集约化猪场PWD病原性大肠杆菌毒力因子分析

探索浙江省集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)病原性大肠杆菌血清型和毒力因子特征,为PWD防治及耐药性研究提供资料.从10个规模化猪场以直肠棉拭子采集PWD病料,经细菌分离纯化、革兰氏染色、生化试验和小鼠致病性试验等,对病原进行鉴定.采用11种猪源大肠埃希氏茵常见O型抗原血清、应用K88及F18菌毛单因子血清对分离茵进行玻板凝集试验和PCR方法分析黏附素及肠毒素类型.分离鉴定的56株病原性大肠杆菌O抗原定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.5%;茵毛单因子血清玻板凝集试验和PCR测得病原性大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)比例较高,占病原性大肠杆菌分离总数的67.92%(36/53),肠毒素中含STa、STb、STa+STb、LT和SL-2e分别占总检测菌株数的30.19%(16/53)、35.85%(19/53)、18.9%(10/53)、1.89%(1/53)和9.43%(5/53).黏附素类型主要有K88和F18两种,分别占总检测菌株数的24.53%(13/53)和28.30%(15/53).结果表明,浙江省PWD病原性大肠杆菌至少覆盖了包括优势血清型O149、O139、O8在内的11种血清型;大肠杆菌中以产肠毒素型为主,主要毒力因子包括黏附素F18及K88和肠毒素STa、STb、SLT-2e等.     

一株不表达K88、K99、987P粘附因子牦牛肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定

从西藏地区腹泻死亡牦牛中分离出一株肠毒素型大肠杆菌，该菌在形态特征，培养特笥和生化特性方面与大肠杆菌基本一致，血清学试验表明，该菌原O抗原属O148，K88，K99，987P单因子血清均不能凝集本菌，在MSHA反应中，木菌能凝集绵羊、豚鼠、马、鸡的红细胞，而K88、K99、987P抗血清均不能抑制其对绵羊、豚鼠、马、鸡红细胞的凝集，用腔接种对小白鼠具有太原市 致病性，乳鼠胃内投服试验和兔回肠结所试验证明，该菌能产生热稳定肠毒素和热敏性肠毒素，总之，该功得一株不表达K88、K99、987P的、能产生ST和LT的肠毒素型大肠杆菌，     

育成牛K99 F41兼型大肠杆菌的分离鉴定

从肠毒血症病死的4头育成牛空肠内分离到4株革兰氏阴性细菌,经生化试验、O抗原鉴定、纤毛抗原检查、ST肠毒素测定及动物感染试验证明,分离的4株细菌均为兼有K99和F41两种纤毛抗原的产ST肠毒素的O_(142)血清型致病性大肠埃希氏菌。     

鸡源致病性大肠埃希氏菌产肠毒素能力的检测

用家兔肠袢试验和乳鼠灌胃试验检测了６株鸡源致病性大肠杆菌的产肠毒素能力，结果表明：检测的６株鸡源大肠杆菌均不产生耐热肠毒素，另检测３株鸡源大杆菌亦不产生不耐热肠毒素因而认为鸡源大肠杆菌的现性与肠毒素无关。     

鸡源致病性大肠埃希氏菌产肠毒素能力的检测

用家兔肠袢试验和乳鼠灌胃试验检测了６株鸡源致病性大肠杆菌的产肠毒素能力．结果表明：检测的６株鸡源大肠杆菌均不产生耐热肠毒素（ＳＴ），另检测３株鸡源大肠杆菌亦不产生不耐热肠毒素（ＬＴ），因而认为鸡源大肠杆菌的致病性与肠毒素无关．     

鹌鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定

通过对病鹌鹑的肝脏和脾脏中分离到的细菌，进行培养、生化鉴定及动物接种试验，确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染，在不同禽舍中采取的三处水样中，同样分离出了上述两种细菌，分离的6株大杆菌血清型鉴定结果Y2，Y6，Y8为O1；Y3，Y7，Y9为O22，并且均产生肠毒素，药敏试验结果从脏器中分离细菌对庆大霉素、卡那霉素、新霉素高度敏感；水样中分离的细菌对氯霉素高度敏感。     

猪肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

从2006-2009年河南省发生猪高热综合征的168家规模化猪场456份病料中,分离出粗大的革兰氏阴性杆茵,通过培养特性试验、生化试验和PCR试验,鉴定出了149株猪肠外致病性大肠杆菌.对分离茵进行小鼠毒力试验、血清分型及药敏试验,结果显示,所分离肠外致病性大肠杆菌对小鼠均有毒力,以O11、O161、O8、O138、O...     

大肠杆菌热敏感肠毒素的检测与制备

为探索猪源大肠杆菌热敏感肠毒素的简易检测方法和纯化方法,拟采用兔回肠结扎试验、兔皮肤蓝斑试验和平板免疫溶血试验比较检测热敏感肠毒素的方法。初步试验表明:平板免疫溶血试验能够快速灵敏地检测出热敏感肠毒素,并具有很强的特异性,比肠结扎试验灵敏度高,而且简便易行;采用SephadexG 100纯化热敏感肠毒素LT并采用SDS PAGE电泳检测蛋白纯度,表明该方法可以除去杂蛋白,肠毒素蛋白分子量为12 5KD和25KD     

国际学术活动报导

国际标准化协会(I.S.O)所属砖砌体结构技术委员会(I.S.O/TC149)已于十月上旬在西柏林开完成立大会,我国为该会"P"成员.大会决定在TC149下设立三个学科,SCI为无筋砌体,SCⅡ为配筋砌体,SCⅢ为试验方法.SC I、SCⅢ的秘书国为英国,我国当选为SCⅡ(配筋砌体)的秘书国.     

天津地区仔猪水肿病病原分离鉴定

从天津地区分离鉴定猪水肿病大肠杆菌27株,并测定了分离株的部分生物学特性。鉴定结果表明,定型的23个分离株分属O139,O101,O138,O 108,O141,O147,O149,O 21,O8等9个血清型(4株未定型),其中O 139,O138,O101为优势血清型;10个试验菌株可以产生水肿毒素;11个强致病性菌株中,5株可产生明显溶血环,而16个弱致病性菌株均无溶血性。药敏试验结果表明,头孢氨苄的抑菌作用最强,但所有分离株均有不同程度的耐药性。     

张家口地区仔猪白痢病原菌血清型检测及药敏试验

[目的]为临床上选用仔猪白痢疫苗与防治用药提供参考。[方法]从20个规模化猪场采集40份仔猪白痢病料,对致病性大肠杆菌进行分离和生化鉴定,分析其血清型并检测其耐药性。[结果]从40份病料中分离出36株大肠杆菌,其中32株为致病性大肠杆菌。分离菌对16种药物均有不同程度的耐药性,最高为100%,最低为6%。所有分离菌均表现出不同程度的多重耐药性,其中22株分离菌为4耐以上的菌株。32株致病菌分布在9个血清型中。[结论]张家口地区规模化猪场仔猪白痢病原菌的优势血清型为O8、O149、O141和O54,占已定型菌株的59.3%。对仔猪白痢病原菌敏感率较高的药物为头孢噻肟钠、诺氟沙星、丁胺卡那和新霉素。     

河南省鸡大肠杆菌的致病特点及血清型研究

通过门诊送检病例 ,对河南省鸡大肠杆菌病的流行情况进行了调查研究 ,并进行了病原体的分离鉴定、血清型及耐药性检测。结果表明 ,在收治的 80例病例中 ,卵黄性腹膜炎占5 0 % ,败血症占 2 5 % ,幼雏脐炎占 1 0 % ,肉芽肿占 6.2 5 % ,气囊炎占 5 % ,肠炎占 3.75 % ;共分离到 72株大肠杆菌 ,分离率 90 %。通过血清型鉴定 ,共有 9个血清型 ,即O5( 2 0 .8% )、O8( 1 6.7% )、O78( 1 2 .7% )、O1 4 1 ( 1 2 .5 % )、O1 4 7( 1 2 .5 % )、O1 8( 1 2 .3% )、O1 9( 5 .6% )、O1 4 ( 4 .9% )和O1 5( 2 .0 % )。河南省鸡群中致病性大肠杆菌的优势菌株依次为O5,O8,O78,O1 4 1 ,O1 4 7,O1 8,说明河南省鸡大肠杆菌病的不同性和复杂性。并且所分离的大肠杆菌菌株对链霉素、烟酸氟哌酸高度敏感 ,高敏菌株达 61 .1 % ,而对痢特灵、土霉素和磺胺嘧啶则产生了明显的抗药性     

3个血清型鸡源大肠杆菌1型菌毛蛋白抗原位点变异分析

采用Goldkey及DNA Star分析软件对发表的3个不同血清型的鸡大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)进行同源性及抗原位点分析。结果显示,3种鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))l型菌毛pilA基因相似性为91.36％～98.38％,所编码的氨基酸同源性为93.50％～97.84％;3种血清型鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))1型菌毛蛋白二级结构在1～73位及150～185位氨基酸的二级结构基本相似,而111～150位氨基酸的α螺旋与β折叠的数量有所不同。菌毛蛋白亲水性、抗原性及抗原决定簇预测表明,来源于3种血清型大肠杆菌的1型菌毛蛋白在l～110位及150～184位氨基酸存在相似的二级结构及抗原位点,且不同血清型之间存在一定的共同抗原。     

大肠杆菌O157 Stx噬菌体裂解酶的克隆表达及活性分析

为研究大肠杆菌O157Stx噬菌体编码的裂解酶(内溶素)对肠出血性大肠杆菌的抗菌作用,克隆表达了大肠杆菌O157Stx噬菌体裂解酶,并检测其裂解作用和裂菌谱。利用PCR方法扩增大肠杆菌O157Min27株中Stx2噬菌体裂解酶基因(R基因),构建表达质粒pET28a(+)-lysEC1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)。重组质粒在BL21中获得了高表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的34%,经His-trapTM亲和层析柱纯化后,获得的重组LysEC1的纯度大于97%。体外裂解活性试验证实纯化的噬菌体裂解酶LysEC1对肠出血性大肠杆菌菌株具有很好的裂解作用,这为新型噬菌体抗菌生物制剂的研发提供了新的研发方向。     

陕西省犊牛细菌性腹泻病原分离鉴定及敏感中药的筛选和初步应用

采取陕西省部分地区细菌性犊牛腹泻病料104份，进行病原细菌的分离鉴定，结果表明，引起该地区犊牛腹泻的细菌性病原主要是致病性大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、多杀性巴氏杆菌等；大肠杆菌主要以02、086、0138为优势血清型。根据抗生素及中药对分离菌的药敏试验结果，筛选出敏感中药并组方研制出”肠菌清散剂”进行临床防治试验，总有效率为88．9％。     

鸡卵黄性腹膜炎病例大肠杆菌的分离及药敏试验

从 40例卵黄性腹膜炎病例分离到 36株大肠杆菌 ,分离率为 90 %。通过血清型鉴定 ,共有 9个血清型 ,即O5(2 0 8%) ,O8(16 7%) ,O78(12 7%) ,O14 1(12 5 %) ,O14 7(12 5 %) ,O18(12 3%) ,O19(5 6 %) ,O14 (4 9%)和O15(2 0 %)。在豫西地区蛋鸡群中 ,致病性大肠杆菌的优势菌株应依次为O5,O8,O78,O14 1,O14 7,O18,其中O5,O8,O14 1,O14 7优势菌株的存在 ,足以说明豫西地区鸡大肠杆菌病的不同性和复杂性。药敏试验结果表明 ,所分离的大肠杆菌菌株对链霉素、烟酸氟哌酸抑菌作用最强 ,高敏菌株达 6 1 1%;次敏药物为蒽诺沙星、氯霉素、卡那霉素、畅乐、杆净 ;低敏和无抑菌作用的药物有痢特灵、土霉素和磺胺嘧啶。     

中草药抗仔猪黄痢作用机理的探索

从中草药对大肠杆菌的体外抑菌活性及对热敏肠毒素 L T所致结扎肠袢液体蓄积的拮抗作用两个方面 ,初步探讨了大青叶、板蓝根、连翘、败酱草、盐酸黄连素 5味中草药及其复方配伍抗仔猪黄痢的作用机理。试验结果表明 ,板蓝根、连翘、败酱草等及其复方制剂对大肠杆菌 O1 49K88均显示出不同程度的体外抗菌活性 ;将上述中药提取液加入到细菌培养液中与大肠杆菌一起培养 ,用所得培养物 L T进行兔回肠结扎试验 ,均可显著或极显著地减少培养物上清液所致肠袢液体蓄积量 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;将败酱草提取液同 L T一起注入结扎肠袢 ,可显著地减少肠袢液体蓄积量 (P <0 .0 5 )。由此可说明 ,抑制病原菌的繁殖、拮抗热敏肠毒素的致泻作用是中草药治疗仔猪黄痢的重要机理 ,该结果为临床应用中草药治疗仔猪黄痢病提供了重要理论依据。     

山西省雏鸡致病性大肠杆菌病原学研究

针对雏鸡大肠杆菌病病原的复杂特性,从山西省部分地区采集疑似大肠杆菌病死亡的雏鸡病料,并进行细菌分离、生化试验、血清学鉴定和致病性试验。结果分离出37株大肠杆菌。通过血清型鉴定,有15株大肠杆菌鉴定为:O119、O60、O7、O88、O45、O10、O11、O2、O103、O81等10个血清型,其中O119和O88为优势血清型;其余菌株未鉴定出血清型。37株分离菌株的致病性试验表明:有35株为雏鸡致病性大肠杆菌;2株为非致病性大肠杆菌,其血清型均为O10。研究结果为雏鸡大肠杆菌病的防制提供了可靠的理论依据。     

合肥市鲜猪肉致病性大肠杆菌的分离与鉴定

对合肥市部分菜市场的鲜猪肉被污染致病性大肠杆菌的情况进行了调查 ,经分离得到 12株E .coli,分离率达 60 %,对 11株E .coliO抗原血清型鉴定 ,共有 7种血清型 ,有 4株未定型