咖啡因、双丁酰环磷腺苷调控体外猪嗜中性粒细胞对精子吞噬性的研究

实验旨在为提高家畜人工授精效率,寻找调控人工授精诱导子宫局部免疫反应的方法。通过添加不同浓度的咖啡因、双丁酰环磷腺苷(dbcAMP)检测嗜中性粒细胞(PMN)对精子或荧光beads的吞噬率。结果表明:1 mmol/L及以上浓度的咖啡因或0.1mmol/L dbcAMP明显地抑制PMNs对精子或荧光beads的吞噬性。咖啡因和dbcAMP抑制PMNs的吞噬性,可以作为降低子宫免疫反应的精液稀释液成分,提高人工授精的效率。     

miRNA调控嗜中性粒细胞和T细胞在呼吸道疾病发生中的作用

正MicroRNA(miRNA)是一类长约19~24 nt的内源性、小型非编码RNA,广泛存在于各种生物体中,miRNA可以通过与靶基因的相互作用,以序列特异性方式调控靶基因的表达,参与多种生理、生化、免疫调控和病理过程[1]。文献显示,在呼吸道疾病的发生发展过程中,miRNA能够通过对免疫系统的调节在炎症反应中扮演重要角色。1 miRNA调控嗜中性粒细胞在呼吸道疾病发生中     

猪转移因子对犬中性粒细胞数量和活性的影响

按标准方法提取制备了猪的转移因子（transfer factor, TF）,用吞噬杀伤试验MTT法检测了供试杂种牧羊犬肌肉注射猪TF后外周血中性粒细胞吞噬杀伤活性的变化。试验摸索出MTT法测定犬外周血中性粒细胞吞噬杀伤大肠杆菌的最佳条件为：中性粒细胞浓度1.3×106个/ml、大肠杆菌浓度6×105个/ml 时,大肠杆菌和中性粒细胞混合培养2 h,加入MTT后继续培养4 h。体外试验结果表明,猪TF浓度在0.052～1.56 mg/ml范围内,能够明显促进中性粒细胞吞噬杀菌作用,当猪TF浓度为1.56 mg/ml时,对中性粒细胞杀菌活性的影响最大。体内试验结果表明,注射猪TF后第2 d,外周血中性粒细胞数量最高,中性粒细胞吞噬杀菌能力最强。     

猪转移因子对犬外周血中性粒细胞数量和杀菌活性的影响

无菌采犬外周血,肝素抗凝,制备不同浓度的粒细胞悬液,分别与不同浓度的大肠杆菌悬液共同培养,采用MTT法测定粒细胞的杀菌效果,确定粒细胞体外培养时杀伤细菌的最优化条件;把不同浓度的猪转移因子(Swine transfer factor,sTF)加入注射sTF前后不同时期分离的犬外周血中粒细胞与E.coli的培养系统中,测定粒细胞的杀菌能力。结果表明,当粒细胞浓度为1.3×106个/mL,E.coli浓度为6×105个/mL时,试验最能反映粒细胞的杀菌效果。当sTF浓度为1.56mg/mL时,对PMN杀菌活性的影响最大;在犬注射sTF后的第2d,中性粒细胞单独杀菌活性最好,并且此时外周血中性粒细胞的数量达到峰值。本研究结果表明,sTF不仅能够增强犬中性粒细胞的杀菌活性,还能增加犬外周血中性粒细胞的数量。     

活化卵白蛋白对兔嗜中性粒细胞杀菌功能的影响

将25只大耳白兔随机分为3组，分别以100mg/kg、250mg/kg、500mg/kg的剂量连续灌服活化卵白蛋白5d，并在用药前后分别采血，测定嗜中性粒细胞杀菌功能。结果表明，100mg/kg即可显著提高嗜中性粒细胞杀菌功能（P＜0．05），250mg/kg和500mg/kg可极显著提高嗜中性粒细胞杀菌功能（P＜0．01）。     

大鼠外周血嗜中性粒细胞分离方法的优化改良

本试验旨在寻找一种高效、简便、经济及可靠的方法从大鼠外周血中分离出嗜中性粒细胞(PMNs),为后续抗菌药物筛选及机理研究提供基础。在常规的Percoll密度梯度离心法基础上加入淋巴细胞分离液以去除淋巴细胞,并对离心温度、Percoll浓度等进行改良,考察优化后方法提取的PMNs数量、活力及纯度。试验结果显示:(1)优化后提取的PMNs数量与常规方法相比差异显著(P0.05),约为常规提取方法的1.2倍;(2)优化后方法和常规方法提取的PMNs活力均为97%以上,无差异(P0.05);(3)优化后方法提取的PMNs纯度约为80%,常规方法提取纯度为20%,优化后方法与常规提取方法相比差异极显著(P0.01)。表明优化改良后的方法分离出的PMNs纯度高,活性好,数量多,是一种简单、高效的PMNs分离方法。     

C5a对类风湿关节炎小鼠嗜中性粒细胞的募集作用

通过使用双光子显微镜活体成像技术优化了K/B×N血清诱导的关节炎小鼠模型,并观察了嗜中性粒细胞的募集情况。皮下注射K/B×N血清可以快速诱导大量的嗜中性粒细胞募集到局部炎症关节。通过使用这种方法,发现阻断C5a活性会减少嗜中性粒细胞募集,说明C5a是关节炎期间嗜中性粒细胞募集的关键调节因子。因此,本试验将为补体相关生物制剂治疗类风湿关节炎提供新的靶点。     

肝素和钙离子载体诱导猪射出精子体外获能的研究

本文采用肝素和钙离子载体诱导猪射出精子体外获能,根据对去透明带仓鼠卵的穿透情况评价获能效果,并用台盼兰·姬姆萨染色观察精子的死活及顶体状态。结果表明,未经获能处理的猪精子不能穿透仓鼠卵,肝素和I-A均能诱导猪精子体外获能并引起顶体反应。经获能处理的精子,在授精后2小时穿透卵子,4小时开始形成雄原核,6小时形成发育良好的雄原核。肝素处理以100μg效果最好,穿透率达77.8%,有原核卵百分率达47.2%;I-A处理以0.3uM为宜,穿透率达66.7%,有原核卵百分率达42.4%。咖啡因与肝素和I-A具有协同作用,能提高精子的穿透能力。有顶体反应的活精子百分率与穿透率呈强正相关(肝素组:r=0.97,P<0.01;I-A组:r=0.94,P<0.01)。     

应注意应激导致的围产期奶牛嗜中性粒细胞增多症

围产期奶牛在很短的时间内所经历的变化对其本身而言是巨大的。首先,奶牛的泌乳突然停止,并在短时期内重新开始泌乳,打乱了奶牛正常的秩序。其次,在这个时期内奶牛经历了多达三种以上的日粮变化(泌乳后期日粮、干奶期日粮、围产前期日粮、围产后期日粮),影响奶牛瘤胃微生物群的数量和种类,由此影响饲料的消化;日粮变化影响瘤胃构造和其吸收能力,由此影响饲料的效率;在这个时期内奶牛从高精日粮到高粗日粮引起奶牛瘤胃乳头的退化,此时瘤胃吸收表面积减少50%,当喂给精料含量增加的围产期日粮时,乳头开始变长但需要4～6周的时间。这些就是在这…