生猪氯霉素残留检测分析

为了解本市猪肉中兽药残留情况,随机抽查凌海市几个周边县区农贸市场市售鲜猪肉,检测氯霉素的残留情况。采用酶联免疫吸附法（ELISA）,取猪肝160份测定氯霉素残留,结果阳性数10份,检测阳性率6．25％。检测结果不容乐观。为确保本市鲜猪肉供应的食品安全,应加强源头监控。     

氯霉素残留的危害及其检测方法

氯霉素属广谱抗生素 ,曾在畜牧业中广为应用。但氯霉素有较强的副作用和毒性作用 ,如果氯霉素在食用动物中残留 ,可通过食物链传给人类 ,长期微量摄入氯霉素 ,不仅使人体肠道正常菌群失调 ,而且还会引起多种疾病 ,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物 ,并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。对于氯霉素的残留 ,存在多种检测方法 ,不同的检测方法具有不同的检出限。检测限问题已成为关注的焦点 ,发达国家对检出限的要求越来越严格     

氯霉素的不良反应及其残留检测方法研究进展

氯霉素存在严重的毒副作用,能抑制人体骨髓造血功能,引起人类的再生障碍性贫血,粒状白细胞缺乏症,新生儿、早产儿灰色综合症等疾病。低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性,对人类健康和环境构成严重危害。随着国际社会对氯霉素残留的高度关注,氯霉素的检测方法得到了广泛的研究,从最初的利用微生物进行定性检测到目前的各种先进检测技术的联用,如LC-MS等,氯霉素的检测限、精密度和回收率等技术都得到了极大提高。先进的检测技术不仅为人体的健康提供了安全保障,同时为我国的食品对外贸易发挥了巨大作用。     

动物性食品中残留氯霉素检测方法的研究进展

氯霉素已禁止应用于食品动物,美国FDA、欧盟、中国等相关标准都规定动物性食品中不得检出氯霉素。但养殖业中仍存在氯霉素滥用现象,造成动物性产品中氯霉素残留。高效的检测方法在氯霉素残留控制中发挥关键作用。现就目前国内外有关动物性食品中氯霉素残留检测方法的进展情况做一系统概述。     

动物性食品中氯霉素残留检测的研究进展

氯霉素是一类作用强、抗菌谱广的抗生素，曾经是畜禽疾病防治的重要药物，但是，氯霉素在动物性食品中残留对人造成的损害已引起重视。笔者就动物性食品中氯霉素残留检测的方法和概况做一综述。     

氯霉素残留ELISA检测方法

2002年农业部第235号公告《动物源性食品中兽药最高残留限量》中明确规定氯霉素禁止使用,在动物性食品中不得检出。所以建立检测动物源性食品中痕量氯霉素残留的分析方法具有重要的意义。目前常用于氯霉素残留的检测方法有微生物法、免疫分析方法、色谱法等,比较常用的是酶联免疫法和色谱法。酶联免役法（EUSA）因其具有操作简便、快速等优点,成为畜产品中农药残留、毒素、农药、微生物检测中最重要的检测技术之一。本文旨在建立畜产品中氯霉素残留的快速检测方法,并为进一步研制开发氯霉素残留检测试剂盒奠定基础。     

氯霉素残留检测方法

1 氯霉素的残留检测方法 氯霉素残留检测方法的建立始于20世纪70年代,到现在为止,国内外已相继建立起了气相色谱、液相色谱、薄层色谱、放射性分析、微生物法及免疫学检测等方法。最为灵敏的气相色谱检测方法是Jacabson等（1974）提出的。德国Russel首先报道了液相色谱法检测氯霉素的残留。Arnold和Somogyl建立了放射免疫分析试验方法,Camphell等建立了酶联免疫吸附测定法。     

水产品中氯霉素类药物残留检测技术的研究进展

氯霉素类药物是一类广泛应用于畜禽、水产养殖中的抗生素,它在水产品中的残留将会影响水产品出口和人体健康。作者综述了氯霉素类药物在水产品中的前处理技术和残留检测方法,包括微生物法、免疫分析法、色谱分析法和其他方法,并分别对其检测方法的优缺点进行了综述,最后对氯霉素类药物多残留检测方法的发展趋势进行了展望。     

氯霉素残留状况及检测方法

一、氯霉素类药物概述 氯霉素类药物（Chloramphericol．CAP）是应用广泛的广谱抗生素，常用于动物各种传染性疾病的治疗中，对各类家禽、家畜、水产品及蜂蜜制品各种传染性疾病的控制和治疗起重要作用。氯霉素最初是从委内瑞拉链丝菌的培养液中提取制得，现在基本使用化学合成法大量生产。氯霉素类药物对多种病原菌有较强的抑制作用，对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌均有抑制作用。其中对伤寒杆菌、流感杆菌和百日咳杆菌物作用比其它抗生素强，对立克次体感染如斑疹伤寒也有效，对革兰氏阳性球菌的作用微弱。     

氯霉素残留危害及检测

有资料表明：如果长期微量摄入含有氯霉素残留的食物,不仅能使大肠杆菌、沙门氏菌等菌株产生耐药性,而且能使机体正常菌群失调,从而感染各种疾病。氯霉素对人体危害最主要表现为抑制骨髓造血机能。通常引起各类血细胞的可逆性减少,这一反应与剂量和疗程有关,一旦发现,应及时停药,可以恢复;偶见不可逆的再生障碍性贫血,此反应属于变态反应与剂量疗程无直接关系。婴幼儿肝发育不全,排泄能力差,氯霉素的代谢、解毒过程受限制,导致药物在体内蓄积,出现循环系统衰竭俗称“灰婴综合征”。欧盟、美国等国家规定动物源性食品中氯霉素的残留限量标准为“零容许量”,即不得检出。在这种形势下,我国也制定了各种措施禁止氯霉素的使用,但由于其价格低廉,疗效显著,临床使用氯霉素的现象仍屡禁不止,致使我国出口的畜产品中频频检出氯霉素,严重影响了我国对外贸易和产品的国际形象。     

氯霉素在动物性食品中的检测

本文对氯霉素在动物体内的代谢与在动物性食品中残留及检测方法进行了阐述。     

氯霉素残留伏安免疫测试法的电化学条件

在间接竞争ELISA的基础上，建立了以碱性磷酸酶（ALP）-对硝基苯磷酸（pNPP）为反应体系的检测氯霉素（CAP）残留的伏安免疫方法，并对此法的电化学条件进行了详细的探讨。结果，在0．2mol／L的B-R电解质溶液（pH3．0）中，当扫描速度为50mV／s时，伏安法对硝基苯酚（PNP）的灵敏度最佳；且在1．2V处，该物质具有良好的氧化峰形。用此法测试CAP的检测下限达到0．064ng／mL，检测线性范围为0．15～600ng／mL。     

酶联免疫法测定鸡肝中氯霉素残留

运用酶联免疫检测试剂盒测定鸡肝中氯霉素的残留量.氯霉素标准液浓度在 0.025～2 μg/mL范围内线性良好,r=0.995 1,鸡肝中最低检测限为0.10 μg/kg.空白添加阳性样品浓度为0.1、0.5和1.0 μg/kg时,回收率分别为86.9%、89.1%和80.0%,板内变异系数<14.6%,板间变异系数<12.0%;本方法操作简单快捷、灵敏准确、方便实用,可作为鸡肝中氯霉素残留检测的快速筛选方法.     

磁珠标记的氯霉素直接竞争ELISA方法的建立

采用本实验室制备的氯霉素(CAP)单克隆抗体,以包被抗原1:6 000和酶标CAP单抗1:8 000的稀释比例为工作浓度,建立CAP直接竞争ELISA(cdELISA)方法,cdELISA检测灵敏度达到0.1 μg/L.利用xMag异硫氰酸根末端磁粒标记CAP单克隆抗体制备免疫磁珠,用该免疫磁珠富集样品中的CAP.经过乙酸乙酯抽提免疫磁珠表面吸附的CAP,再通过cdELISA检测,可使CAP的检测灵敏度提高50倍,即达到0.002 μg/L.     

氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上．研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP-kit的标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9953，检测范围为1．0μg/L～128．0μg/L，灵敏度为0．85μg／L，半数抑制浓度（IC50）为7．54μg/L，检测限为1．0μg/L；牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88．3％、82．5％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应；试剂盒在4℃可保存6个月。     

过氧化氢酶-氯霉素偶联物的合成及其结合比的测定

利用混合酸酐法合成了氯霉素琥珀酸酯衍生物，再用碳二亚胺将该衍生物与过氧化氢酶偶联，用紫外分光光度法测定已纯化的偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比。结果，偶联物中氯霉素与过氧化氢酶的结合比达到30．67：1，偶联物中过氧化氢酶的活性损失约30%。结果表明，该偶联物可作为竞争性ELISA法或免疫传感器法测试氯霉素时所需的酶标抗原。     

关于饲料检测实验室废液处理的探讨

实验室废液处理得当对于保持环境健康有积极的意义。简要分析探讨了饲料检测实验室废液处理的具体方法和措施,以供饲料检测机构参考使用。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中氯霉素的两种前处理方法比较

为选择氯霉素超高效液相色谱串联质谱分析前处理方法,分别对乙酸乙酯提取,正己烷液液萃取净化和乙腈提取,LC-Si固相萃取柱萃取净化(GB/T22338-2008方法),两种前处理方法进行对比分析。结果显示:乙酸乙酯提取法的检测限为0.1μg/kg,在0.5~10ng/mL范围内线性关系良好,r>0.99,回收率为98.2%~104.8%,RSD为1.5%~7.2%;乙腈提取法的检测限为0.05μg/kg,在0.25~10ng/mL范围内线性关系良好,r>0.995,回收率为100.0%~104.0%%,RSD值为0.5%~2.1%。结果表明:两种方法的线性范围、回收率、检测限和相对偏差均能满足畜产品检验要求。乙酸乙酯提取法步骤简单,样品处理效率高,乙腈提取法虽步骤繁琐,但结果的精密度和灵敏度更高。     

猪圆环病毒病实验室检验技术研究进展

随着规模化养猪业的不断发展,猪Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)引起的疫病呈上升趋势,给世界养猪业带来了巨大的经济损失。作者简要介绍了猪圆环病毒分类、分子结构特征、理化特性、生长特性等,对PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3蛋白的功能、特性及在疫苗、临床检测等方面的应用进行了阐述。主要就实验室检验技术,如免疫组织化学技术、间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应、原位核酸杂交试验等研究进展进行了综述。