PoprL启动子对丁香假单胞菌DC3000合成冠菌素的影响

冠菌素(coronatine,COR)是由多种丁香假单胞菌致病变种产生的次生代谢产物,是一种新型植物生长调节剂.为了提高菌株冠菌素产量并优化发酵培养条件,将来源于假单胞菌肽聚糖脂蛋白编码基因oprL高效表达组成型启动子PoprL,通过质粒pUCP24/recTE同源重组到丁香假单胞菌DC3000冠菌素合成基因cfl中,...     

P. syringae pv. glycinea M-18生产冠菌素补料发酵工艺优化研究

【目的】提高丁香假单胞菌大豆致病变种高产突变株P. syringae pv. glycinea M-18,发酵生产冠菌素的产量。【方法】研究补料分批发酵过程中初始葡萄糖浓度、葡萄糖补加浓度、补加时间、补加次数、补加三氯化铁的浓度及pH对发酵产生的影响,并在5 L发酵罐中进行放大试验。【结果】在5 L发酵罐中,自发酵后84 h起,保持葡萄糖浓度在5—2 g.L-1,初始葡萄糖浓度为10 g.L-1,发酵后84 h每升发酵液补加0.005 mmol三氯化铁,发酵过程中用40 g.L-1的MgCO3来调控pH在6.7左右,与对照相比冠菌素的产量显著提高,最高达31%。【结论】在发酵过程中将葡萄糖控制在一个较合适的范围内可以显著提高P. syringae pv. glycinea M-18发酵生产冠菌素的产量。     

P.syringae pv.glycinea M-18生产冠菌素补料发酵工艺优化研究#br#

【目的】提高丁香假单胞菌大豆致病变种高产突变株P. syringae pv. glycinea M-18,发酵生产冠菌素的产量。【方法】研究补料分批发酵过程中初始葡萄糖浓度、葡萄糖补加浓度、补加时间、补加次数、补加三氯化铁的浓度及pH对发酵产生的影响,并在 5 L发酵罐中进行放大试验。【结果】在 5 L发酵罐中,自发酵后84 h起,保持葡萄糖浓度在 5-2 g•L-1,初始葡萄糖浓度为10 g•L-1,发酵后84 h每升发酵液补加0.005 mmol三氯化铁,发酵过程中用 40 g•L-1 的MgCO3来调控pH在 6.7 左右,与对照相比冠菌素的产量显著提高,最高达 31%。【结论】在发酵过程中将葡萄糖控制在一个较合适的范围内可以显著提高P. syringae pv. glycinea M-18发酵生产冠菌素的产量。     

Tn5转座诱变选育冠菌素耐高温生产菌株及其发酵条件研究

利用双亲接合的方法将含有Tn5转座子的质粒pRL1063a导入丁香假单胞菌大豆致病变种（Pseudomonas syingae pv. glycinea）PG4180中,在含有卡那霉素和链霉素的MG平板上筛选抗性接合子。通过诱变,从874个突变株中筛选得到2株高温下产生冠菌素的突变株MFB132和MFB141。进而对菌株MFB141的发酵条件进行了优化,其最佳发酵条件为：2%葡萄糖为碳源,0.1%氯化铵为氮源,培养基初始pH为6.8,装液量为50 mL / 500mL,接种量为2%,发酵温度由原来的18℃上升到28℃,而发酵时间由原来的168 h缩短到108 h。在最优化条件下,出发菌株28℃下冠菌素产量仅为1.8 mg/L,而突变株MFB141在28℃下的产量达到37.66 mg/L,大约是出发菌株的21倍。     

冠菌素对冬小麦幼苗生长和抗氧化酶活性的影响

[目的]为了分析在20％ PEG模拟干旱条件下喷施浓度为1μmol/L的冠菌素对小麦幼苗形态及抗氧化酶活性等的影响.[方法]以冬小麦品种济麦22和良星99为试验材料,采用室内水培方法,设置4个处理（CK＋ QS,全营养液＋喷施清水;CK＋ COR,全营养液＋喷施COR; PEG＋ QS,PEG处理＋喷施清水;PEG＋ COR,PEG处理＋喷施COR）.[结果]在干旱胁迫条件下,与喷施清水处理相比,喷施浓度为1 μmol/L的冠菌素能显著提高冬小麦株高、根生长量、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量以及SOD、POD和CAT的活性.此外,在正常生长条件下,喷施冠菌素也同样能起到促进小麦幼苗生长和提高抗氧化酶活性的作用.[结论]冠菌素作为一种新型植物生长调节剂对缓解干旱胁迫对冬小麦苗期生长的影响具有潜在的应用价值.     

耐受Se光合细菌的筛选及生长条件优化

对光合细菌耐受Se及最适生长条件进行探讨,为今后应用光合细菌进行含Se废水处理奠定理论基础。Se耐受性较强的沼泽红假单胞菌和荚膜红假单胞菌的生长条件优化试验结果表明,试以酵母膏为碳源,pH值7.0,接种量为20%30%生长最好,对亚硒酸盐的最大耐受浓度为20-50μg/ml。     

三七细菌性叶斑病病原菌鉴定

[目的]对引起三七细菌性叶宽病的病原菌进行系统鉴定。[方法]以2011及2012年在云南文山及石林县的三七苗圃采集的三七细菌性叶斑病病株为材料,采用柯赫氏法则,检测分离菌株致病性并重新分离得到病原菌。通过病菌形态观察、致病性测定、16SrD—NA序列分析及生理生化特性分析（Biolog系统）对其进行鉴定。[结果]确定三七细菌性叶斑病病原菌为丁香假单胞菌丁香致病变种（Pseudomonas syringae pv．syringae）。[结论]该研究为三七细菌性叶瘫病菌详细鉴定的国内首报。     

蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素（PCN）合成的影响

【目的】研究蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素(PCN)的影响。【方法】通过热处理和分级醇沉等方法得到蝇蛆抗菌肽粗提物,得率11%,制成25μg·μl~(-1)的母液,进一步研究不同浓度蝇蛆抗菌肽粗提液体对铜绿假单胞菌模式菌株PAO1和临床分离菌株PCN合成的影响。【结果】当浓度大于0.5μg·μl~(-1)时,蝇蛆抗菌肽粗提液对PAO1的PCN的合成产生了显著的抑制作用。临床分离的铜绿假单胞菌菌株也有类似的结果。【结论】低浓度(非致死剂量的)蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子PCN具有显著抑制作用。     

植物生长物质冠菌素提高黄瓜幼苗耐冷性的效应

为研究植物生长物质冠菌素对黄瓜幼苗耐冷性的影响,以冷敏感黄瓜品种津春四号幼苗为材料,在第2片真叶完全展开时分别用0(对照CK)、0.000 1、0.001、0.01和0.1μmol/L浓度的冠菌素溶液进行叶面处理,然后在(5±1)℃下低温胁迫4 d。结果表明:0.001μmol/L冠菌素处理的黄瓜幼苗低温胁迫后,冷害指数比CK降低了44.9%,叶绿素含量、光系统Ⅱ原初光能转化效率(Fv/Fm)、脯氨酸、可溶性糖含量分别比CK提高46.7%、99.0%、48.2%和43.1%,而电解质渗漏率含量比CK降低了27.8%,差异均达到显著水平;因此,适宜的冠菌素处理可以显著提高黄瓜幼苗耐冷性。     

1株高冰核活性细菌的分离与鉴定

从发生冻害的植物组织中分离到1株冰核细菌MB03,该菌株在-3℃时在2 min内的冻结率达到96.5%,而产生1个冰核所需要的细胞数约为2.9×103个,其冰核活性明显高于冰核细菌标准菌株和其它分离菌株.进一步对MB03进行了鉴定,经个体形态与培养特征观测、部分生理生化反应、G C摩尔分数测定、16SrDNA序列对比分析、菌落原位杂交探测特异性基因和PCR扩增冰核基因等鉴定,确定该菌为丁香假单胞菌(P5eudomonas syringae).     

外源水杨酸和冠菌素对当归早期抽薹的影响

【目的】研究叶面喷施水杨酸和冠菌素对当归早期抽薹过程中抗氧化酶、内源激素、多胺、抽薹相关基因表达量的影响,以期为更好解决当归早期抽薹问题提供理论依据。【方法】以喷施水杨酸和冠菌素的当归叶片为研究对象,通过分光光度法、超高效液相色谱串联质谱法、实时荧光定量PCR等实验手段分别测定抗氧化酶活性,内源激素、多胺含量及抽薹相关基因表达量,并通过正交偏最小二乘法分析以上指标与抽薹率的相关性。【结果】相较于对照,水杨酸和冠菌素处理均增强了当归过氧化氢酶和过氧化物酶活性,提高了茉莉酸、生长素、细胞分裂素、褪黑素含量,降低了丙二醛、脱落酸、腐胺、酪胺、苯乙胺含量,下调了抽薹正调控基因HD3A、FT、MADS8、AGL8、GA20X6、GA20OX1表达量,当归早期抽薹率下降。【结论】外源水杨酸和冠菌素均可抑制当归早薹;相较于水杨酸,冠菌素主要通过增强过氧化氢酶活性、降低内源脱落酸含量,抑制当归早薹;证明了水杨酸和冠菌素可以缓解早春干旱、低温、长日照等环境条件造成的当归抽薹。     

环境因子对冠菌素水溶液稳定性的影响

冠菌素是一种新型多功能的植物生长剂。旨在考察冠菌素在水溶液中的稳定性,为其生产、贮存、应用提供指导。采用HPLC测定各处理冠菌素的含量,探究温度、pH、光照和氧化剂对冠菌素稳定性的影响。结果表明,温度25℃和50℃,冠菌素在pH 为4.01、6.86和9.18三种缓冲溶液中180 d降解不到16%,水解半衰期均大于一年,不易水解;高温能显著促进极端pH环境冠菌素的水解,尤其是强碱环境,70℃ 0.1 mol/L NaOH处理12 h后冠菌素仅剩下18%;日光灯照射180 d冠菌素未见显著的降解,紫外光下冠菌素的半衰期仅为61.9 h,说明冠菌素对可见光稳定,对紫外敏感;氧化剂H2O2存在时,冠菌素的降解显著加快,室温和70℃ H2O2处理12 h后冠菌素分别降解了75%和81%。冠菌素对温度、pH、可见光都具有良好的稳定性,对紫外、氧化剂敏感,不宜与具有强氧化性的农用化学品一起存放或使用。     

冠菌素和茉莉酸甲酯对玉米种子萌发和幼苗生长的影响

玉米种子经COR和MeJA处理后发现,低浓度的COR(0.01μmol/L)和MeJA(1.0μmol/L)促进种子萌发;提高了种子中可溶性糖含量、α-淀粉酶活性、增加侧根数和株高,而高浓度COR(1.0μmol/L)和MeJA(100.0μmol/L)则相反;COR和MeJA诱导的根系表面积的增加主要是由于须根数增加导致的;在促进种子萌发方面,COR的活性比MeJA高,大约是MeJA的100倍,初步认为低浓度COR促进种子萌发与诱导的α-淀粉酶有关。     

喷施冠菌素对烤烟生长发育和光合特性的影响

研究了不同浓度的冠菌素对烟草生长发育和光合特性的影响,结果表明:喷施冠菌素对烟草叶片的净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率有着显著的双向影响,即低浓度抑制生长,高浓度则促进生长,0.1和0.05 mL/L冠菌素均对烟草的光合特性和农艺性状有促进作用,而低浓度0.01 mL/L冠菌素处理的烟草各项指标低于对照组,对烟草的生长发育起抑制作用。冠菌素浓度为0.1 mL/L时更适合烟草的生长发育,可以最大程度地提高烟草的品质、产量和经济效益。     

光合细菌对水培番茄生长性状影响的研究

光合细菌是现代农业研究的重点,本实验是以水培番茄为研究对象,向营养液中加入光合细菌,每隔6天测量一次番茄的株高、根长、叶长,纪录比较第一次开花结果的时间和果数,进行数据分析,得出光合细菌对水培番茄的生长性状有明显影响。与对照相比,提高了番茄的生长速度,提前12天左右开花。为将来研究光合细菌在水培技术上的运用提供一定的理论依据。     

喷施冠菌素对烤烟生长发育和光合特性的影响

研究了不同浓度的冠菌素对烟草生长发育和光合特性的影响,结果表明:喷施冠菌素对烟草叶片的净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率有着显著的双向影响,即低浓度抑制生长,高浓度则促进生长,0.1和0.05 mL/L冠菌素均对烟草的光合特性和农艺性状有促进作用,而低浓度0.01 mL/L冠菌素处理的烟草各项指标低于对照组,对烟草的生长发育起抑制作用。冠菌素浓度为0.1 mL/L时更适合烟草的生长发育,可以最大程度地提高烟草的品质、产量和经济效益。     

荧光假单胞菌对东北山樱幼苗光合特性及生长的影响

为探究荧光假单胞菌的作用机制,本文通过盆栽外源根际接种试验,利用便携式CIRAS-Ⅱ型光合测定系统测定4株荧光假单胞菌菌株接种对东北山樱幼苗叶片净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度、饱和水汽压差以及生长指标的影响.结果表明:与对照相比,3-7-2处理能够显著提高净光合速率、蒸腾速率和气孔导度,分别提高19....     

瑞拉菌素对10种作物幼苗生长的影响

用3个浓度梯度的瑞拉菌素稀释液对辣椒、芥菜、萝卜、黄瓜、玉米、韭菜、水稻、小麦、高粱、番茄10种作物进行室内砂培试验,测定供试作物的出苗率、根长、苗高、鲜质量4项指标。结果表明,浸种处理时,3种浓度的瑞拉菌素稀释液对萝卜、玉米、辣椒、芥菜4种作物是安全的,韭菜和水稻的最低安全浓度是100倍的稀释液,黄瓜、小麦、高粱最低安全浓度是400倍的稀释液,但3种浓度的稀释液对番茄生长均有显著抑制作用。     

铁离子对荧光假单胞菌生长及产铁载体的影响

研究不同浓度的铁离子对荧光假单胞菌生长和产铁载体方面的影响,结果显示:适当浓度的铁离子浓度对荧光假单胞菌生长有促进作用;而当铁离子浓度大于lμmol/L时,可以完全抑制荧光假单胞菌铁载体的产生.