维生素C对克氏原螯虾肝胰腺非特异性免疫的影响

为探究维生素C作为饲料添加剂短期投喂克氏原螯虾(Procambarus clarkii)对其肝胰腺非特异性免疫的影响,并寻找出最适的添加量,将规格相同(27 g±3 g)、健康无伤的克氏原螯虾暂养7 d后分5组,对照组投喂基础饲料,4个试验组投喂的饲料为在基础饲料中添加维生素C(添加量分别:0.1、0.2、0.4、0.8 g/kg)。投喂5 d后,取试验虾肝胰腺进行免疫相关酶活指标的测定,结果显示:添加0.2 g/kg的维生素C可以显著提升克氏原螯虾肝胰腺中SOD、CAT、T-AOC等抗氧化酶的活性,对于免疫酶ACP、AKP的活力依然有显著提升作用。并且对于肝胰腺中MDA的含量有降低作用(P<0.05)。0.4 g/kg添加组,能够显著提升肝胰腺中CAT活力,并且显著降低MDA含量(P<0.05)。由此可以得出在饲料中添加0.2~0.4 g/kg维生素C可以在一定程度上提升克氏原螯虾肝胰腺的非特异性免疫。     

养殖密度对克氏原螯虾生长及消化酶、免疫酶活性的影响

水温(25±1)℃时,将体质量(3.11±0.10)g的克氏原螯虾幼虾饲养在120 cm×60 cm×20 cm的水族箱中,密度分别为14尾/m2(低密度组)、28尾/m2(中密度组)和42尾/m2(高密度组),研究室内养殖不同密度对生长、摄食、消化酶活性及非特异性免疫的影响.8周的养殖结果显示,克氏原螯虾的存活率随养...     

饲料中添加维生素A、C和E对克氏原螯虾生长和免疫力的影响

维生素在甲壳动物的存活、生长、繁殖过程中起重要作用。本研究采用正交设计实验,研究了维生素A、维生素C和维生素E的添加量对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)幼虾生存、生长和免疫的影响。研究设立三个因子A、B、C,分别为维生素A、维生素C、维生素E的添加量。每个因子设3个水平,维生素A添加量的3个水平为:0.0048、0.0054、0.006%;维生素C添加量的3个水平为:0.02、0.05、0.08%;维生素E添加量的3个水平为:0.02、0.04、0.06%。极差分析结果表明,克氏原螯虾幼虾成活率最高时的因子水平组合为:A3B1/B3C2;增重率最大时的因子水平组合为:A3B2C2;丙二醛(MDA)含量、超氧化物气化酶(SOD)活性和SOD基因表达水平最低时的因子组合水平都为:A2B1C1;酚氧化酶(PO)活性最高时的因子水平组合为:A3B2C1;谷胱甘肽过氧化物酶基因GPx表达水平最低时的因子水平组合为:A3B1C1。将克氏原螯虾幼虾的成活率和增重率作为主要考虑因素,综合考虑免疫指标及成本因素,我们建议在本次实验设计的条件中,选择A3B1C2作为最佳组合方案,即维生素A添加量为0.006%、维生素C添加量为0.02%、维生素E添加量为0.04%时,最有利于克氏原螯虾幼虾的存活、生长,提高其免疫力。     

维生素E对克氏原螯虾生殖的影响

实验用不同的维生素E(VE)含量的饲料投喂克氏原螯虾亲虾,研究对其繁殖性能的影响,目的是为研制亲虾的人工饲料提供指导.结果显示,在添加VE量分别为基础饲料干重的0%、0.004%、0.02%、0.1%和0.5%的5个饲料组中,0.02%VE组不仅可以增加产卵雌虾的数量比例,而且也能提高克氏原螯虾雌虾的产卵量.随着VE含量的升高,产卵雌虾的比例呈下降趋势,单个雌虾的产卵量与0.02%VE组差不多,这表明饲料中适当添加VE可促进克氏原螯虾产卵,但饲料中VE含量过高对克氏原螯虾的繁殖产生负面影响.在饲料中添加适量的VE能够提高亲虾繁殖能力,方法简单,效果明显,适合规模化生产的需要,可以推广.     

盐度对克氏原螯虾幼虾生长的影响

研究了不同盐度对克氏原螯虾幼虾生长的影响.试验于水族箱内进行,试验幼虾的初始体质量(1.82±0.21)g,体长(3.13±0.30)cm.在25 ℃条件下,试验设置0、2、4、6、8、10、12、14计8个盐度梯度,试验结果表明,盐度为0～14时,克氏原螯虾的幼体均能存活与生长.盐度为0～6,成活率较高,生长较快,饵料系数较低,各项指标与对照组差异不显著(P>0.05).当盐度超过此范围时,随着盐度增加,幼虾的成活率下降,生长变慢,饵料系数增大,与对照组差异显著(P<0.05).     

隐蔽所对不同生长阶段克氏原螯虾生长的影响

将体质量0.527 g(幼虾)和6.100 g(亚成体虾)的克氏原螯虾饲养在底面积为113 cm^2 、高为12 cm的圆形塑料盒中,一组放入内径为1.9 cm的PVC管作为隐蔽所为隐蔽组,以不放PVC管为对照组,其他条件同隐蔽组,定期测量各组克氏原螯虾的体长、体质量增长量、存活率和蜕壳率等指标,研究隐蔽所对不同规格克氏原螯虾生长的影响。2个月的饲养结果显示,试验第1个月隐蔽组幼虾组体长增长、体长相对增长率、体质量增长及蜕壳量均显著大于对照组( P <0.05),第2个月两组各数据无显著差异( P >0.05);隐蔽组亚成体螯虾摄食量、体质量及蜕壳量均小于对照组。研究结果表明,隐蔽所在螯虾的早期生长阶段对其生长有促进作用,但随着螯虾体格的增大,隐蔽所的促进作用随之减弱,甚至最终抑制螯虾的生长。本研究围绕克氏原螯虾穴居的习性以及趋触性等行为的特点,为生产提供了合理建议。     

4种配合饲料对克氏原螯虾幼虾生长及免疫性能的影响

以均初始体质量为(3.02±0.01)g的克氏原螯虾幼虾为研究对象,进行为期58 d的养殖试验,同时比较研究不同配合饲料(D1、D2、D3、D4)对虾的摄食、生长以及非特异性免疫力的影响。养殖试验结束后进行白斑综合征病毒(WSSV)感染试验,并于感染后0、12、24、36、48、60、72、84 h统计虾的存活率。养殖试验结果表明:与D1组相比,投喂D4、D3、D2饲料组均能显著提高克氏原螯虾的增重率、特定生长率,降低饲料系数(P0.05);D4、D3组溶菌酶水平显著高于D1组,D4组超氧化物歧化酶水平显著高于D2、D1组,D4组过氧化氢酶水平显著高于其他三组(P0.05);各组间存活率、葡萄糖、皮质醇和丙二醛水平均无统计学意义差异(P0.05)。攻毒试验结果表明:感染WSSV 24 h后虾开始出现死亡;36 h时,各组间存活率无显著差异(P0.05);48 h、60 h、72 h时,D4、D3、D2组存活率显著高于D1组(P0.05);84 h时,D4组存活率显著高于其他三组(P0.05),D1、D2、D3组之间存活率差异不显著(P0.05)。综上所述,D4组饲料使用效果最佳。     

维生素E对克氏原螫虾生殖的影响

实验用不同的维生素E（VE）含量的饲料投喂克氏原螯虾亲虾，研究对其繁殖性能的影响，目的是为研制亲虾的人工饲料提供指导。结果显示，在添加VE量分别为基础饲料干重的0％、0．004％、0．02％、0．1％和0．5％的5个饲料组中，0．02％VE组不仅可以增加产卵雌虾的数量比例，而且也能提高克氏原螯虾雌虾的产卵量。随着VE含量的升高，产卵雌虾的比例呈下降趋势，单个雌虾的产卵量与0．02％VE组差不多，这表明饲料中适当添加VE可促进克氏原螯虾产卵，但饲料中VE含量过高对克氏原螯虾的繁殖产生负面影响。在饲料节添加适量的VE能够提高亲虾繁殖能力，方法简单，效果明显，适合规模化生产的需要，可以推广。     

克氏原螯虾EST同工酶的组织特异性研究

以克氏原螯虾为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了肌肉、眼球、肝胰腺和心脏4种组织或器官中酯酶(EST)同工酶的表达情况.结果发现,眼球和肌肉中各表达2条带,在肝胰腺中表达出4条带,而在心脏中表达出3条带.EST同工酶在肝胰腺中表达最强,眼球中次之,肌肉中表达最弱,表现出明显的组织特异性.     

功能性饲料添加剂对克氏原螯虾非特异性免疫力及抗氧化能力的影响

为探索功能性饲料添加剂对克氏原螯虾非特异性免疫力及抗氧化能力的影响,选取大小一致、附肢完好的克氏原螯虾幼虾[初始平均体质量(9.84±1.17)g],随机分为2组,其中一组为对照组(D1,投喂普通商品料),另一组为试验组(D2,投喂功能性饲料).连续投喂40 d,分别于试验前(0d)、试验后第10、20、30、40天采...     

高温应激对克氏原螯虾免疫酶活性及抗WSSV感染的影响

为探明高温应激对克氏原螯虾(Procambarus clarkia)抗病力的影响,分别采用30℃和35℃水温进行高温应激试验,应激前和应激后3、6、12、24和48 h分别采集血淋巴样本,测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)、多酚氧化酶(PPO)、溶菌酶(LYZ)、酸性磷酸酶(ACP)以及碱性磷酸酶(ALP)等免疫相关酶类指标。并在上述高温应激下开展白斑综合征病毒(WSSV)人工感染实验,同时设置25℃为阳性和阴性对照组,于感染后3、6、12、24、48、72 h取鳃组织定量测定WSSV在组织中的载量,同时记录克氏原螯虾的发病和死亡情况,统计累积死亡率。结果显示,克氏原螯虾血淋巴中的T-SOD与LYZ含量在高温应激后都出现了显著性降低,而PPO、ACP和ALP的变化差异不大。在35℃饲养条件下,WSSV在克氏原螯虾体内的增殖受到抑制,实验虾发病慢,累积死亡率相对较低,但在30℃饲养条件下,WSSV在克氏原螯虾体内的增殖较常温(25℃)下更活跃,发病和死亡更快。结果表明,高温应激能导致克氏原螯虾机体非特异性免疫力降低,30℃时能加快克氏原螯虾感染WSSV的发病进程,而35℃时因病毒复制被抑制而导致疾病的发展受阻。     

高pH急性和慢性胁迫对克氏原螯虾非特异性免疫和抗氧化能力的影响

为探讨高pH急性和慢性胁迫对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)非特异性免疫和抗氧化能力的影响,分别设置对照(pH 7.6)和试验(pH 10.2)2个pH处理组,对克氏原螯虾进行急性(0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、5 d)和慢性(10 d、15 d)pH胁迫试验.结果显示:高pH应激后,...     

克氏原螯虾血细胞及免疫功能的初步研究

甲壳动物血细胞在宿主免疫应答中发挥着重要的作用,其中包括识别、吞噬、包囊黑色素形成、胞毒作用和胞间的信息传递。不同类型的血细胞其防御机制不同,因此血细胞的形态和分类是甲壳动物免疫学的基础。通常情况,十足目甲壳动物的血细胞类型主要依据细胞质中颗粒物质的有无和颗粒物质的相对大小进行分类。研究采用Giemsa染色法、H.E染色法和电子显微技术法对克氏原螯虾血细胞进行分类,观察到3类血细胞：透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞,它们所占的比例分别为19.9%,46.1%,34.1%。在电镜下,这3类血细胞的超微结构极为容易辨识。透明细胞通常在3类细胞中最小,核质（N/C）比最高,但无明显的颗粒;相比之下,小颗粒细胞和大颗粒细胞内部的颗粒数量逐渐增多。利用体内和体外培养技术研究克氏原螯虾血细胞对外源体（以Sephadex A-25色谱硅珠作为抗原）的包囊作用,初步探讨克氏原螯虾血细胞在对外源体免疫应答过程中的识别机理。将Sephadex A-25色谱硅珠植入克氏原螯虾体内,抗原物周围被大量血细胞包囊,通过切片技术观察到抗原物周围的血细胞绝大部分为小颗粒细胞,证实在包囊过程中起主要作用的血细胞是小颗粒细胞,即小颗粒细胞在包囊反应中比较活跃。研究结果为以后进一步研究克氏原螯虾的细胞免疫机制和提高其抗病能力提供了科学依据。     

枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾免疫机能的影响

在饲料中分别添加0、1×109、3×109和5×109cfu/kg枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),测定投喂相应饲料后第1、4、7、14、21、28天以及停止投喂枯草芽孢杆菌后的第7、14天克氏原螯虾(Procam barus clarkii)的血淋巴吞噬活性、血清溶菌活力、抗菌活力以及酚氧化酶活力。结果显示:实验组(含枯草芽孢杆菌的饲料组)的吞噬活性于投喂枯草芽孢杆菌后第7天开始显著高于对照组(P<0.05);实验组的溶菌活力、抗菌活力明显高于对照组(P<0.05),并在停药后仍维持较高水平(P<0.05);此外,酚氧化酶活力也有所增加。本研究表明,枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾的免疫机能有促进作用。     

芦苇粉对克氏原螯虾诱食效果及生长的影响

为研究芦苇粉对克氏原螯虾诱食效果及生长的影响,分别在基础饲料中加入0、5％、10％、15％、20％、25％共6个含量水平的芦苇粉,观察不同配比的混合饲料对克氏原螯虾的诱食效果,并测定虾的存活数、体长、体质量和蜕壳数.结果表明:(1)在饲料中添加5％以上的芦苇粉对克氏原螯虾有明显的诱食效果(P＜0.05).(2)芦苇粉含量对螯虾的平均存活数无显著影响(P＞0.05).芦苇粉的添加量≤5％时,螯虾各项生长指标差异均不显著(P＞0.05);当添加量≥10％时,螯虾的平均体长、体质量及平均蜕壳数开始显著减小(P＜0.05).据此认为,芦苇粉的最适添加量应在5％ ～10％,此最佳添加比例可保证混合饲料在基本不影响螯虾生长的同时又具有较好的诱食效果.     

维生素C、E及高度不饱和脂肪酸交互作用对克氏原螯虾繁殖性能的影响

在室内,将体质量20~40g的克氏原螯虾饲养在50cm×40cm×40cm的水族箱中,投喂7种饲料:基础饲料(对照组,试验饲料1);基础饲料+0.5%维生素C+0.02%维生素E+8%高度不饱和脂肪酸(含6%秘鲁鱼油和2%大豆卵磷脂)(试验饲料2);基础饲料+0.5%维生素C+0.02%维生素E(试验饲料3);基础饲料+8%高度不饱和脂肪酸(试验饲料4);基础饲料+0.02%维生素E(试验饲料5);基础饲料+0.5%维生素C(试验饲料6);2#青虾全价颗粒饲料(粗蛋白≥30%)(试验饲料7),每组饲料设置3个重复,研究了在饲料中添加维生素C、E及高度不饱和脂肪酸对克氏原螯虾培育成活率、抱卵率、抱卵量及孵化率的影响。76d的繁育结果表明,7组试验饲料对克氏原螯虾亲虾的培育成活率影响不显著(P0.05)。试验饲料2组亲虾的抱卵率(75%)和孵化率(82.8%)最高,显著高于对照组(P0.05)。饲料2组、3组、5组、6组亲虾的相对抱卵量差异不明显(P0.05),显著高于饲料4组(仅添加高度不饱和脂肪酸)、1组(P0.05),添加维生素C、维生素E的饲料3组的亲虾相对抱卵量最高,亲虾平均抱卵18粒/g,仅添加高度不饱和脂肪酸的饲料4组,亲虾培育成活率及相对抱卵量较低。结果表明,维生素C、维生素E和高度不饱和脂肪酸具有交互作用,能提高克氏原螯虾的繁殖性能。     

盐度对克氏原螯虾孵化率的影响

研究了不同盐度对克氏原螯虾受精卵孵化的影响.水温25 ℃条件下,盐度0～8时克氏原螯虾的受精卵均可孵出幼体.但以盐度0～4时孵化率较高,每个亲体平均孵出的幼体数量较多,高出此盐度范围时孵化率明显降低,且随着盐度升高,孵化时间延长.试验表明,0～4的盐度为克氏原螯虾孵化的适宜盐度,孵化率较高,孵化时间较短.     

饲料蛋白质水平对克氏原螯虾生长性能的影响

为探索饲料蛋白质水平对克氏原螯虾生长性能的影响,选用体质健壮、规格一致的克氏原螯虾[初始体质量为(9.45±1.33) g]225尾随机分成5组,每组设3个重复,每个重复15尾虾,分别饲喂5种不同蛋白质水平(质量分数为25%、30%、35%、40%、45%)的饲料,试验期为60 d。试验结果显示:当饲料中蛋白质质量分数由25%提高至45%时,试验虾的体质量增长率(WGR)先升高后降低,而饲料系数(FCR)呈现先降低后升高的变化趋势;当饲料蛋白质质量分数为30%时,克氏原螯虾的WGR和特定生长率(SGR)均达到最大值,显著高于除饲料蛋白质质量分数为35%外的其他各组(P0.05); FCR在饲料蛋白质质量分数为30%时最低,显著低于除35%和40%组外的其他各组(P0.05)。通过二次曲线方程回归分析,当饲料蛋白质质量分数分别为31.66%、31.37%和32.20%时克氏原螯虾的WGR、SGR和FCR达到最优。结果表明,在该试验条件下,克氏原螯虾饲料中适宜的蛋白质质量分数为31.37%～32.20%。     

温度对克氏原螯虾幼虾发育和存活的影响

低温条件下克氏原螯虾幼体生长缓慢,但成活率较高。在一定范围内,高温可明显促进幼体的生长,但在31℃时死亡率很高。对于约1月龄的克氏原螯虾幼体,考虑到其生长速度和成活率2个方面的因素,25℃左右可能比较适合其生长发育。克氏原螯虾幼体不适合30℃以上的高温和5℃以下的低温,因此在我国中部和北方地区,克氏原螯虾幼体的越冬应当采取一定的保温措施。