乙酰氨基阿维菌素缓释注射剂中乙酰氨基阿维菌素含量与有关物质HPLC检测方法的建立

试验旨在建立一种高效液相色谱检测方法,同时测定乙酰氨基阿维菌素(EPR)缓释注射剂的主成分与有关物质,采用外标法计算主成分的含量,采用自身对照法计算有关物质的含量。色谱柱为Phenomenex Luna 5 μ-C8-100A 250 mm×4.60 mm,5 μm;色谱条件为:流动相为乙腈-0.1%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.5 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为35 ℃,进样量为20 μL。结果表明,EPR缓释注射剂主成分与杂质分离度良好,B1a与B1b之间分离度>3;在EPR浓度为1.5625~1 000 μg/mL的范围内线性关系良好;EPR的检测限与定量限分别为0.01和0.34 μg/mL,3种精密度的相对标准偏差(RSD)均<2%,稳定性的RSD为0.28%,加样回收率为102.54%,且RSD为3.14%(n=9)。耐用性试验表明,EPR缓释注射剂主成分的分离度均>1.5,理论塔板数>4 500,表明该检测条件的耐用性良好。3批样品中,EPR缓释注射剂含量的平均值为102.60%,B1b占B1a与B1b之和的1.68%,总杂质的平均含量为2.57%。建立的EPR缓释注射剂中主成分含量与有关物质的测定方法具有简便、专属性强、灵敏度高、结果准确等特点,可用于EPR缓释注射剂的质量控制。     

牛血浆中乙酰氨基阿维菌素HPLC-FLD检测方法的建立

为了研究乙酰氨基阿维菌素(eprinomectin, EPR)缓释注射液在牛体内的药代动力学情况,试验建立了检测牛血浆中EPR浓度的高效液相色谱荧光(HPLC-FLD)法,并进行了系统的方法学验证,向空白牛血浆样品中加入内标阿维菌素(AVM),用乙腈沉淀蛋白质,再用固相萃取柱进行净化,洗脱液浓缩至干后以N-甲基咪唑和三氟乙酸酐对EPR及AVM进行衍生化,采用HPLC-FLD法进行检测。该检测方法所用色谱柱为Elite Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相为甲醇∶乙腈∶水=64∶32∶4;流速为1 mL/min;柱温为35℃;荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为463 nm。结果表明：建立的HPLC-FLD检测方法中EPR的保留时间为8.076 min, AVM保留时间为12.922 min。检测限为0.5 ng/mL,定量限为1 ng/mL。血浆样品中EPR浓度在1～100 ng/mL之间时,血浆药物浓度与峰面积之比呈良好的线性关系,线性方程为y=0.912x+0.924,相关系数(R² )为0.994 7。准确度为80...     

乙酰氨基阿维菌素国家对照品的研制

以乙酰氨基阿维菌素为原料研制首批乙酰氨基阿维菌素国家对照品,并进行质量评价。采用高效液相色谱法和质谱法对原料进行结构确证,分装后的乙酰氨基阿维菌素对照品采用质量平衡法定值,同时采用高效液相色谱外标法加以佐证。结果显示,以质量平衡法计算乙酰氨基阿维菌素(B_1a+B_1b)含量为97.79%,液相色谱外标法测定含量为98.18%,两种方法测定结果基本一致。本次研制的乙酰氨基阿维菌素对照品可用于乙酰氨基阿维菌素及其制剂的鉴别与含量测定。     

鸡血浆中乙酰氨基阿维菌素HPLC检测法的建立及口服给药后的药代动力学研究

旨在建立鸡血浆中乙酰氨基阿维菌素（EPR）浓度的高效液相色谱（HPLC）检测方法,并进行EPR在鸡体内的药代动力学研究。用甲醇提取血浆中的EPR,并用Sep-Pak C18固相萃取法进行纯化,纯化后的EPR经干燥处理,用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑对其进行衍生化,使用荧光HPLC检测。结果表明,在血浆EPR含量为0.1~100 ng/mL范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9999。检测限（LOD）为0.1 ng/mL,定量限（LOQ）为0.3 ng/mL。批内批间的平均回收率均大于90%,批内变异系数2.81~8.02%,批间变异系数4.32~5.83%。给蛋鸡口服5.0 mg/kg的EPR,EPR在鸡体内的药代动力学参数显示：给药后1.58 h可达最大血药浓度（Cmax）354.27 ng/mL;消除半衰期（T1/2el）为5.52 h;平均滞留时间（MRT）为6.40 h。以上结果说明建立的检测方法灵敏度高、准确度高,干扰少,适用于鸡血浆中EPR含量的检测。药代参数提示EPR在鸡体内的吸收代谢迅速,可较快消除。     

乙酰氨基阿维菌素在动物医学中的研究进展

乙酰氨基阿维菌素是第1个可以应用于奶牛和肉牛,而不需要休药期的广谱抗寄生虫药,就乙酰氨基阿维菌素在动物医学中的研究进展进行了综述.     

乙酰氨基阿维菌素对奶牛的驱虫效果及生产性能的影响

本文对乙酰氨基阿维菌素的驱虫效果及对泌乳奶牛生产性能的影响进行试验,结果表明,所有不同组试验牛平均泌乳量在给药后均有变化,其中在给药前30d,给药组平均泌乳量为26.01±5.03kg/d.头,对照组为25.32±4.28kg/d.头;给药60d后,试验组奶牛的产奶量24.72kg/d.头;对照组奶牛的产奶量22.14kg/d.头。给药前30d,给药组平均泌乳量比对照组多0.69kg/d.头,给药60d后试验组比对照组多1.89kg/d.头。     

乙酰氨基阿维菌素对奶牛内寄生虫的驱虫效果试验

为验证乙酰氨基阿维菌素对内寄生虫的驱虫效果,在已经感染内寄生虫的某奶牛场特设计以下试验：随机选取20头奶牛分成试验组和对照组,分别在试验进行的当天、第7天、第14天、第21天、第28天采集每一头牛的粪便,然后分别测定粪便中的线虫虫卵数量,计算注射乙酰氨基阿维菌素后奶牛粪便中虫卵减少率,同时对两组奶牛所产的牛奶进行品质检测。结果表明,自注射乙酰氨基阿维菌素后第二周开始,试验组奶牛粪便内的线虫虫卵数量大幅度减少,而对照组奶牛粪便内的线虫虫卵数量基本保持不变;注射乙酰氨基阿维菌素后虫卵减少率也是从第二周开始大幅度增加,至第四周试验结束时达到95.08%;注射组奶牛所产的牛奶经乳品公司严格的入场检测无抗生素残留。     

两种固相萃取柱在乙酰氨基阿维菌素药动学前处理中的比较

为评价乙酰氨基阿维菌素(EPR)药动学前处理中两种固相萃取(SPE)柱的净化、萃取效果,首先在空白胎牛血清中加入一定量的EPR标准溶液,经色谱甲醇提取后,分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱对其进行萃取,再经N-甲基咪唑和三氟乙酸酐衍生化,最后用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定;同时,将等量的EPR标准溶液进行衍生化,用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定,将其结果作为对照;以绝对回收率作为评价两种SPE柱净化、萃取EPR效果的标准。结果显示,含有EPR的胎牛血清分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱萃取后,两者的EPR峰形均尖锐对称且无明显杂质峰,但绝对回收率有差异,分别为94.50%和85.79%。结果表明,Agilent公司的C_(18) SPE柱对EPR的萃取效果更理想。     

高效液相色谱法测定氟苯尼考悬浮乳剂含量

建立了测定氟苯尼考悬浮乳剂含量的高效液相色谱法。采用C18色谱柱（4.6 mm×250mm,5μm）,以乙腈-水（25∶75）为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长223 nm,进样量20μL,柱温为室温。氟苯尼考浓度在40～60μg/mL时,其峰面积与浓度的线性关系良好（r=0.999 9）;无杂质干扰,平均回收率为100.18%,平均批内变异系数为0.82%,批间变异系数为0.22%。本方法操作简便,分析快速,结果准确,适用于氟苯尼考悬浮乳剂的含量测定。     

HPLC法测定四环素的含量

建立四环素含量的高效液相色谱测定法。样品用盐酸溶液溶解后上高效液相色谱仪测定,色谱条件为XBridge C₁₈色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH值至2.0)(12∶88),检测波长280 nm。结果显示,在10～500μg/mL范围内,四环素峰面积与浓度呈良好的线性关系,回收率为99.5%。结果表明方法简便、准确,可以很好地控制四环素的质量。     

芬苯达唑混悬剂的制备与含量测定方法的建立

以芬苯达唑为主药,选择合适的助悬剂、润湿剂等辅料制备混悬剂,并建立该混悬剂中芬苯达唑含量测定方法。采用紫外-可见分光光度法,以217nm为测定波长,测定芬苯达唑混悬剂中芬苯达唑的含量。在1.08μg/mL~10.80μg/mL浓度范围内,标准曲线y=0.099 2x-0.033 6,线性回归相关性好(R2=0.995 3,n=5)。芬苯达唑的平均回收率为98.60%,变异系数为0.48%,日内和日间精密度RSD均小于5%,表明该方法专属性好,测定结果稳定可靠。此方法可以用于芬苯达唑混悬剂有效成分的含量测定。     

牛奶中埃谱利诺菌素(eprinomectin)荧光高效液相色谱检测方法的建立

建立了以多拉菌素 (doramectin,DOR)作为内标检测牛奶中埃谱利诺菌素 (eprinomectin,EPR)的荧光高效液相色谱 (HPL C)检测法。用乙腈作为牛奶中蛋白质的沉淀剂和 EPR的提取剂。用 ODS- C1 8固相萃取法对提取的 EPR进行纯化。用真空干燥箱对提取和纯化后的 EPR进行干燥。在无水条件下 ,用三氟乙酸酐和 N-甲基咪唑作荧光衍生化剂 ,加入冰醋酸 ,在加热条件下对干燥后的 EPR进行荧光衍生化。用荧光 HPL C进行检测 ,检测条件 :流动相为 A液(为乙腈与无水甲醇按 1∶ 2的比例配制而成 )与水之比为 98∶ 2 ,流速为 1.0 m L/ m in,激发波长为 36 6 nm,发射波长为 4 6 5 nm,进样量为 10 0 μL,柱温为室温。本方法的检测限为 0 .1μg/ L,在 1～ 4 0 μg/ L 血浆的浓度范围内 ,标准曲线方程为 Y=0 .1787x- 0 .117,R2 =0 .997;样品的回收率为 83.4 0 %～ 10 5 .6 5 % ;变异系数为 6 .32 %～ 9.0 5 %。结果显示 :本方法灵敏度高 ,干扰少 ,重复性好。     

二喹噁啉羟酸全抗原偶联比HPLC测定方法的建立

为建立一种准确、可靠的测定人工抗原偶联比方法,本试验应用高效液相色谱法方法测定全抗原二喹噁啉羟酸—牛血清白蛋白(QCA-BSA)合成中游离二喹噁啉羟酸的含量。采用Waters 2695分离系统、2489紫外检测系统;流动相:甲醇∶水(60∶40);柱温:30 ℃;流速:1 mL/min; 检测波长320 nm。试验结果表明,游离二喹噁啉羟酸的线性范围为0.2~128 μg/mL,线性方程为y=17526x+4648,R²=1,RSD为0.28%,全抗原QCA-BSAⅠ、Ⅱ、Ⅲ的偶联比分别为1.76∶1、28.60∶1、65.63∶1。建立的方法准确、可靠,适用于喹噁啉类人工抗原偶联比的测定。     

刺五加多糖含量测定方法的建立

通过建立刺五加药用植物多糖含量的测定方法,为刺五加质量控制和资源开发提供科学依据。以葡萄糖为对照品,采用苯酚—硫酸法测定刺五加药用植物多糖的含量。结果表明,葡萄糖标准曲线为A=0.0133C-0.0025,R2=0.997 5,刺五加多糖含量为2.40%。该方法精密度良好,反应产物在2 h内吸光值稳定,平均回收率为99.1%。     

高效液相色谱法检测德拉昔布咀嚼片含量方法的建立

为建立检测德拉昔布咀嚼片含量的方法,本试验采用高效液相色谱法对德拉昔布咀嚼片和Deramaxx咀嚼片进行含量测定。样品经粉碎与甲醇溶解,超声处理20 min, 0.22μm滤膜滤过后进样测定。色谱条件:色谱柱Wasters C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相为磷酸盐缓冲液(pH=4.5)∶乙腈(52∶48,v/v);检测波长252 nm;流速1 mL/min;柱温30℃。结果显示,德拉昔布标准品以甲醇为溶剂,进样浓度在0.5～8μg/mL,建立标准曲线,样品浓度与峰面积的线性关系良好(r~2=0.999 2)。仪器精密度为0.56%,日内差异为0.94%,日间差异为1.85%,溶液稳定性为0.57%,平均加样回收率为(99.68±0.53)%。表明所建立的高效液相色谱含量检测方法简便、准确、专属性强,可用于德拉昔布咀嚼片含量的测定。     

紫外分光光度法测定甲基丁香酚含量方法的建立

采用紫外分光光度法,检测波长230 nm对甲基丁香酚原料药含量进行测定.结果表明,在Oμg/mL～5 μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程为A=0.025 1x-0.001 4(r=0.996 6,n=5),平均回收率为99.45％,RSD为1.03％(n=3),测定的甲基丁香酚原料药的含量为98.27％.该方法...     

伊维菌素吡喹酮咀嚼片含量测定方法的建立

为了建立伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药含量的方法,采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈∶水的梯度洗脱系统作为流动相,伊维菌素检测波长为245 nm,吡喹酮检测波长为210 nm。在该色谱条件下,溶剂和辅料对伊维菌素和吡喹酮出峰均无干扰,伊维菌素和吡喹酮与相邻杂质峰分离良好。伊维菌素在2～400μg/m L的浓度范围线性关系良好;吡喹酮在1～100μg/m L的浓度范围内线性关系良好。伊维菌素回收率为102.5%,吡喹酮回收率为99.4%。该方法操作简便,准确度高,重复性好,可用于伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药的含量。     

HPLC法测定氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量

测定氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量 ,高效液相色谱法。色谱柱为 Watersspherical C1 8(3 .9× 1 50 mm column,5μm) ;流动相为水 -乙腈 -1 mol/ L 磷酸二氢钾溶液 -1mol/ L 醋酸溶液 (90 9∶ 80∶ 1 0∶ 1 ) ;检测波长2 54nm;流速 1 .0 m L/ min;柱温 :3 0℃ ;保留时间约 4.5min。结果 :氨苄西林在 0 .2 5～ 2 .0 mg/m L范围内具有良好的线性关系 (r=0 .9999) ,平均回收率为 99.6% ,RSD=0 .3 %。结论 :该法可用于氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量测定     

硫酸头孢喹肟乳房注入剂中头孢喹肟含量HPLC通用性测定方法的建立

建立了适用于国内硫酸头孢喹肟乳房注入剂(泌乳期和干乳期)中头孢喹肟含量测定的HPLC通用性方法。采用与《中国兽药典》硫酸头孢喹肟原料含量测定一致的高效色谱条件,使用有机溶剂破乳后加入流动相超声的提取方法,保证了方法的一致性和适用性。方法验证结果显示,本方法专属性较强,准确度较高,重复性和耐用性良好,适用于对国内硫酸头孢喹肟乳房注入剂的含量测定,被收载入2020年版《中国兽药典》。