猪瘟、O型口蹄疫及高致病性猪繁殖与呼吸综合征免疫程序试验

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、口蹄疫病毒感染抗体阴性、猪瘟抗原阴性的30头仔猪(35日龄阉割),随机分成6组(其中1组为空白对照组),分别设计5个免疫程序进行猪瘟、O型口蹄疫和高致病性猪繁殖与呼吸综合征免疫,首免后第2周开始每周分别采血检测抗体,至112 d。试验结果表明有2个免疫程序可行,即:28日龄左右用猪瘟、口蹄疫、高致病性猪繁殖与呼吸综合征3种疫苗同时分点注射,间隔28~35 d再加强免疫1次;或28日龄左右用猪瘟、口蹄疫疫苗同时分点注射,间隔28~35 d再加强免疫1次,高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗在35日龄首免,间隔14~28 d加强免疫1次。     

不同疫苗对猪瘟及猪口蹄疫抗体效价的影响

采用三种不同猪瘟疫苗分别对A、B、C三组猪群在30日龄进行首次免疫,65日龄加强免疫,采用两种不同口蹄疫疫苗分别对A、C组猪在40日龄首次免疫,75日龄加强免疫,与C组相同疫苗对B组40日龄只一次免疫,应用ELISA检测免疫后不同日龄猪瘟、口蹄疫抗体。猪瘟脾淋苗和猪瘟活疫苗（Ⅱ）相对猪瘟细胞苗首免效果好,口蹄疫多肽苗比浓缩苗抗体水平高,且一次免疫能达到较好免疫效果。     

长沙市猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫生猪后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨猪口蹄疫O型灭活疫苗对生猪的免疫效果,做好生猪口蹄疫的防控工作,本试验采用中国农业科学院兰州兽医研究所研制的猪口蹄疫O型灭活疫苗,免疫不同日龄生猪,用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免日龄、加强免疫日龄和疫苗保护期。结果表明,高抗体水平母猪生产的仔猪母源抗体能维持约45d～50d;50d首免后21d群体产生免疫能力,免疫后30d仔猪平均抗体水平最高,免疫后40d达不到免疫保护力水平,需加强免疫;加强免疫后30d生猪平均抗体水平达到最高,60d、90d、120d、150d逐渐递减,120d后生猪平均抗体水平快速下降,需再次免疫。根据抗体消长规律,初步确定了生猪的免疫程序。     

奶牛口蹄疫母源抗体测定及三价灭活疫苗免疫效果评价

为科学评价口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型三价灭活疫苗的免疫效果,并合理制定奶牛口蹄疫免疫程序,采用液相阻断ELISA方法对犊牛母源抗体及成年母牛口蹄疫免疫抗体进行了检测。结果:犊牛母源抗体90日龄时回落近临界值,成年母牛免疫后6个月抗体水平下降至临界值。根据试验结果,建议免疫程序如下:犊牛90日龄首免口蹄疫三价灭活疫苗,首免后1个月进行二免,以后每6个月加强免疫1次;成年母牛首免后每6个月加强免疫1次。     

不同抗原含量的口蹄疫三价灭活疫苗对犊牛机体抗体产生的影响

为了探究犊牛免疫口蹄疫三价灭活疫苗后抗体效价的变化规律,以及免疫不同抗原含量的口蹄疫三价灭活疫苗与犊牛机体产生的抗体效价水平的关系,试验选择30头新生犊牛连续检测母源抗体水平,母源抗体消失后,将30头犊牛分为A、B、C三组,分别使用抗原含量为4μg/mL、4μg/mL和6μg/mL的口蹄疫三价灭活疫苗各2 mL进行分组免疫;首次免疫21 d后,A、B、C三组分别使用抗原含量为4μg/mL、6μg/mL和6μg/mL的口蹄疫三价灭活疫苗各2 mL进行加强免疫。分别于首次免疫7,14,21,28,35,42,49,60,90,120天通过尾静脉采血,分离血清,采用液相阻断ELISA法对采集的犊牛血清进行口蹄疫O、A和AsiaⅠ型抗体效价检测。结果表明:3日龄犊牛母源O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值均大于1∶128,7日龄达到峰值,随着时间推移,呈现下降趋势,在90日龄降低到最低;首次免疫后第21天,A、B、C各组抗体效价平均水平相同,均为1∶128;加强免疫后7天,A组O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值均为1∶128,B、C组O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值为1∶256;A组抗体效价平均值于加强免疫后28天达到最高(O型和A型抗体为1∶512,AsiaⅠ型抗体为1∶362),而B、C两组抗体效价平均值则于加强免疫后14天达到最高(O、A和AsiaⅠ型抗体均为1∶512),抗体效价水平与青年牛相当。可见口蹄疫疫苗的首次免疫时间为90日龄时,母源抗体对疫苗免疫的影响最小;首次免疫时,疫苗中抗原含量对犊牛抗体效价的影响很小;二次免疫时增加抗原含量有助于快速提升犊牛体内的抗体效价,对抗体效价峰值的出现时间有着重要影响。     

猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序设计

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪,随机分成4组,分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,分别设计3种猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序,首免后第2周开始每隔2周分别采血检测抗体。试验结果表明只有试验Ⅰ组的免疫程序可行,即:21日龄进行猪瘟疫苗首免,60日龄加强免疫1次,母猪分娩前10日龄进行猪伪狂犬疫苗首免,35日龄加强免疫1次,35日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免,60日龄加强免疫1次。     

猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征的免疫程序设计

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪,随机分成4组,分别为试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组及对照组,分别设计3种猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序,首免后第2周开始每隔2周分别采血检测抗体.试验结果表明只有试验Ⅰ组的免疫程序可行,即：21日龄进行猪瘟疫苗首免,60日龄加强免疫1次,母猪分娩前10日龄进行猪伪狂犬疫苗首免,35日龄加强免疫1次,35日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免,60日龄加强免疫1次.     

不同免疫方法对猪口蹄疫O型抗体的影响

为了解不同免疫方法对相同日龄猪口蹄疫效价的影响,对相同日龄仔猪口蹄疫免疫采用不同免疫剂量和免疫次数,通过检测抗体水平进行比较和分析。结果发现,对于商品猪,可以采用1月龄仔猪一次肌肉注射2 m L口蹄疫灭活疫苗,28 d后的抗体水平与按说明书1月龄首免1 m L、15 d后加强免疫1 m L口蹄疫灭活疫苗相同。在今后的口蹄疫免疫注射中,为减少免疫工作量以及受威胁地区猪场早日获得较高免疫抗体,可以在首免时一次性双倍剂量注射疫苗,以较早达到好的免疫效果。     

规模场奶牛O-AsiaⅠ、A型口蹄疫免疫抗体消长规律观察

本试验对犊牛母源抗体及不同阶段奶牛口蹄疫免疫抗体效价变化规律进行了观察研究。结果表明,犊牛出生吃初乳7d后具有免疫意义的抗FMD母源抗体,且群体抗体保护率在一个较高的水平,随后降低,但仍在临界值以上,一直持续到60日龄回落近临界值,因此30日龄进行首次免疫,首免后1个月进行二免,以后每4个月加强免疫1次。     

O型口蹄疫灭活疫苗对生长猪的免疫效果观察

为了考察猪O型口蹄疫灭活苗的免疫效果和免疫抗体在生长猪体内的消亡规律,选择日龄相近、体重相当共120头仔猪,按农业部推荐的免疫程序免疫,分别在初免前、初免后30天、加强免疫后30天、60天、150天采血,用O型口蹄疫正向间接血凝实验进行抗体检测。结果显示,120头实验样品初免前抗体血凝价为0.1log2±0.2,初免后30天抗体效价为4.7log2±1.2,样品平均免疫抗体合格率60.0%;加强免疫后30天、60天、120天平均抗体效价分别为:7.6log2±1.6;6.3log2±2.0;4.2log2±1.8。加强免疫后30天、60天、120天样品平均免疫抗体合格率分别为91.0%、80.0%、62.5%     

规模奶牛场O型口蹄疫疫苗抗体消长规律研究

[目的]通过免疫抗体监测,掌握其在奶牛体内消长规律;建立适合本区奶牛口蹄疫疫苗常规免疫程序,提高有效免疫保护;探索延平区内两个常用口蹄疫疫苗的抗体产生时间和免疫抗体持续时间,为有效科学免疫,预防口蹄疫疫情提供科学依据。[方法]血样采集使用一次性真空采血管,抗体检测采用液相阻断ELISA检测方法,抗体效价判定依据畜牧兽医主管部门动物疫病监测方案。[试验对象]选择福建省南平市延平区两个分别常年免疫政府采购疫苗（中牧实业）、自行采购疫苗（内蒙金宇）的A、B规模化牛场,各选取一定数量的初生犊牛（犊牛20 头及对应母牛20 头）。[结果]A场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达100%,第四周达到峰值后开始下降,至12周抗体合格率降至50%,确定首免时间为犊牛出生后12 周,首免后第6周抗体合格率降至55%,确定二免时间为首免后第6周;B场母牛产后、犊牛出生当天O型抗体合格率达95%,第四周达到峰值后开始下降,至9周抗体合格率降至55%,确定首免时间为犊牛出生后9 周,首免后第3周抗体合格率降至28%,确定二免时间为首免后第3周。[结论]根据监测试验结果,A场的免疫程序设计为犊牛出生后12 周开始首免,首免后第6周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次;B场的免疫程序设计为犊牛出生后9 周开始首免,首免后第3 周开始2 免,以后每4 个月免疫1 次。     

母猪猪瘟病毒抗体与仔猪母源抗体衰减规律的研究

为了研究仔猪猪瘟病毒(CSFV)母源抗体的衰减规律,本研究随机选择36头待产母猪,产后采血,选择每头母猪对应的仔猪连续采血至8周龄,分离血清,通过ELISA方法检测CSFV抗体阻断率,所测结果利用EXCEL拟合指数曲线,计算分析母猪CSFV抗体水平与仔猪母源抗体衰减规律。结果显示,36头母猪中母猪抗体阻断率80%以上6头,母猪抗体阻断率70%~79%的11头,母猪抗体阻断率60%~69%的8头,母猪抗体阻断率50%~59%的5头,母猪抗体阻断率49%以下的6头。3周龄仔猪抗体阻断率整体与母猪抗体阻断率相近且高度相关,相关系数为99%。母猪抗体阻断率在80%以上时,母源抗体对所产仔猪8周龄时仍然具有保护力;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对所产仔猪7周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在60%~69%时,母源抗体对所产仔猪5周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在50%~59%时,母源抗体对所产仔猪4周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率49%以下时,母源抗体对所产仔猪3周龄时不再具有保护力。以上结果表明仔猪母源CSFV抗体随着仔猪周龄的增加逐渐衰减,由试验得出仔猪猪瘟疫苗首免日龄的计算公式:y=1.19x-46.55(x为母猪CSFV抗体阻断率,y为首免日龄)。因此,母猪抗体阻断率在80%以上时,仔猪母源抗体在60日龄不再具有保护力,仔猪猪瘟疫苗首免为56日龄;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对仔猪的保护持续到50日龄,仔猪猪瘟疫苗首免为42日龄;母猪抗体阻断率在60%~69%时和50%~59%时,母源抗体对仔猪的保护持续至36日龄和29日龄,仔猪猪瘟疫苗首免分别为28日龄和21日龄。本研究中所得母猪CSFV抗体水平计算母源抗体衰减变化,为选择母猪首免日龄,提高仔猪猪瘟疫苗免疫效果提供了科学依据。     

规模化猪场仔猪口蹄疫免疫程序的制定

本试验通过研究免疫状况良好的母猪群所产仔猪母源抗体的获得方式,仔猪体内母源抗体的持续时间,仔猪不同免疫程序的免疫效果,发现初生仔猪遵守被动免疫传递规律,仔猪体内的口蹄疫抗体水平也有自己的消长规律:哺乳后3～7d抗体水平达到最高,35日龄后开始下降,63日龄左右抗体保护率已经低于60%。所以,仔猪口蹄疫疫苗首次免疫的时间应定在35日龄,49日龄还需加强一次;疫苗的剂量:首免为1头份(2mL),加强时为2头份(3mL)。     

羊口蹄疫免疫程序初探

采用间接血凝试验对在不同时间、使用不同剂量疫苗加强免疫的羊进行血清抗体测定 ,以建立和探讨羊口蹄疫 (FMD)的免疫方法和程序。试验将羊随机分成A ,B ,C ,D 4组。A组在首免后第 1 5天加强免疫 ,B ,C ,D组在首免后第 2 5天加强免疫 ,4个组的免疫剂量分别为 2 0 ,1 5 ,2 0和 2 5mL/只。在首免的第 0 ,1 1 ,2 1 ,31 ,41 ,55 ,70 ,90和 1 2 0天采血 ,检测血清中的抗体水平。B ,C ,D 3组的抗体效价显著地高于A组 (P <0 0 5) ,且持续时间较长。在B ,C ,D 3组之间 ,C组抗体效价显著地高于B组和D组 (P <0 0 5)。结果表明羊口蹄疫的最佳免疫程序为 :首免后 2 5d加强免疫 ,剂量为 2 0mL/只。     

天峻县牛羊AsiaⅠ-O型口蹄疫免疫抗体检测

为了探讨口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活苗免疫接种牦牛、藏羊后产生抗体效价,项目对天峻县阳康乡的牦牛、藏羊开展AsiaⅠ-O型口蹄疫疫苗的抗体效价检测,试验结果表明,口蹄疫AsiaⅠ-O型二价灭活疫苗免疫效果依次为成年牦牛、成年藏羊、犊牛、羔羊;免疫后Ⅰ型抗体分析结果与O型免疫抗体的免疫效果一致,免疫合格率在80%以上,免疫牛羊产生的整体抗体水平能够符合国家规定的要求。     

A型口蹄疫抗体水平消长规律的研究

本研究将来自锦州地区40头黑白花奶牛,随机分为A、B、C、D四组,每组10头牛,每头奶牛在进行初免前均采集了O-P液和血清,进行病原学检测和母源抗体检测,在每次免疫21天后采血,采用液相阻断ELISA方法,进行免疫效果监测。通过研究发现A、B组免疫合格率达到70％以上,符合国家标准;C、D组免疫保护率能达到100％。本次试验为我们了解掌握A型口蹄疫免疫效果提供了可靠的科学依据,更为口蹄疫免疫程序的进一步优化提供了参考。     

羊口蹄疫免疫抗体效价高低与免疫时间的关系的试验

根据防制工作需要,在麦积区党川乡的五个羊场进行了绵羊Asia I-O型口蹄疫的区域预防免疫试验。通过监测免疫抗体水平,评价口蹄疫Asia I-O型双价灭活疫苗对绵羊的免疫效果,结果表明,新生羔羊首次免疫后要加强免疫,综合分析认为首次免疫后30d进行加强免疫是合理的。成年羊在有免疫抗体的情况下,接种Asia I-O双价疫苗后,抗体上升,有效保护期可达150d。免疫后150d（5个月）,O型免疫抗体合格率为71.54%,为消除免疫空白期,间隔135d再进行免疫是科学的,根据监测结果分析认为成年羊1年2～3次接种双价疫苗是可行的。     

牛乳铁蛋白卵黄抗体的制备及纯化方法的建立

通过自制并初步纯化牛乳铁蛋白的卵黄抗体,用肌肉和皮下注射结合的方法罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体。选用150日龄的罗曼蛋鸡4只进行不同浓度的多次皮下免疫注射,采集卵黄抗体并用硫酸铵沉淀法进行抗体的初步纯化,经四次免疫后的罗曼蛋鸡卵黄抗体的效价分别达到了1：32000和1：24000,并在较高水平的情况下维持两周以上,同时经初步纯化后抗体纯度得到了很大提高。试验结果显示肌肉和皮下注射结合的方法对罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体是可行的,同时通过硫酸铵沉淀法纯化抗体可以达到试验的需求。     

规模化种猪场猪瘟免疫情况调研

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种以高热、出血为主要特征的烈性、高度接触性传染病,至今仍在中国广泛流行。接种疫苗是防控该病发生的最根本的方法,为了查清山西省规模化种猪场猪瘟疫苗免疫情况,课题组采用ELISA试剂盒,对8个地市42个规模化种猪场465头哺乳猪、456头保育猪、436头育肥猪、419头母猪进行了猪瘟免疫抗体检测。查明了哺乳猪抗体阳性率平均为70.11%,保育猪抗体阳性率平均为40.57%,育肥猪抗体阳性率平均为50.22%,母猪抗体阳性率平均为69.69%,证明被检猪群免疫抗体不理想,尤其是保育猪抗体水平较低。同时对12个规模化种猪场,4类不同免疫方法免疫猪瘟疫苗的133头哺乳猪、110头保育猪、105头育肥猪、135头母猪进行了免疫抗体检测。结果表明:乳猪在吃奶前超免猪瘟高效细胞苗6头份,21日龄时二免猪瘟高效细胞苗4头份,60日龄三免猪瘟高效细胞苗2头份,母猪产后21 d跟胎免疫效果最好,使保育猪免疫抗体阳性率达到89.29%,有些猪场使用该方法免疫后,使保育猪的死亡率有了明显的降低,生长发育逐渐走向正常;而采用仔猪在断奶后28日龄至35日龄时首免猪瘟普通细胞苗4头份,60日龄二免猪瘟普通细胞苗2头份,母猪产后28 d跟胎免疫的方法效果最差,不宜推广应用。通过对山西一些规模化种猪场猪瘟免疫情况的调研,基本查清了规模化种猪场猪瘟免疫效果和最佳免疫方法,可为养猪场防控猪瘟提供依据。     

Antibody Response in Calves Following Administration of Attenuated Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) Vaccines

The serum antibody response of calves vaccinated against infectious bovine rhinotracheitis by the intramuscular route was compared to calves vaccinated subcutaneously. Immunological response in the calves as determined by serum neutralization tests was highly variable; however, a significantly greater percentage (87.5%) of the calves inoculated subcutaneously responded to vaccination by producing a four-week post-vaccinal serum titer of two or higher as compared to only 47.8% of the calves that were vaccinated intramuscularly. Of those calves that were vaccinated a second time, all maintained or had produced titers of two or higher within four weeks after the second immunization. However, the existing circulating serum antibody titers resulting from the first vaccination of nine of 22 calves were lowered by repeat vaccination.