ADS-8型大孔吸附树脂纯化金针菇总黄酮工艺的优化及活性测定

为了确定ADS-8型大孔吸附树脂纯化金针菇总黄酮工艺的最佳条件以及纯化后总黄酮的抑菌性和抗氧化性,通过静态吸附和解析试验,探讨了样品液pH、样品液浓度对树脂吸附总黄酮性能的影响,以及在以乙醇为洗脱液的情况下,洗脱液用量和洗脱剂体积分数对总黄酮解析效率的影响,并对纯化后的金针菇总黄酮抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和沙门氏菌4个菌种以及清除2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的能力进行了检测。结果显示,纯化工艺的最佳条件为样品液pH为5,样品液浓度为1.19 mg/mL,洗脱液乙醇的体积分数为70%,乙醇用量为140 mL。在上述条件下金针菇总黄酮的纯化倍数是1.84倍;金针菇总黄酮对4种参测菌均具有抑制效果,抑菌能力大小依次为大肠杆菌>沙门氏菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌;金针菇总黄酮对ABTS·具有清除能力,说明其具有抗氧化性,但弱于对照维生素C。     

绿色溶剂提取玉米芯黄酮的纯化及活性测定

为优化低共熔溶剂提取的玉米芯总黄酮的纯化工艺和测定纯化黄酮的活性,本文首先对几种不同特性的大孔吸附树脂进行筛选,并优化了吸附纯化工艺,然后以对羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS)的清除性能为指标,评价玉米芯黄酮的抗氧化性;又通过体外抑制细菌生长实验来测定黄酮的抑菌性;最后通过体外抑制α-淀粉酶活性实验测定其降糖活性。结果表明,XAD-2树脂和D101树脂在纯化玉米芯黄酮时效果相当,浓度1 mg·mL^-1、pH 4.0的待吸附液以15 mL·h^-1的速度上样吸附,再用70 mL 70%乙醇洗脱液以60 mL·h^-1的速率对树脂进行洗脱,最终可将玉米芯黄酮分别纯化2.05和1.94倍。纯化后的玉米芯黄酮对自由基的清除能力虽弱于V_C,但较之纯化前有所增强;玉米芯黄酮对实验细菌均有抑制性,纯化后的玉米芯黄酮对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用强于纯化前;玉米芯黄酮有降糖活性,较高浓度时其降糖能力接近阿卡波糖。可知低共熔溶剂提取的玉米芯黄酮有抗氧化、抑菌和降糖活性,XAD-2大孔树脂和D101大孔树脂皆可用于纯化玉米芯黄酮,纯化效果好。     

大果沙棘果渣黄酮体外抗氧化活性

采用超声波法提取及大孔树脂吸附法分离纯化大果沙棘黄酮,以芸香苷、儿茶素为对照,测定大果沙棘果渣黄酮对羟基自由基(·OH)、对超氧阴离子(O-2·)、DPPH·自由基、ABTS+自由基的清除能力。结果表明,分离纯化前后的大果沙棘黄酮对超氧阴离子(O-2·)、羟基自由基(·OH)、DPPH·自由基、ABTS+自由基的清除能力都较高,相同浓度下,清除效果略低于芸香苷、儿茶素标准对照品。纯化后总黄酮的体外抗氧化能力都强于粗提黄酮。     

微波辅助高压法提取金针菇黄酮的纯化及活性测定

为了确定微波辅助高压法所制备的金针菇黄酮的生物活性，及其经H103型大孔树脂纯化的最优工艺条件，对此纯化工艺进行了优化，并检测了黄酮的抗菌性，以及它清除2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基（ABTS·）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）和羟基自由基（OH·）的活性。结果显示，此纯化工艺的最优条件是吸附时，样品液pH值为5，浓度为1.45 mg·mL^-1，流速为0.30 mL·min^-1；洗脱时，溶剂乙醇的浓度为70%，流速为2 mL·min^-1，用量为60 mL，纯化后黄酮纯度可达纯化前的3.27倍。金针菇黄酮对四种菌株皆表现出抗菌性，其中对大肠杆菌（Escherichia coli）的抗菌活性最强，其次是沙门氏菌（Salmonella enteritidis），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）第三，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）最弱。该黄酮可清除三种自由基，但清除率都低于VC。可见微波辅助高压法所制备的金针菇黄酮兼具抗菌和抗氧化能力，H103型大孔树脂可以用作纯化金针菇黄酮的介质。     

大孔树脂分离纯化柞树叶总黄酮及其抗氧化活性研究

[目的]研究柞树叶总黄酮的纯化工艺及抗氧化活性.[方法]采用静态吸附与解析的方法,通过比较6种大孔树脂的吸附和解析性能,优选适宜的大孔树脂,并优化适合分离柞树叶总黄酮的解析条件.以VC为对照,对其还原力、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力进行研究.[结果]D101型大孔树脂纯化柞树叶总黄酮吸附与洗脱效果最好,其纯化最佳工艺条件为粗提液浓度0.55 mg/mL、上样流速1.5 mL/min、洗脱剂40％乙醇(V/V)、洗脱流速1.5 mL/min,柞树叶总黄酮纯度可达65.5％;分离纯化后柞树叶总黄酮具有良好的总还原能力以及清除DPPH自由基和抗超氧阴离子自由基活性,其总还原力大于VC的还原力,当质量浓度为0.03 mg/mL时,对DPPH自由基和抗超氧阴离子自由基的清除率分别为85.9％和65.9％.[结论]D101大孔树脂可用于柞树叶总黄酮的分离纯化,柞树叶总黄酮具有较强的抗氧化活性.     

大孔树脂分离纯化荞麦壳黄酮及其体外抗氧化活性

优化荞麦壳黄酮的大孔树脂分离纯化工艺,并比较纯化前后抗氧化活性。采用D101大孔树脂吸附法研究荞麦壳黄酮的动态吸附和解吸条件,探究纯化前后荞麦壳黄酮的 DPPH,·OH,■清除能力和总抗氧化能力,并进一步评价荞麦壳黄酮对SV40MES13细胞氧化损伤的保护和修复作用。结果表明：D101大孔树脂分离纯化荞麦壳黄酮的最佳工艺参数为吸附流速 2 mL/min、样品浓度 6. 0 mg/mL、上样体积 2～3 BV、水洗体积3 BV、洗脱剂乙醇体积分数70%和洗脱流速2 mL/min,分离效果较佳,经纯化,荞麦壳黄酮含量由30.82%提高到 76.17%。纯化后荞麦壳黄酮的 DPPH,■清除能力和总抗氧化能力均高于纯化前。荞麦壳黄酮对高糖或H₂O₂诱导的 SV40MES13细胞氧化损伤具有很强的修复作用,纯化后的荞麦壳黄酮修复作用均高于纯化前,但未显示保护作用。研究结果为荞麦壳黄酮作为天然的抗氧化剂提供科学依据,为荞麦壳作为功能性食品原材料的开发提供了应用前景。     

山竹果皮花青素的提取及抗自由基检测

为花青素提取开辟新途径并实现山竹果皮废物资源化利用,以山竹果皮为原料,采用单因素结合正交试验研究提取时间、温度、料液比及乙醇浓度对山竹果皮中花青素提取效果的影响;采用AB-8大孔树脂纯化花青素提取物,并检测其清除2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)和1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)自由基的能力。结果表明:山竹果皮提取花青素的最佳条件为提取温度75℃,料液比1∶30,水浴提取11h,乙醇浓度60%,此条件下花青素提取量为2 083.5nmol/g。AB-8大孔树脂吸附2h后在pH 1.0的70%乙醇溶液解吸2h,吸附率为32.9%,解吸率为74.3%。此纯化物对2种自由基均具有清除能力,0.024mg纯化物对ABTS+·的清除率为13.8%,对DPPH的清除率为44.3%。     

苦荞叶总黄酮提取纯化工艺研究

[目的]合理开发利用苦荞麦生物资源,延伸苦荞产业链,提高其经济效益;探索适合苦荞叶黄酮工业化生产的工艺方法。[方法]以盛花期的苦荞叶为原料,采用超声波辅助法提取总黄酮,并通过大孔树脂吸附法进行纯化,对提取、纯化工艺进行了优化。[结果]总黄酮最佳提取工艺为:以60%的乙醇为提取剂,提取温度为72℃,料液比为1∶32g·mL~(-1),超声波处理时间为31min,超声波功率为101 W,此工艺条件下苦荞叶总黄酮得率为10.2523%;AB-8树脂对苦荞叶总黄酮纯化效果最好,最佳纯化工艺为:上样液pH为5,浓度为1.50g·L~(-1),流速为1.00mL·min~(-1),上样量为33mL·g~(-1)树脂,洗脱液为75%乙醇,洗脱液pH为5,流速为1.50mL·min~(-1),洗脱液用量为10mL·g~(-1)树脂,测得苦荞叶黄酮的回收率为77.01%,黄酮纯度为90.6%,是纯化前的3.02倍。[结论]苦荞叶中总黄酮的含量高,且易纯化;该提取、纯化工艺可满足工业化生产高效益、低成本、简单易操作的需求,为其工业化生产提供理论依据。     

大孔吸附树脂纯化山楂叶黄酮工艺研究

对4种大孔吸附树脂纯化山楂叶黄酮效果比较分析,结果显示,D101型大孔吸附树脂对山楂叶黄酮溶液吸附和解吸附效果较好。对山楂叶黄酮纯化工艺进行研究,确定了最优的纯化工艺条件为:采用上柱流速为2BV/h,样液pH值为4.0为上柱吸附条件,洗脱液为70%的乙醇溶液,洗脱液用量为4BV,解析液流速为2BV/h是解吸附最优条件。采用D101型大孔吸附树脂纯化后,产品纯度可达94.62%,可用于保健品的分离纯化。     

D101大孔树脂纯化犁头草黄酮的研究

研究D101大孔吸附树脂吸附纯化犁头草黄酮的工艺条件。以总黄酮含量为指标,以UV为检测手段,用不同浓度的乙醇进行洗脱,首次考察D101大孔吸附树脂对犁头草黄酮的吸附和洗脱条件。D101大孔吸附树脂纯化犁头草黄酮的动态吸附容量为709μg/ml,使用3倍体积蒸馏水洗去杂质,使用浓度为50%乙醇,用量为5倍树脂体积时可以完全洗脱提取物中的总黄酮,洗脱物总黄酮含量可达58.3%,提取率为2.1%。D101大孔吸附树脂能有效纯化犁头草黄酮,该工艺简单,成本低,产物纯度高,产率高,可用于犁头草中有效成分的富集分离和大工业生产。