红掌愈伤组织培养及不定芽分化影响因素的研究

[目的]构建红掌愈伤组织培养再生植株的技术体系。[方法]以红掌叶片和叶柄愈伤组织为继代培养的外植体材料,探讨红掌品种、外植体大小、激素条件对愈伤组织不定芽分化的影响。[结果]红掌品种YNG1叶片愈伤组织的不定芽分化率最高,叶柄愈伤组织的不定芽分化率则以品种YNG2最高,而品种YNG3和YNG5仅叶片愈伤组织能分化不定芽,叶柄愈伤组织均无分化;与细胞分裂素6-BA相比,向分化培养基中添加ZT与TDZ可促进叶片愈伤组织的增殖及不定芽分化;选取直径约1.0~1.5 cm的愈伤组织块进行继代培养,不定芽分化较多,同时可缩短不定芽分化时间。[结论]该研究为构建稳定高效的红掌组培快繁技术体系提供了新的试验依据。     

唐菖蒲花茎愈伤植株再生途径的优化

研究了外植体不同生长阶段、激素种类和浓度对2个唐菖蒲品种愈伤组织诱导及不定芽再生的影响。结果表明,以Rose Supreme 5叶期和Advanced Red 7叶期的花茎为外植体较好,2个品种直接诱导愈伤组织及不定芽再生的最佳培养基为MS BA 2 mg/L IBA 0.4 mg/L,愈伤诱导率分别达到80.50%和87.78%,愈伤全部再生不定芽,平均再生芽数分别为14.2和13.0,培养周期仅为45 d左右。在生根培养基MS IBA0.5 mg/L上生根率分别达86.67%和92.44%,单苗根数为16.1和22.1,根势好,结球率均达90%以上。     

红掌愈伤组织培养及不定芽分化影响因素的研究

[目的]构建红掌愈伤组织培养再生植株的技术体系.[方法]以红掌叶片和叶柄愈伤组织为继代培养的外植体材料,探讨红掌品种、外植体大小、激素条件对愈伤组织不定芽分化的影响.[结果]红掌品种YNG1叶片愈伤组织的不定芽分化率最高,叶柄愈伤组织的不定芽分化率则以品种YNG2最高,而品种YNG3和YNG5仅叶片愈伤组织能分化不定芽,叶柄愈伤组织均无分化;与细胞分裂素6-BA相比,向分化培养基中添加ZT与TDZ可促进叶片愈伤组织的增殖及不定芽分化;选取直径约1.0～1.5 cm的愈伤组织块进行继代培养,不定芽分化较多,同时可缩短不定芽分化时间.[结论]该研究为构建稳定高效的红掌组培快繁技术体系提供了新的试验依据.     

新疆雪莲组培苗的染色体观察

[目的]为雪莲的组织培养奠定细胞学基础。[方法]以新疆雪莲无菌苗的根部、下胚轴、真叶及种胚为外植体进行组织培养,观察愈伤组织和不定芽阶段的染色体变异。[结果]4种外植体形成的愈伤组织细胞中有二倍体、少量四倍体、六倍体、非整倍体及其他倍性细胞。以种胚为外植体的愈伤组织中染色体数目异常的频率最高,但愈伤组织不出芽或出芽量极少,且芽形态不正常。以根部、下胚轴和真叶为外植体的愈伤组织出芽比例高,茎尖、根尖细胞染色体大多数为二倍体,少数为嵌合体,嵌合体苗中四倍体细胞比例很小。愈伤组织中存在异常的有丝分裂现象,不定芽中难以发现。[结论]雪莲组织培养中的染色体变异是由激素引起的,非整倍性的愈伤组织细胞分化能力低。     

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。     

珍稀植物香果树植株再生体系的建立

通过不定芽直接再生和经愈伤组织诱导器官发生两种途径,建立了香果树快速、高频率发生的植株再生体系,探讨了不同外植体（幼叶切块、茎段、叶柄和根）、叶片放置方式、植物生长调节剂和培养条件对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响.香果树愈伤组织诱导器官发生结果表明:不同外植体在MS附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织诱导率均为100%,其中叶片外植体叶面向下放置效果最好;愈伤组织在MS添加0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的培养基上不定芽的分化率为94.35%.香果树不定芽直接再生结果显示:叶片外植体在MS添加6-BA或ZT的培养基上,不定芽直接再生率均高达100%,其中在MS附加2.0 mg/L 6-BA培养基上,产生的不定芽数目多,生长旺盛;附加1.0 mg/L ZT 培养基上,不定芽数目多达56.67个/cm[[sup]]2[[/sup]],但生长较弱.黑暗预培养有利于香果树叶片外植体不定芽的再生.两种途径得到的不定芽转到1/2 MS培养基上均可生根,生根率达100%,附加1.0 mg/L 的IBA和0.5%的活性炭有利于再生植株根的生长.      

文冠果叶片离体再生体系的优化研究

[目的]探明不同处理对文冠果叶片离体再生体的反应。[方法]以成熟文冠果叶片作为外植体,通过诱导和培养的方法,研究不同培养基激素配比对文冠果离体培养的影响。[结果]2,4-D及其与BA组合诱导的愈伤组织不适宜进行间接不定芽诱导;MS培养基中添加2.0mg·L-1 KT和0.2mg·L-1 NAA时,愈伤组织诱导率最高,且在愈伤组织上可分化出不定芽,是叶片通过愈伤组织诱导不定芽再生的一条最佳途径。IBA与NAA、IAA组合中,NAA、IAA浓度为1.0mg·L-1时,为最佳生长素配比;生长素速蘸方法不适宜进行试管苗生根培养。[结论]不同组合和配比生长系,对文冠果再生体有不同效果。     

细胞分裂素对红掌愈伤组织不定芽分化与增殖的影响

[目的]研究细胞分裂素对红掌组培苗繁殖速度及质量的影响。[方法]以继代培养第6代的愈伤组织为试验材料,探讨了ZT、TDZ、6-BA 3种细胞分裂素及其浓度对不定芽分化及变异的影响。[结果]在使用浓度2.0~8.0 mg/L的范围内,随着细胞分裂素浓度的增加,正常不定芽的分化数及叶片数呈下降趋势,而异常不定芽分化逐渐增多,且随着培养时间的延长,这种影响变得更加明显;3种细胞分裂素的培养效果具有显著差异,ZT和6-BA添加浓度分别在2.0和4.0 mg/L以下时,其正常不定芽分化较多,不良变异率较少,而TDZ在0.5 mg/L时已显著抑制了正常不定芽的分化,同时易产生异常不定芽。[结论]3种细胞分裂素作用的强弱依次为TDZZT6-BA;在红掌愈伤组织继代培养诱导不定芽过程中,应避免使用高浓度细胞分裂素。     

松果菊根外植体植株再生能力的评价

为了评价松果菊Echinacea purpurea L.根外植体的再生能力,将从松果菊无菌小苗得到的根外植体和叶片以及叶柄外植体接种到含有不同种类和浓度的细胞分裂素和生长素的培养基上,诱导不定芽的再生.结果表明,在多数情况下,根外植体的再生能力显著高于叶片,和叶柄类似.0.3 mg/L的苄基腺嘌呤和0.01 mg/L的萘乙酸是诱导根外植体不定芽再生最合适的激素种类和质量浓度组合.根外植体培养的不定芽再生频率为100%,每个根外植体得到再生芽1.75个.当把这些由根再生的不定芽从母体组织切开并转移培养到含有0.01 mg/L萘乙酸的培养基后,很容易生根并成为完整的植株.可见根是组培快繁松果菊理想的外植体材料.     

桑树毛状根再生条件研究

为建立桑树毛状根的再生体系,以桑树毛状根作为外植体,研究不同质量浓度6-BA和NAA配比对桑树毛状根愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,并对再生植株进行PCR检测。结果表明,桑树毛状根的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA,最佳不定芽分化培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,3周愈伤组织不定芽分化率为16.7%。应用该不定芽获得再生植株的根系生长旺盛,叶片提取的基因组中含有rolB生根基因。     

菊花脑叶片组织培养再生植株的研究

[目的]建立菊花脑叶片组织培养再生技术。[方法]以菊花脑叶片作为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同激素设计10种培养基,研究不同种类和浓度的激素组合对菊花脑不定芽和根诱导率的影响,筛选愈伤组织诱导、芽诱导及生根的最佳培养基。[结果]将无菌苗的叶片外植体接种于最佳愈伤组织诱导培养基MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg/L NAA,培养15d可获98．0％的诱导率;之后将带有少量外植体的愈伤组织切下,接种到最佳芽诱导培养基MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／L NA量上培养,可获94．0％的出芽率;然后再将1cm以上的再生芽转接至最佳生根培养基MS＋IBA 0．05mg／L上生根,生根率这100％;生根25d以上的幼苗经炼苗和移栽后,成活率在95％以上。[结论]建立了菊花脑叶片组织培养再生植株的技术程序．     

水茄子叶培养简化快繁技术的建立（英文）

[目的]研究简化水茄子叶培养快繁技术体系试验流程。[方法]以水茄子叶为对象,研究不同激素浓度处理对其愈伤组织的诱导、增殖、分化及生根数的影响。[结果]以水茄子叶为外植体,诱导愈伤组织和不定芽的最佳培养基均为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,愈伤组织诱导率高达100%,不定芽诱导率为85%,平均芽数6个。诱导水茄不定根的最佳培养基为MS+0.3 mg/L IAA,生根率达到100%,平均根数9条。[结论]一步诱导水茄诱导愈伤组织和不定芽方法简化了快繁技术体系,提高试验效率。     

水稻突变体D12W191多分蘖表型产生与细胞分裂素的关系

[目的]本研究旨在比较水稻矮秆多分蘖突变体D12W191与野生型‘武育粳3号’的细胞分裂素(CTK)和生长素(IAA)含量差异以及相关基因表达情况,并探究分蘖生长抑制剂萘乙酸(NAA)处理对其分蘖芽形态发育的影响及生理机制。[方法]以野生型粳稻‘武育粳3号’及利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱导突变获得的矮秆多分蘖突变体(编号为D12W191)为供试材料,测定分蘖芽及分蘖节的细胞分裂素(CTK)和生长素(IAA)含量,并分析细胞分裂素合成、降解和响应调节子基因及生长素合成基因的表达差异。[结果]D12W191分蘖芽的玉米素(Z)和玉米素核苷(ZR)含量均高于‘武育粳3号’,在分蘖节中未出现显著差异;与细胞分裂素变化趋势不同,突变体材料D12W191分蘖芽中IAA含量和‘武育粳3号’相比没有差异,而分蘖节中的IAA含量低于‘武育粳3号’。IAA与Z+ZR比值分析表明,突变体D12W191分蘖芽和分蘖节的IAA/(Z+ZR)值均低于‘武育粳3号’。与野生型相比,D12W191的分蘖芽和分蘖节中的细胞分裂素合成基因Os IPT4、Os IPT5、Os IPT7表达上调,细胞分裂素降解基因Os CKX4、Os CKX5、Os CKX9表达下调,细胞分裂素响应调节子基因OsRR6、OsRR7、OsRR11也呈现下调的趋势,而且细胞分裂素合成抑制剂Lovastatin能够完全抑制多分蘖突变体分蘖的发生。生长素合成基因Os YUCCA3、Os YUCCA4在突变体分蘖芽和分蘖节中的表达量与野生型相比无显著差异,而Os YUCCA6在突变体分蘖节中显著下调,在分蘖芽中的表达与野生型处于同一水平。水稻Os TB1基因负调控分蘖的发生,其在突变体分蘖芽中表达明显下调。外源NAA处理抑制了2个材料分蘖芽的生长,并且使Os IPTs基因表达下调,Os CKXs和Os TB1基因表达上调。[结论]D12W191突变体Os IPTs表达上调及Os CKXs表达下调使分蘖芽中内源CTK含量上升,而细胞分裂素信号转导途径负调控因子A型OsRRs基因表达量下降,又增强了细胞分裂素的作用,这些都有利分蘖的发生,外源喷施细胞分裂素合成抑制剂Lovastatin试验结果进一步表明,突变体的多分蘖表型可能是由于分蘖芽中较高的CTK引起的。NAA处理显著抑制了D12W191分蘖芽的生长,这与其对Os IPTs、Os CKXs和Os TB1基因的调控有关。     

均匀设计在柑橘砧木离体培养再生体系建立中的应用

[目的]建立枳壳离体培养再生体系。[方法]采用均匀设计研究了不同时期枳壳茎尖、茎段、芽的愈伤组织诱导、增殖、分化、及生根情况。[结果]愈伤组织诱导率及生长量由高到低为春梢夏梢秋梢冬梢;不同时期外植体诱导愈伤组织所需生长调节物质种类、浓度、配比不同,春梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好,夏梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 4.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好。愈伤组织增殖的最优配方是MT+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.2 mg/L。在MT+6-BA 0.25 mg/L+IBA 0.3 mg/L培养基上不定芽分化效果好,不定根发生率、根数、根的质量均在1/2MT+NAA 4 mg/L培养条件下最佳。[结论]为枳壳快速繁殖、脱毒技术和相关细胞工程的研究奠定基础。     

正交试验法优选贯叶连翘组织培养条件

采用正交试验法对贯叶连翘组织培养过程中生长素、细胞分裂素、外植体3因素进行优选研究.结果表明,贯叶连翘易于形成愈伤组织,愈伤组织、叶片易于分化形成不定芽,不定芽易于形成根.影响贯叶连翘愈伤组织诱导形成的主要因素是生长索、细胞分裂索、外植体,贯叶连翘愈伤组织诱导的最佳组合是贯叶连翘叶片,生长素0.5mg/L 2,4-D,细胞分裂素0.5 mg/L 6-BA.影响贯叶连翘愈伤组织诱导形成不定芽的主要因素是生长素,最优选择是0.01 mg/L2,4-D和0.01 mg/L IAA;细胞分裂索采用0.01 mg/L 6-BA、ZET、KT、2-ip以及愈伤组织来源采用根、茎、叶、芽,差异不明显.贯叶连翘叶片诱导形成不定芽过程中生长素最优选择是0.01 mg/LIBA,细胞分裂素采用6一BA、ZET、KT、2-ip差异不明显.1.0 mg/L生长素与0.1 mg/L细胞分裂素均能诱导贯叶连翘根的形成.     

胡萝卜幼苗根、茎、叶组织培养再生植株

[目的]研究胡萝卜幼苗的组织培养再生技术。[方法]以培养约2个月的胡萝卜幼苗为材料,分别取幼苗的根、茎、叶为外植体,研究不同培养基、不同外植体对愈伤组织诱导的影响,以及培养基对愈伤组织分化的影响。[结果]根、茎、叶为外植体均能产生愈伤组织,但以茎为外植体诱导的愈伤组织质量最佳,其愈伤组织的诱导率和分化率均为最高。[结论]建立了胡萝卜试管培养幼苗的愈伤组织诱导和再生植株体系,为今后的试验打下了基础。     

小菊花瓣愈伤组织与丛芽诱导

以4个品种小菊花瓣作为外植体,进行以花瓣为外植体的愈伤组织和丛芽诱导试验.以MS为基本培养基,添加生长素与细胞分裂素,通过正交试验筛选出愈伤组织诱导、不定芽分化以及继代增殖中最优的激素配方.     

番茄愈伤组织诱导与细胞悬浮培养方法的改良

[目的]探讨番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件。[方法]用番茄的子叶作为外植体,研究不同浓度2,4-D与6-BA组合诱导"美国红"番茄子叶愈伤组织形成、不定芽发生的情况。[方法]在MS基本培养基上附加不同水平6-BA和2,4-D的培养基中,愈伤组织形态发生的情况不同,其中激素含量起主要作用。子叶外植体以MS+2,4-D0.05mg/L+6-BA0.01mg/L为最佳再生培养基,对愈伤组织的形成和不定芽的分化都有良好的效果。不同生长调节物质对细胞的悬浮培养有一定的影响,以2,4-D0.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.05mg/L的浓度组合为最佳。[结论]该研究确认了番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件,为番茄组织培养奠定了基础。     

甘蓝根系再生植株技术研究

【目的】研究甘蓝根系再生植株技术,为小孢子单胚再生双单倍体(DH)植株当年快速扩繁提供参考。【方法】以甘蓝DH151A的根段为外植体,设置预培养后再进行共培养和直接共培养2种培养方式,共培养的培养基为MS+4.5 mg/L 6BA+6 mg/L AgNO3,再向其中添加不同质量浓度（0.045,0.03,0.025,0.018和0.015 mg/L）的NAA,筛选适宜的培养方式和NAA质量浓度;选择根龄分别为15,20和25 d的DH151A的根段在适宜培养基上培养,比较根龄的诱导效果;以DH151A、DH152B和DH153C无菌植株苗的须根作为外植体,分析基因型对植株再生的影响。【结果】采用直接共培养并选用MS+0.030 mg/L NAA+4.5 mg/L 6BA+6 mg/L AgNO3培养基可获得甘蓝根段诱导培养的最佳效果,其中愈伤诱导率、外植体诱导率和不定芽诱导率均最高,分别达100.0%,90.0%和430.0%,培养3周后分化芽生长健壮,叶片翠绿;根龄20 d外植体的愈伤诱导率最高,达96.0%,并且愈伤分化芽点多,芽点周围褐化少,外植体诱导率和不定芽诱导率均最高,分别为84.0%和420.0%。DH植株基因型是决定根系再生植株效果的一个主要因素,3个供试基因型中,以DH152B根段的再生效果最好,愈伤诱导率、外植体诱导率和不定芽诱导率分别为83.3%,76.7%和430.0%。【结论】选用DH152B基因型甘蓝20 d的根段在MS+0.03 mg/L NAA +4.5 mg/L 6BA+6 mg/L AgNO3培养基上培养,最有利于根段再生植株形成,植株再生率高达100％。     

西瓜花药培养中不定芽的诱导与增殖

[目的]探讨西瓜不定芽的诱导与增殖。[方法]在西瓜花药愈伤组织诱导的基础上,研究不定芽的诱导与增殖。[结果]MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IAA培养基可以使愈伤组织再分化成不定芽。不定芽在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA中进行增殖,随着继代培养次数的增加,玻璃化和黄化现象变得更加严重。采取降低6-BA浓度甚至不添加任何激素、提高琼脂的含量、增加光照时间与强度等措施,可以有效减少西瓜不定芽的玻璃化现象。[结论]当培养基中细胞分裂素与生长素的比例为10∶1~100∶1时,由西瓜愈伤组织诱导出不定芽的可能性较大。