应用蛋白质凝胶电泳法鉴定玉米种子纯度

多年来,我们采用蛋白质凝胶电泳法对千份不同玉米品种的样品谱带观察、分析,并与田间种植鉴定对比,证实了该方法不但准确性高,速度快,经济,简便,而且具有稳定性和再现性,是目前玉米品种纯度鉴定的理想方法。下面从电泳谱带观察、分析上,谈谈鉴定玉米品种纯度的可行性。１　杂交种与亲本自交系之间的亲缘关系１．１　互补型谱带：在杂交种中出现两条谱带（与亲本对照）,其中一条与父本一致,另一条与母本一致,则这两条谱带称作互补带。例如,单交种中单２号（Ｍｏ１７×自３３０）有两对互补带。一对互补带上线与父本自交系自３３…     

SDS-PAGE蛋白电泳技术在F1代杂交种纯度鉴定中的应用

随着市场的需要,商品种子量越来越大,而对杂交种质量问题不容忽视,我们在实际工作中对中椒四号,中椒五号,京欣一号,金花宝四个杂交种纯度鉴定尝试了大量的同工酶电泳方法,包括ＰＯＸ,ＥＳＴ,ＡＤＨ,ＭＤＨ,ＩＳＨ,ＰＧＭ,ＰＧＩ等同工酶电泳图谱中均未找到交父母本与一代杂种的鉴别标记。而在种子蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱中找到了一代杂种与父母本的鉴别带,并利用这个鉴别带进行了杂交种纯度鉴定。这种鉴定方法的准确性在田间对照纯度鉴定中得到确认,此方法可用于杂交种商品种子的纯度检测。     

提高西瓜杂交种纯度的制种技术

玉米的区域试验是玉米新品种选育后和推广前的中间试验，区域试验结果直接关系到是否珍惜育种成果和对广大生产者负责的头等大事。而每个区试点犹如一台标准天平，其地力是否均匀、管理是否科学、观察记载是否准确、试验报告是否客观，则是检验试验天平灵敏度高低的关键；更是防止和杜绝“冤、假、错”案的根本所在。因此认真做好玉米品种区域试验工作，是育种家的要求，是对农民负责，更是一种社会职责。     

电泳谱带法在玉米杂交种纯度鉴定中的应用探讨

近年来兴起的电泳谱带法因具有快速、准确、低廉等优点而倍受种子界关注,应用前景十分广阔.笔者近几年做了一些玉米杂交种的电泳谱带纯度鉴定,本文将针对这些鉴定结果对玉米杂交种电泳谱带进行分析,并就电泳谱带法在应用中遇到的问题加以分析探讨.     

SSR标记对甜瓜杂交种‘众天翠雪’纯度的鉴定

旨在筛选能够用于甜瓜杂交种纯度和真实性鉴定的SSR引物。利用公认的18对多态性较好的甜瓜SSR(Simple Sequence Repeats)引物对甜瓜杂交种"众天翠雪"及其亲本进行多态性筛选,并在杂交群体中进行验证。13对引物在亲本间具有多态性条带,经过多次重复,筛选到2对引物在亲本间具有多态性、子代中兼具双亲条带,并且在子代群体中检测结果与田间形态鉴定结果一致。引物RF151和RF144能够作为‘众天翠雪’杂交种纯度鉴定的特异引物进行纯度检测。作为共显性标记特性的SSR分子标记可以作为杂交种纯度鉴定的重要工具。     

利用RAPD标记鉴定大白菜杂交种纯度的研究

应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）标记鉴定大白菜杂种商品种子的纯度。用５０个随机引物检测了２个杂交种北京５７号和北京１０６号及其亲本,引物ＯＰＥ－２０在北京５７号杂交种中产生了有别于双亲的特殊标记,引物ＯＰＨ－０６及ＯＰＨ－０７在北京１０６杂交种中产生了有别于双亲的特殊标记,能清楚地区分杂交种及其双亲,并将这些引物应用在北京５７号和北京１０６号杂交种样品的纯度检测中。这个结果显示了ＲＡＰＤ标记在大白菜杂交种商品种子纯度检测上的实际用途。     

应用SSR标记技术鉴定玉米杂交种纯度

以张玉1号、纪元1号、蠡玉6号、万佳11杂交种及其各自亲本为实验材料．利用16对玉米SSR引物进行SSR扩增,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR引物．建立了一套利用SSR标记技术快速、准确、简便易行地进行玉米杂交种纯度鉴定的技术。     

6个玉米杂交种种子纯度的SSR鉴定

玉米杂交种纯度是影响玉米产业发展的重要因素之一,建立快速、准确可靠的纯度检测技术是控制杂交种纯度的有效措施。从30对SSR引物中筛选出6对表现为双亲互补型的引物,建立了6份杂交种纯度鉴定的SSR体系。Umc1002、bnlg1112、bnlg238、Umc1153、phi072、bnlg240可分别用于玉米杂交种农大108、浚单20、郑单958、莱农14、莱农15和鲁玉16的纯度检测。双亲互补型等位变异基因频率在0.028～0.072之间,可较准确地检出样品中的自交株和大部分异型株。SSR鉴定玉米杂交种纯度结果略低于幼苗鉴定,但二者差异不显著,相关系数为r=0.8434。本试验建立的SSR技术体系可用于6个玉米杂交种纯度的快速检测。     

酯酶同工酶等电聚焦电泳在玉米姊妹系杂交种纯度鉴定中的应用

酯酶同工酶等电聚焦电泳技术1999年引入我县种子公司化验室,并应用于玉米单交种和姊妹系杂交种的纯度检测中.经过3年的室内玉米品种纯度鉴定和田间小区种植鉴定对比,证明该方法不但在单交种纯度鉴定上与其他电泳方法具有同样的技术效果,而且在农大3138、唐抗5、承8453等姊妹系玉米杂交种纯度检测上具有独特的技术优势.室内检测鉴定结果较田间小区种植鉴定结果偏低0.9%～2.1%,用 y=4.26+0.963 4X回归方程推算,其结果与田间小区种植鉴定结果相近似.     

利用冬暖式大棚鉴定玉米杂交种子纯度

玉米杂交种质量高低，纯度是首要指标。如何确保种子纯度，是一项非常重要的工作。对玉米杂交种来讲，室内检验虽是一个重要方面，但由于受一些客观条件限制，准确性差。3a来，我们利用冬暖式大棚鉴定玉米杂交纯度，取得了较好的效果。……     

多重PCR在甜瓜种子纯度鉴定中的应用

为获得一种高效、低成本的甜瓜种子纯度鉴定方法,本研究采用碱裂解法从甜瓜叶片中提取基因组DNA,设计10个组合,采用10μL反应体系和Touch-down反应程序进行PCR扩增。结果表明多重PCR并不影响扩增结果;最适PCR产物片段差为60 bp及以上;同一反应体系中适宜添加的标记对数为2~3对。使用本研究方法可有效克服传统单一PCR在种子纯度鉴定中速率慢的缺陷,具有省时、省力、低成本、特异性好、准确性高等特点,能够简捷快速地获知甜瓜种子材料的纯度,以便于更有针对性地开展后续的种质资源分析和育种工作。     

利用清蛋白PAGE技术鉴定甜玉米杂交种初报

利用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对7个甜玉米杂交种的清蛋白进行分析。结果表明,甜玉米种子清蛋白存在一定的多态性,每个品种都有各自独特的清蛋白PAGE“指纹”。利用该技术对7个不同甜玉米杂交种的种子纯度进行了室内检验,同时利用田间种植鉴定法进行了测定,通过对其中5个杂交种的电泳纯度和田间纯度进行相关分析,二者达显著水平（r=0.9408）,说明改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术用于甜玉米种子纯度鉴定是可行的,可用于甜玉米杂交种纯度鉴定。     

酯酶同工酶鉴定杂交水稻品种及其亲本纯度的研究

研究了两种不同的电泳缓冲系统及染色方法对水稻酯酶同工酶的鉴定效果.结果表明：Tris-HCl系统的分辩率比Tris-citric系统的高.分析了杂交水稻不同发育时期材料、不同取材部位酯酶同工酶的表达.结果表明：3～4 d芽龄的幼苗为最适宜的鉴定时期,取材部位不影响标记酶带的表达.应用该方法对供试材料的酶谱类型进行了划分：①偏亲型（汕优559、协优57、协优559、65002）;②互补型（特优559、特优多C 1号）;③杂合型（汕优63、协优63、特优63）.其中互补型在种子真实性和纯度鉴定中具有一定利用价值.用互补型对生产用种进行检测,并与相应的大田鉴定结果进行回归分析,表明田检纯度和酶谱纯度呈极显著正相关.     

棉花品种遗传纯度的SSR分子标记鉴定技术研究

为建立适合于SSR标记的棉花品种纯度鉴定方法,利用78个SSR标记对12个棉花常规品种进行标记基因型分析.通过比较不同品种不同单株标记基因型,发现棉花品种的非纯SSR位点存在3种主要类型.通过综合分析非纯SSR位点率和异型单株率对品种遗传纯度的影响,建立了利用SSR标记在分子水平上鉴定棉花品种纯度的方法.利用该方法鉴定的12个棉花品种中有3个品种(C5、C9和Cll)的遗传纯度在98％以上,非纯SSR位点和异型株均较高的2个品种(C3和C6)遗传纯度分别为67.31％和31.79％,该方法弥补了以往分子纯度计算方法中只考虑单株混杂、不考虑SSR位点混杂的缺陷,可比较客观地反映品种的遗传纯度状况.     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定向日葵种子纯度的研究

采用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术，对13份向日葵杂交种和自交系进行了鉴别，结果表明，它们的种子蛋白电泳图谱差异明显，特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定种子纯度结果之间存在极显著的线性正相关性。该技术可作为向日葵杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种新手段。     

小麦叶绿素缺失突变体Mt6172及其野生型叶片蛋白质组学双向差异凝胶电泳分析

以空间环境诱变获得的小麦叶绿素缺失突变体Mt6172的白化苗及其野生型邯6172的叶片为材料,进行双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)蛋白质组学分析。在1645个蛋白点中,发现100个差异1.5倍以上的蛋白点,对在分析胶中得到的85个点进行质谱鉴定,最终鉴定出29种差异蛋白的62个差异点,其中50个表达下调,12个表达上调,可分为10个功能群。表达下调的蛋白主要定位于叶绿体中,包括光系统I、光系统II、NAD(P)H脱氢酶复合体和ATP合酶的部分亚基,以及参与卡尔文-本森循环、糖代谢和应激反应的蛋白。非叶绿体蛋白中的大部分表达上调,主要参与抗氧化反应、转录激活和蛋白质折叠等途径。初步推断,光合作用主要蛋白复合体的缺失、叶绿体抗氧化能力的下降和叶绿体RNA转录后编辑途径受阻等可能是Mt6172白化致死的重要原因。     

偃麦草和中间偃麦草种质材料苗期抗旱性鉴定研究

选用来自9个国家的17份偃麦草和中间偃麦草种质材料,在日光温室模拟旱境胁迫条件下,通过土壤干旱法,开展了苗期抗旱性鉴定研究,分析测定了植株叶片的相对含水量、细胞膜透性、脯氨酸含量、丙二醛含量等理化指标,综合评定了17份种质材料的抗旱性强弱,并针对上述4个理化指标变化率,通过赋分分级的办法将其划分为较强、中等、较弱3个抗旱性级别,抗旱性强的种质材料包括Ag-2,Greenar,AJC-320,Reliant,1;抗旱性中等的种质材料包括2,Clarke,D-2111,Slate,DT-3175,D-1483,X93035;抗旱性较弱的种质材料包括D-1987,699,D-939,D-3244,VIR103。