应用估选法提高牛冷冻精液活率的试验研究

在一定的初冻温度范围内，用自制冷冻箱冷冻精液，经正交试验筛选出影响精液食冻后活率的最佳剂量，冷冻高度和初冻温度水平搭配为２５０支，４ｃｍ－１００℃，采用单因素对分法试验对冷冻剂量进一步筛选，取得了满意的效果，该成果经生产推广应用效果较好。     

海藻糖、二甲乙酰胺对公猪精液冷冻保存效果的研究

采用5% 二甲乙酰胺(DMA)(V/V)完全替代甘油,比较乳糖、海藻糖对精液冷冻保存效果的影响。结果表明,海藻糖显著提高了冷冻——解冻后精子成活力(49.32%±1.52%)与顶体完整性 (47.33%±1.16%)(P<0.05)。然后利用海藻糖替代乳糖,评价不同浓度的DMA对公猪精液冷冻保存的影响。结果表明,当DMA添加量为4%时,解冻后精子活率、成活力、顶体完整率分别为(45.17±0.56)%、(50.33±0.67)%、(48.30±1.44)%,均显著高于3% DMA、6% DMA添加组(P<0.05),精子活率显著高于5% DMA添加组(P<0.05),但精子成活力、顶体完整性与其差异不显著(P>0.05)。因此,当利用海藻糖作为冷冻保存基础稀释液,DMA最适添加量为4%。     

猪精液冷冻保存影响因素研究进展

由于猪冻精在经济生产中具有重要意义,其关键技术——猪精液冷冻保存技术已成为研究的热点。本文对猪精液冷冻原理及冷冻损伤进行了说明,并对精液稀释前处理、稀释液及添加剂、冷冻保护剂、冷冻程序与解冻、冷冻剂型等方面的研究进展进行了综述。     

应用优选法提高牛冷冻精液活率的试验研究

在一定的初冻温度范围内，用自制冷冻箱冷冻精液。经正交试验法筛选出影响精液食冻后活率的最桂剂量、冷冻高度和初冻温度水平搭配为250支、4cm、－100℃。采用单因素对分法试验对冷冻剂量进一步评选，取得了满意的效果．该成果经生产上推广应用效果较好。     

猪精液的冷冻保存技术

综述了国内外猪冷冻精液的发展简史及研究成果,对猪精液的冷冻保存机理进行了简要阐述,并从稀释液、冷冻保护剂及其浓度、冷冻前处理、冷冻剂型、诱发结晶、冷冻速率、解冻等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素,指出了目前在猪精液冷冻理论和实践中存在的问题,并提出了解决办法.     

鹅人工授精技术研究进展

中国养鹅业经过20世纪末约十年的高速发展后出现了增长缓慢的趋势,原因除了中国畜牧用地限制、疫病危害和人力成本上涨等因素外,缺乏技术创新和突破也是主要原因.鹅人工授精技术是一项先进的繁殖技术.鹅人工授精技术的完善和应用,不但可以提高优秀公鹅的配种效率,而且可以加快鹅育种的遗传进展.如果精液冷冻保存成功,鹅人工授精技术还可以用于保种和克服配种时间和空间的限制.鹅的育种落后和繁殖率低是制约养鹅业发展的瓶颈,鹅人工授精技术的应用将对养鹅业发展起到巨大推动作用.作者对近几年鹅精液收集、精液保存、精液品质评估和输精方法等方面的研究进展进行了综述.     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

猪精液提取蓝耳病病毒核酸的方法比较

为筛选从猪精液中提取微量蓝耳病病毒(PRRSV)核酸的有效方法,将蓝耳病(变异株)弱毒苗稀释成不同滴度(TCID₅₀/mL)的病毒液,与健康猪常温精液混合作用。分别用Trizol法、磁珠法、离心柱法提取含毒精液中的病毒RNA,用荧光RT-PCR试验检测病毒RNA,结果表明,当精液中病毒滴度高于0.1 TCID₅₀/mL时,3种病毒RNA提取方法均可检出。离心柱法对猪精液中PRRSV核酸提取灵敏度最高,可检出0.01 TCID₅₀/mL滴度的病毒,稳定性好。     

无角陶赛特羊冻精制作技术

对无角陶赛特种公羊 (n =10 )精液品质、精液保存稀释液和冷冻精液制作技术进行了研究。结果表明 :精液密度为 2 0 .0 3± 0 .2 5亿个 /ml,活率 (冻前为 0 .80± 0 .0 6 ,冻后为 0 .5 1± 0 .0 1) ,畸形率 (冻前为 10 .1± 1.0 3,冻后为 2 9.6±0 .3) ,死精子百分率为 14 .1± 7.1;冻精的平均菌落数小于 5 0 0个 /剂。从 3种精液稀释液中选出了一种最佳稀释液 (三羟基氨基甲烷 卵黄 葡萄糖 柠檬酸 ) ;从 3种冷冻保护剂中筛选出甘油为理想的抗冻保护剂 ,其最佳浓度为 4 %～ 6 %。     

维生素E对湖羊精液低温保存效果研究

为研究维生素E对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的湖羊精液稀释液中添加不同质量浓度(0.0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mg/mL)的维生素E用于湖羊精液冷藏试验,检测湖羊精子活率和顶体完整率,以及精液中总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。结果表明:维生素E的添加显著减少MDA的生成,提高了总抗氧化能力(T-AOC);但维生素E的添加对精子活率和顶体完整率无显著提高,本试验中0.6 mg/mL的添加质量浓度保存效果与对照组无显著差异,但质量浓度过高或过低保存效果欠佳。因此,在4℃保存条件下,在湖羊精液稀释液中添加维生素E不能提高精液保存质量。     

谷氨酰胺对湖羊精液4℃保存效果的影响

为研究湖羊稀释液中添加谷氨酰胺(Gln)对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的基础稀释液中添加0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mg/L的Gln, 4℃条件下保存96 h,每隔24 h检测精子活力、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量指标。结果显示:添加0.5、1.0、2.0、4.0 mg/L的Gln可以有效提高4℃保存条件下的精子活力、顶体完整率和T-AOC水平,并有效抑制MDA的生成(P<0.01),且4.0 mg/L添加浓度保存效果最好,而8.0 mg/L的添加浓度则不利于精液保存。提示:在湖羊精液稀释液中添加4.0 mg/L Gln可有效提高湖羊精液4℃保存的效果。     

各类家禽精液冷冻保存方法试验

（１）试验用二甲基乙酰胺）ｄｉｍｅｔｈｙ－ｌａｃｅｔａｍｉｄｅ）冷冻（－１９６℃）保存的鸡、火鸡、鹅、鸭精液的受精率。（２）输精试验结果，冷冻一解冻精液受精率分析为：鸭６９％－９０％，鹅８１％－９０％，火鸡８０％－９０％，鸡７５％－８５％。     

猪精液4℃低温保存技术的研究

以精子总存活时间、有效存活时间及存活指数为检测指标,用6种稀释液稀释后4℃低温保存,从中筛选效果最好的基础稀释液配方,并进一步探讨保存前不同精液处理方法在猪精液4℃低温保存的效果;最后用筛选得出的基础稀释液和精液处理方法稀释猪精液,4℃低温保存2~3 d,用于低剂量常规部位人工授精试验,通过受胎率来探讨其繁殖潜力。结果表明:6号稀释液显著优于其他5种稀释液(P0.05);精液带精浆直接稀释的效果优于精液离心处理(P0.05);精液以1:2或1:3比例稀释更利于猪精液4℃低温保存(P0.05);低温保存猪精液低剂量常规部位人工授精是可行的。总之,通过试验得到了猪精液低温保存基础稀释液配方及保存前处理方法,该方法适合于低剂量常规部位的人工授精。     

猪精液常温保存的试验

设计了4个猪精液稀释液配方,以台湾生产的猪精液常温保存稀释粉为对照,筛选出保存效果较好的配方,再进行不同因素对精液保存的影响试验。结果显示,以含有Tris和半胱胺酸的配方4,并在稀释液中添加庆大霉素(100 IU/mL)和林肯霉素(200 μg/mL)作抗生素,在24-30℃,pH为6．4,稀释倍数为1:1时保存效果最佳。     

马人工授精技术试验

为加快本地马品种改良采用马人工授精技术(AI)。结果表明,Selle Francais公马射精量为118.2±14.53ml,精子密度2.01±0.06亿/ml;常温下,精液稀释液A在1、2h内存活率分别为0.75±0.02、0.4±0.04,与进口的INRA96精液稀差异不显著(P>0.05);保鲜精液低温(0~5℃)保存48h,受精成功率为61.53%,保鲜精液48h后效果较差。鲜精、保鲜精液和冷冻精液的人工授精成功率分别为80.95%、61.5%、45.5%,差异均极显著(P<0.01)。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

维生素E在猪精液保存中的应用

试验研究维生素E对猪精液常温保存品质的影响,以寻找提高猪精液常温保存效果的方法。1材料与方法1.1药品维生素E,广州星群药业股份有限公司生产,每粒含维生素E100mg。1.2稀释液以台湾生产的猪精液常温保存稀释粉为基础液,每1000mL基础液添加0(对照组)、1.5g(试验1组)、2.5g(试验2组)、3.5g(试验3组)的维生素E。1.3精液采集南海狮山种猪场的3头种公猪精液,用手握法采精。1.4精液保存采集的精样经镜检后,同时用4种稀释液分别稀释4倍,将每种稀释精液等量分装在10个消毒的小广口瓶中,放入(17±1)℃恒温箱,每天早、晚8:00—9:00进行精子活率检…     

奶牛性控精液与常规精液抗氧化物酶活性比较分析

通过比较常规精液和性控精液在活力、顶体完整率及精浆中四种抗氧化酶类活力的差异,对性控精液的品质进行综合评定。对用流式细胞仪分离后的性控精液和常规精液细管解冻(37.5℃,30s),分别分析精子活力和精子顶体完整率,并测定精浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)的活性。结果表明性控精液精子在活力显著低于常规精液,且精浆中四种抗氧化酶类的活力也都显著低于常规精液。     

狐精液冷冻技术研究和制作方法

对狐的精液进行试验，筛选出Ⅰ号和Ⅲ号两种稀释液，冷冻精液颗粒剂量为０．１毫升，解冻温度４２－４５℃，冷冻方法采用铜纱网和氟板漂浮法均可，制作冷冻精液必须严格、认真、准确、细致地按操作规程进行，才能获得优质冻精。     

葡萄糖-柠檬酸钠精液稀释液的制作与应用效果观察

乌兰察布市四子王旗在“杜蒙”肉羊经济杂交改良配种中,采取阴道海棉栓加血促性素(PMSG)同期发情技术,对待配母羊实施人工授精配种。笔者为提高种公羊利用率和配种受胎率,在人工授精配种中的精液稀释保存环节上,经过多次筛选和应用试验,推广使用了“葡萄糖-柠檬酸钠”稀释液做为同期发情配种中种羊精液的首选稀释液,经过对稀释后精液进行常(低)温保存试验和大量生产应用效果观察显示,用“葡萄糖-柠檬酸钠液”对种公羊精液做3~6倍的稀释后,在常温环境下(20~25℃),1~3 h之内完成输精,取得了平均情期受胎率达79.2%的良好配种受胎效果。