有些品种带毒株率已达饱和,而且多系数种病毒复合侵染。由于苹果为多年生,以嫁接繁殖,一旦被病毒侵染则为终生带毒持久为害。尤其是潜隐病毒所造成的巨大损失,往往不易被人们觉察。 目前世界上许多国家,对苹果的主要品种均采用脱毒后的母树作为繁殖材料,一些国家实现了无毒化栽培,获得了良好的经济收益。 本文是作者1985～1988年采用热处理方法,培育苹果无毒苗木的研究结果。此项研究填补了西北地区的空白。     

两种苹果潜隐病毒脱毒技术研究

该文应用热处理、热处理加茎尖组织培养以及在培养基中加入抗病毒药剂等方法，脱除了苹果优系短枝富士的苹果褪绿叶斑病毒（ＣＬＳＶ）和苹果茎沟病毒（ＳＧＶ），从而获得无潜隐病毒苗木。     

苹果潜隐病毒(Latent Virus)研究——苹果主栽品种潜隐病毒毒原鉴定

1984—1985年对陕西、甘肃的红星、黄元帅、秦冠、国光和红富士五个苹果主要栽培品种,进行潜隐病毒毒源种类鉴定,其结果是:这些主要栽培品种都普遍带有苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟槽病毒。其潜带率是:褪绿叶斑病毒为70—100%;茎痘病毒为80～100%;茎沟槽病毒为20—40%。     

苹果无毒苗嫁接繁育技术

<正>近年来,苹果病毒病害日趋严重。国内外研究证明,有些病毒导致苹果树大量衰退枯死,甚至全园毁灭,有些病毒呈潜隐状态,终生带毒,持久为害,病树生长量减少,产量降低,果实品质变劣,不耐贮藏。目前,对苹果病毒病尚无有效药剂防治,繁育无病毒苗木,发展无病毒栽培,是当前防治苹果病毒病的根本措施。1988年以来,临沂市植保站从中国农业科学院果树研究所国家苹果无病毒种质资源圃陆续引进     

苹果褪绿叶斑病毒的抗血清制备及其检测应用研究

用昆诺藜(Chenopodium quinoa)为诊断和分离寄主,从混合感染潜隐病毒的苹果花瓣中分离纯化出苹果褪绿叶斑病毒。经纯化的病毒,在繁殖寄主—昆诺藜上增殖扩大。采用聚乙二醇沉淀和差速离心技术,从感染病毒的昆诺藜中提纯出褪绿叶斑病毒作为抗原,免疫家兔,经心脏采血,制备出了该病毒的抗血清。用制备的抗血清进行了检测褪绿叶斑病毒的方法和对脱毒苗以及生产苹果树的带毒情况作了初步研究。A蛋白酶联免疫法适于检测苹果褪绿叶斑病毒。     

中国主要大蒜品种和品系的病毒检测

对 96份大蒜品种和品系进行了病毒病症状及有关农艺学性状观察记载 ,其中 6 6份用 5种病毒抗血清作Dot-ELISA和免疫电镜检测及观察 ,发现大蒜不同品种 (系 )对不同种类病毒侵染存在明显差异 ,84.8%的大蒜品种 (系 )受 2种以上病毒侵染。韭葱黄条斑病毒 (LYSV) ,洋葱螨传潜隐病毒 (OMbFV)和洋葱黄矮病毒 (OYDV)是侵染中国大蒜的主要病毒种类 ,大蒜普通潜隐病毒 (GCLV)和青葱潜隐病毒 (SLV)也有检出     

进境菠菜种子携带菠菜潜隐病毒的检测与鉴定

以进境的菠菜种子为试验材料,采用特异性引物逆转录PCR(RT-PCR)检测鉴定菠菜潜隐病毒(SpLV),并对扩增得到的特异性片段进行进一步测序验证。结果表明,采用的3对引物分别扩增得到了3种不同大小的特异性片段,其中引物对SpLV-RNA2-F/R扩增的RNA2组分产物量最大,条带清晰,最适合日常SpLV的检测鉴定,目的条带测序结果与GenBank发布的菠菜潜隐病毒分离物的同源性为97.87%～100.00%,进一步说明进境菠菜种子感染了菠菜潜隐病毒。这是我国首次从进境菠菜种子上截获菠菜潜隐病毒。     

苹果潜隐病毒的快速鉴定试验

在前人温室鉴定基础上，利用国外引进的人工气候室对国内已知的３种主要苹果潜隐病毒在几种恒温条件下进行鉴定。结果表明，用木本指示植物鉴定法，褪绿叶斑病毒在１８℃、茎痘病毒和茎沟槽病毒在２６℃条件下症状出现早、强度大，易于观察识别，仅需１０～２０ｄ好可鉴定清楚，比现有条件下（１６～２７℃）的温室鉴定周期缩短１５ｄ左右。     

分泌抗苹果茎沟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

 用苹果茎沟病毒（ASGV）免疫的BALB/c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（Sp2/0-Ag14）融合，经3次克隆化培养和ELISA筛选，建立了7株分泌抗ASGV的单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞株。上述细胞株的腹水McAb滴度在1:256000 ～ 1:4096000之间，而且均不与另一种常见的潜隐病毒苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）起交叉反应。腹水McAb经纯化和辣根过氧化物酶（HRP）标记后，用间接ELISA方法检测感染ASGV的昆诺藜汁液，具有特异性强、灵敏度高等特点。     

桃病毒病调查与检测研究

对陕西省桃主产区的病毒病发生情况进行了调查和ELISA检测.查明了李属坏死环斑病毒(PNRSV)、李矮缩病毒(PDV)、苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)、桃潜隐花叶类病毒(PLMVd)和桃耳突病毒(PEV)等5种病毒和类病毒在桃上的存在及感染情况.ELISA检测结果表明,PNRSV的感染率最高,CLSV发生也较普遍,PDV感染率较少,各种病毒的混合感染都有出现,PNRSV、PDV和CLSV的总感染率达65.8%.PLMVd和PEV的田间发病率约为1.0%和0.2%.     

应用分析双链RNA技术诊断苹果潜隐性病毒病

本文报导一种以分析病毒双链RNA为依据,检测苹果潜隐性病毒的新方法。这种方法能快速、准确地从苹果组织中分离和分析病毒的双链RNA(ds RNA),因此能直接、有效地从病毒侵染的组织诊断苹果潜隐性病毒。双链RNA是从自然侵染的苹果叶片或花瓣用酚萃取,经CF-11纤维素层析纯化,再用6％聚丙烯酰胺凝胶电泳和溴乙锭或银盐染色分析ds RNA电泳图谱。经脱毒的苹果树叶片,未发现有病毒的ds RNA存在。文中还报导了使用这一技术诊断苹果潜隐性病毒的有关技术条件。     

3种苹果潜隐性病毒一步多重RT-PCR检测体系的优化

为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法,以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的田间苹果成龄树为试材,设计合成了扩增目的片段为273 bp(ASGV)、358bp(ACLSV)和432 bp(ASPV)的3对特异性引物,并对影响RT-PCR体系的主要参数进行试验优化.结果表明:建立的一步多重RT-PCR体系可以实现对3种主要潜隐性病毒的特异性检测;通过对田间多个样品的检测验证,表明该方法的准确性和灵敏度都很高,并缩短了单个样品的检测时间,极大地提高了工作效率.     

22个苹果品种和砧木试管苗对热处理脱毒效应的研究

用RT-PCR对22个苹果品种和砧木携带3种潜隐性病毒的情况进行了检测,并用变温热处理结合茎尖培养对22个苹果品种和砧木组培苗脱除潜隐性病毒的效应进行了研究。结果表明:不同的苹果品种和砧木耐热性不同。其中‘王林’、‘乔纳金’、‘嘎啦’、‘金冠’、‘珠美海棠’、‘P22’的耐热性最强;‘GM256’、‘弘前’、‘SH’系耐热性最差;‘惠民短枝富士’、‘浓红富士’、‘天红1号’、‘B9’、‘M9’、‘P59’、‘77-34’、‘天红2号’、‘Jazz’的耐热性居中。在相同处理条件下,不同的苹果基因型脱毒率存在差异。‘惠民短枝富士’、‘SH17’、‘M9’、‘GM256’、‘弘前’脱毒率最高,‘77-34’、‘P59’、‘P22’、‘天红1号’次之,‘乔纳金’、‘SH40’、‘SH38’、‘浓红富士’的脱毒率最低。另外,不同病毒种类脱除的难易程度也存有差异,ACLSV最容易脱除,ASGV最难脱除,ASPV居中。     

苹果炭疽病发生规律及防治新途径研究

1979—1983年对苹果炭疽病侵染规律、发病规律进行了系统调查研究,在此基础上探索了新的防治途径。利用常规化学保护性杀菌剂(波尔多液、退菌特等)提前在果实生长前期施用,获得大面积良好防效。利用苹果炭疽病菌潜伏侵染特点,在侵染盛期或盛期过后,施用化学治疗剂(仲丁胺、乙磷铝等),北部苹果区喷1—2次药,南部苹果区喷2—3次药,初步试验可获得较好防效。每一万亩苹果树,减少一次打药可节约投资二万元左右。在黄河故道地区每年可减少4—5次药,将会大幅度提高经济和社会效益。在国内外,首次(1980年)利用无毒高脂膜防治苹果炭疽病成功,为植物病害防治开拓了新途径。     

苹果贮藏期间炭疽病菌侵染过程的初步研究

将苹果炭疽病菌配成不同浓度孢子悬浮液接种至处于贮藏期的苹果上 ,在 2 0℃恒温下暗光培养 ,对病菌侵染过程进行研究。结果表明 :对于针刺接种秦冠苹果 ,病斑接种成功率随接种孢子浓度增大而增大 ,当接种浓度在 1× 10 5个孢子 /ml以上时 ,接种成功率为 10 0 % ;病菌潜伏期和潜育期与接种浓度呈显著负相关 ;潜育期至潜伏期所需的有效积温和产孢时病斑直径在不同浓度接种间差异不显著 ,其值分别为 99.2℃和 19.6mm ;病斑扩展速率在接种浓度 1× 10 4 ～ 1× 10 5个孢子 /ml范围内最大。     

苹果潜隐病毒的研究——Ⅰ 苹果感染茎沟槽病毒后过氧化物酶的活性及其同工酶的变化

对金冠、富士幼树接种茎沟槽病毒(SGV),分期测定其叶片的过氧化物酶活性及过氧化物酶同工酶,结果表明:苹果植物接种SGV后过氧化物酶活性增高,增酶高峰出现于接种后20—35天;过氧化物酶同工酶也发生变化,在接种后20—30天,富士、金冠两个品种先后各出现了两条健株所没有的G、I带和I、K带。     

苹果园投入与产出关系初探

本文从线性关系上研究了苹果园,果品产率、产值、纯收入与投入量的关系,并且对栽培条件相似且和相差悬殊区的投产模式进行了比较研究,并对结果进行分析和讨论。     

山西芮城苹果烂根病的调查研究

通过对芮城县苹果烂根病的调查研究,初步明确了该地区苹果烂根的原因是由尖孢镰刀菌引起的圆斑根腐病所致。同时还明确了该地区发病果园出现的缺素现象是由于果树感病后,影响了根系对土壤营养元素的吸收而产生的次生缺素症状。在此基础上提出了苹果根腐病的防治措施及其防治这一病害的新思路。